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国家自然科学基金(81270740)

作品数:8 被引量:14H指数:2
相关作者:唐爱发颜秋霞陈彩蓉蔡志明郭晓燕更多>>
相关机构:深圳市第二人民医院北京大学深圳医院广州医科大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金深圳市科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生

主题

  • 3篇睾丸
  • 3篇细胞
  • 3篇精子
  • 3篇基因
  • 2篇抗原
  • 1篇单克隆
  • 1篇单克隆抗体
  • 1篇单克隆抗体制...
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇凋亡
  • 1篇凋亡过程
  • 1篇新基因
  • 1篇印迹
  • 1篇印迹法
  • 1篇原核表达
  • 1篇人睾丸
  • 1篇弱精
  • 1篇弱精子
  • 1篇弱精子症

机构

  • 6篇深圳市第二人...
  • 2篇安徽医科大学
  • 2篇北京大学深圳...
  • 2篇暨南大学
  • 2篇清远市人民医...
  • 2篇广州医科大学

作者

  • 7篇唐爱发
  • 3篇蔡志明
  • 3篇陈彩蓉
  • 3篇颜秋霞
  • 2篇周秀琴
  • 2篇赵晓英
  • 2篇郭晓燕
  • 2篇陈润强
  • 1篇漆正宇
  • 1篇李介华
  • 1篇江智茂
  • 1篇冼英杰
  • 1篇张小悦
  • 1篇吴汉伟
  • 1篇李家强
  • 1篇王翰
  • 1篇马义
  • 1篇陈燕

传媒

  • 4篇中国男科学杂...
  • 1篇中国现代医学...
  • 1篇免疫学杂志
  • 1篇深圳中西医结...
  • 1篇Journa...

年份

  • 3篇2016
  • 3篇2015
  • 1篇2014
  • 1篇2013
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
睾丸体积、卵泡刺激素和精浆中性α-糖苷酶在无精子症分型诊断中的应用被引量:6
2016年
世界范围内不孕不育人口约占育龄夫妇的15%,无精子症是男性不育症中较为严重的一种类型,占男性不育的10%-20%。无精子症分为梗阻性无精子症(obstructive azoospermia,OA)和非梗阻性无精子症(non-obstructive azoospermia,NOA)两种。以往鉴别无精子症类型主要通过睾丸活检、阴囊探查和输精管造影等有创方法,其临床应用受到制约。因此,寻找无创、简便、准确的无精子症分型的诊断方法实属必要。睾丸体积、血清生殖激素,
颜秋霞陈润强周秀琴陈彩蓉郭晓燕赵晓英蔡志明唐爱发马义
关键词:无精子症睾丸体积卵泡刺激素
ACRV1在正常男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异被引量:5
2015年
目的研究精子顶体小泡蛋白-1(ACRVl)在正常人和弱精子症患者精液精子中的表达差异,探讨ACRVl在弱精子症发生机制中的作用。方法采用计算机辅助精液分析(CASA)技术对精液进行常规分析,经非连续密度梯度离心分离纯化正常男性和弱精子症患者精液精子,以排除生精细胞和白细胞的污染。采用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)和免疫印迹(Western Blot)方法,从mRNA和蛋白水平检测ACRVl的表达及其差异。结果Real.time PCR结果表明,ACRVl mRNA在弱精子症患者精子中的表达量明显低于其在正常对照组精子中的表达量,下降了5.9倍。Westem Blot发现ACRVl蛋白在弱精子症组较正常组下降,该结果与Real-time PCR结果相一致。结论ACRVl基因及蛋白在弱精子症患者精子中的表达下调可能与精子活力下降有密切关系,提示ACRVl基因及蛋白可能是导致弱精子症发生的原因之一。
颜秋霞漆正宇赵晓英郭晓燕陈彩蓉蔡志明唐爱发
关键词:聚合酶链反应印迹法蛋白质弱精子症
人睾丸特异性新基因hT279单克隆抗体制备及其应用
2014年
目的构建人睾丸特异性新基因hT279(GenBank登录号BC016750)的原核表达载体,纯化融合蛋白并以其为抗原免疫Balb/c小鼠制备抗人睾丸特异性hT279蛋白单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法用PCR方法得到睾丸特异性新基因hT279并克隆至pET32a原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21诱导融合蛋白表达;获得的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE鉴定后,免疫Balb/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗hT279 mAb,并通过间接ELISA、Western blot和免疫组织化学法对mAb进行特性鉴定。结果实现了hT279的原核表达,获得了1株稳定分泌抗hT279 mAb的杂交瘤细胞株4B2,抗体亚型为IgG2b(κ),效价达到1×104。Western blot鉴定表明,该mAb在人正常睾丸蛋白中相对分子质量约为22 000处检测到特异条带。免疫组织化学显示hT279蛋白主要在正常人睾丸的精母细胞及圆形精子细胞中表达,而在男性不育患者睾丸组织中表达消失。结论成功制备出1株抗hT279的mAb 4B2,为进一步研究hT279在人类精子发生中的功能和男性不育症的诊断提供了特异的检测工具。
颜秋霞李介华陈彩蓉冼英杰周秀琴陈润强蔡志明唐爱发
关键词:原核表达单克隆抗体男性不育症
STAG2基因在人膀胱癌细胞系5637侵袭迁移和凋亡过程中的作用被引量:2
2016年
目的:研究Stromal antigen 2(STAG2)基因在膀胱癌中的表达,并探讨STAG2基因在膀胱癌细胞侵袭迁移及凋亡过程中的作用。方法:采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)和蛋白印迹法(Western Blotting)分析STAG2在膀胱癌细胞表达特点;利用慢病毒技术过表达STAG2基因转染膀胱癌细胞并使用嘌呤霉素筛选稳定转染细胞株;细胞划痕实验和Transwell实验观察STAG2过表达对膀胱癌细胞迁移和侵袭功能的影响;流式细胞仪检测STAG2基因过表达对膀胱癌细胞的凋亡影响,Western Blotting检测下游分子E-cadherin、Vimentin表达水平。结果:在膀胱癌细胞系5637中STAG2表达远低于正常膀胱上皮细胞;慢病毒过表达效率达到80%以上;STAG2过表达后膀胱癌细胞划痕愈合速度变慢;穿过Transwell小室的细胞数明显变少;膀胱癌细胞凋亡数明显增加,下游分子E-cadherin表达升高、Vimentin表达下降。结论:STAG2可能是一个新的肿瘤抑制基因,在膀胱癌细胞侵袭迁移和细胞凋亡中起着重要。
王翰唐爱发
肿瘤睾丸抗原PRAMEF12在肾细胞癌的表达研究
2016年
目的肿瘤睾丸抗原(cancer-testis antigens,CTAs)可限制性表达于睾丸生殖细胞及肿瘤细胞,并具有高免疫原性等特点,可激发肿瘤患者机体免疫应答,被认为是抗原特异性免疫治疗的潜在靶点。本实验分析和鉴定黑色素瘤优先表达抗原家族成员12(preferentially expressed antigen ofmelanoma family member 12,PRAMEF12)是否为一个新的肿瘤睾丸抗原,并探究其在肾癌组织中的表达。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析PRAMEF12 mRNA在成人多器官正常组织及肾癌组织中的表达特点。蛋白印迹法(Western Blot)及免疫组织化学分析PRAMEF12蛋白在肾癌组织中的表达特点。运用统计学方法分析PRAMEF12蛋白的表达量和病例临床特点之间的关系。结果PRAMEF12显著表达于正常成人睾丸组织及肾癌组织中,但在其他正常组织中未见表达。PRAMEF12在70例肾癌组织中阳性表达率为60%(42/70),并与患者的年龄、性别及病理分期之间无显著统计学意义(P=0.758,P=0.837,P=0.457)。结论 PRAMEF12是一个新的肿瘤睾丸抗原,异常表达于部分肾癌患者,可能促进肾癌的发生与发展。
陈燕唐爱发
关键词:肿瘤睾丸抗原肾肿瘤免疫疗法
Expression of Dickkopf-like1 protein(Dkkl1) in mouse testis
2015年
Objective To investigate the expression and the distribution of Dickkopf-like1(Dkkl1)protein during the development of mouse testis.Methods Testes cD NA samples from BALB/c mice in different postnatal days were hybridized with mouse whole genome affymetrix chip to screen the spermatogenesisrelated genes.The characteristics of the selected genes were analyzed by various bioinformatics tools.The mR NA expression of Dkkl1 at different stages of testis development and different tissues in mouse were analyzed by RT-PCR.The protein localization of Dkkl1 in mouse testis was assesed by immunohistochemistry.Results By analyzing the gene chip signals of mouse testis aged 4 d,9 d,18 d,35 d,54 d and 6 months,Dkkl1 was identified with a differential expression in the developmental stages of testis.RT-PCR analysis showed that the expression of Dkkl1 mR NA was firstly detected on 15 d testis tissue and gradually upregulated during the testis developing to the adult stage.The Dkkl1 protein was predominantly located in spermatocytes and round spermatids in mouse testis.Conclusion The expression of Dkkl1 is gradually upregulated during the development of mouse testis and corresponds to the mouse spermatogenesis.It may play a critical role in male mammalian spermatogenesis.
Qiu-xia YANXiao-yan GUOCai-rong CHENJie-hua LIZhi-ming CAIAi-fa TANG
关键词:小鼠睾丸RT-PCR检测RT-PCR分析睾丸组织精子发生
miR375过表达下调Nit-1细胞中肌侵蛋白的表达
2015年
目的为研究mi R375对肌侵蛋白(MTPN)表达的影响,探寻mi R375在糖尿病中的作用。方法该研究用质粒p AAV-mi R375转染Nit-1细胞48 h后,分别通过Real time RT-PCR和Northern Blot检测Nit-1细胞中mi R375的表达,Western Blot检测Nit-1细胞中MTPN蛋白的表达。结果在转染p AAV-mi R375的Nit-1细胞中mi R375的表达明显升高,是转染空质粒p AAV-MCS和未转染的6倍。MTPN蛋白的表达与转染了空质粒p AAV-MCS和未转染的Nit-1细胞相比,明显下降。结论在Nit-1细胞中mi R375过表达引起了MTPN蛋白表达下调,推测mi R-375可能是通过调节MTPN基因的表达来调控胰岛素分泌的,从而影响体内血糖的浓度。
夏华强廖聆燕周建萍唐爱发
关键词:NIT-1细胞
Lyzl6基因在小鼠中的表达及其生物信息学分析被引量:1
2013年
目的分析Lyzl6基因在小鼠中的表达特点。方法本研究通过RT.PCR实验明确Lyzl6基因在9、15、18、21、28、35d和6月龄小鼠睾丸中的表达变化及Lyzl6基因在成年小鼠各组织表达特点。采用多种生物信息学方法对该基因进行生物信息学分析。结果RT.PCR结果显示,Lyzl6基因在小鼠21d龄及之前的睾丸中没有表达,28d睾丸中开始持续高表达。Lyzl6基因在14种小鼠组织中呈现睾丸显著高表达。经生物信息学分析,Lyzl6蛋白属于典型的C型溶菌酶,是一种分泌蛋白,其蛋白的信号肽剪切位点在第19~20个氨基酸之间。小鼠和人Lyzl6蛋白氨基酸序列有高度相似性和同源性,显示该基因在哺乳动物中高度保守。结论Lyzl6基因为小鼠睾丸年龄依赖性表达基因,在小鼠睾丸中高表达,显示其可能在生精过程发挥重要作用。
张小悦李家强吴汉伟江智茂唐爱发
关键词:计算生物学小鼠
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