教育部重点实验室开放基金(KLIB-KF200507)
- 作品数：2 被引量：12H指数：2
- 相关作者：方慧英沈微饶志明诸葛健吴蕾更多>>
- 相关机构：江南大学北京联合大学更多>>
- 发文基金：教育部重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 根癌农杆菌介导酿酒酵母的遗传转化被引量：7
- 2006年
- 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)可以将它的Ti质粒的一段T-DNA序列转化到广泛的宿主细胞并能整合到宿主染色体中。作者利用根癌农杆菌转化系统成功地实现了产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)乳清苷酸脱羧酶基因(Ura3)对酿酒酵母(Saccharamyces cere-visiae)W303-1A的Ura3缺陷遗传互补转化,转化率约为3.2个转化子/105个酵母细胞。通过转化子PCR和表型验证说明了T-DNA已经整合进入酵母染色体,并能够稳定地进行遗传表达。
- 张君胜饶志明吴蕾沈微唐雪明方慧英诸葛健
- 关键词：根癌农杆菌酿酒酵母
- 产甘油假丝酵母产甘油关键酶基因在酿酒酵母中的表达被引量：5
- 2006年
- 甘油是一种极其理想的耐高渗透压介质。利用PCR方法,从产甘油假丝酵母WL2002-5中扩增出了2个产甘油的关键酶基因GPD和GPP,分别编码3-磷酸甘油脱氢酶(glycerol3-phosphatedehydrogenase,GPD)和3-磷酸甘油磷酸酶(glycerol3-phosphate phosphatase,GPP)。利用T-Vector在Escherichia coliJM109中克隆得到大量的GPD和GPP基因,并成功构建了重组质粒pYX212-GPD和pYX212-GPP;通过LiAc转化法将重组质粒导入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeW303-1A。初步实验结果表明发酵过程中pYX212-GPD/S.cerevisiaeW303-1A的生物量高于pYX212-GPP/S.cerevisiaeW303-1A和野生型S.cerevisiaeW303-1A;发酵72h后,pYX212-GPD/S.cerevisiaeW303-1A发酵液中甘油含量大约为12mmol/L,明显高于野生型S.cerevisiaeW303-1A的甘油含量,而pYX212-GPP/S.cerevisiaeW303-1A与野生型S.cerevisiaeW303-1A在甘油含量上相差不大,均只有4mmol/L左右。
- 赵有玺饶志明沈微方慧英诸葛健
- 关键词：甘油3-磷酸甘油脱氢酶
