国家高技术研究发展计划(2009AA022109)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 人源抗乙肝表面抗原基因工程抗体的研究被引量：1
- 2012年
- 目的研制人源抗乙肝表面抗原（HBsAg）基因工程抗体。方法采集多个HBsAg加强免疫后表面抗体阳性（HBsAb＋）志愿者的外周血，分离淋巴细胞，构建人源抗HBsAgFab噬菌体抗体基因文库。用纯化的HBsAg对抗体库进行富集筛选，经过序列测定确定抗体轻重链型别，分别克隆入真核细胞表达载体pAc—FcR和HL51—14，转染昆虫Sf9细胞和293T细胞，利用杆状病毒／昆虫细胞系统和哺乳动物细胞系统实现全抗体的分泌型表达。结果成功筛选出20株抗HBsAg的人源Fab抗体并制备出其中6株的IgG全抗体，竞争性ELISA结果显示6株全抗体针对的是HBsAg3个不同表位。结论成功筛选并获得了6株针对3个不同表位的抗HBsAg的IgG全抗体，为治疗性抗体和新疫苗的研制奠定了基础。
- 刘洋孙丽娜李川张福顺梁米芳李德新
- 关键词：细菌噬菌体免疫球蛋白G
- 人源抗狂犬病毒P蛋白基因工程抗体的研究
- 2015年
- 目的 筛选针对狂犬病毒人源基因工程抗体.方法 采集狂犬疫苗免疫人群外周血并分离淋巴细胞,构建抗狂犬病毒Fab噬菌体抗体库,用纯化狂犬病毒CTN株富集筛选,ELISA初步鉴定阳性克隆,测序确定抗体轻重链型别,构建IgG全抗表达载体,转染293T细胞并纯化IgG抗体,采用竞争ELISA、Western Blot和IFA鉴定抗体功能.结果 筛选出1株抗狂犬病毒的人源Fab抗体并表达纯化IgG全抗体,IFA结果显示抗体特异针对狂犬病毒,竞争性ELISA,Western Blot结果显示新筛抗体针对磷蛋白.结论 首次通过Fab噬菌体抗体库技术获得针对狂犬病毒磷蛋白人源抗体,为磷蛋白功能机制研究和狂犬病的诊断提供了新的抗体.
- 刘洋孙丽娜李川梁米芳李德新
- 关键词：狂犬病病毒细菌噬菌体抗体病毒
- 人源抗狂犬病毒基因工程单链抗体的研究被引量：1
- 2012年
- 目的研制人源抗狂犬病毒基因工程抗体。方法从具有高滴度狂犬病毒抗体的疫苗接种者采集外周血淋巴细胞，通过pHAL14载体和高效噬菌体系统构建人源抗狂犬病毒单链基因工程抗体库，经纯化的狂犬病毒aG株富集筛选，通过ELISA和IFA鉴定阳性抗体克隆并进行序列测定。利用IgG表达载体VH／VK双质粒系统瞬时转染293T细胞实现IgG抗体的分泌型表达，通过亲和力测定和中和试验鉴定IgG抗体功能。结果成功地获得了6株抗狂犬病毒糖蛋白的人源单克隆抗体，非竞争ELISA显示6株抗体具有较高的亲和力，体外中和试验证实这6株人源单抗对狂犬病毒C^S株无中和活性，对aG株具有较强的中和活性。结论从免疫库中获得了6株人源单克隆抗体，为狂犬病毒的鉴别诊断和治疗奠定了基础。
- 于礼孙丽娜金晶李川李德新梁米芳
- 关键词：狂犬病病毒
