广东省自然科学基金(5004747)
- 作品数：5 被引量：26H指数：4
- 相关作者：周晓红顾晓敏黎事伦胡良勇麦荣嘉更多>>
- 相关机构：南方医科大学广州市计量检测技术研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 转基因番茄及其核酸检测技术研究进展被引量：10
- 2009年
- 番茄作为重要的GMCs/GMF(genetically modified crops/food,转基因作物/食品)之一,在我国已被列入第一批实施标识管理的农业GMOs(genetically modified organisms,转基因生物)目录。通过对全球转基因番茄及其核酸检测技术研究现状的分析,阐述了转基因番茄的主要研究方向是研发具有延熟、抗虫等优良性能的番茄新品系,应用于疫苗以及其他药用性蛋白的生物反应器研究;总结了全球已获准上市和在研的重要转基因番茄品系的基因表达盒信息及其核酸检测研究数据;剖析了在转基因番茄核酸检测技术研究中尚存在的如关键性技术标准化以及标准物质缺乏等问题,并提出研究展望。希望为建立与国际接轨的转基因番茄量值溯源传递关键技术体系提供参考。
- 顾晓敏黎事伦胡良勇麦荣嘉周伦彬周晓红
- 关键词：生物工程转基因番茄核酸检测技术
- 冬虫夏草调节细胞凋亡机制的研究进展被引量：4
- 2008年
- 冬虫夏草是我国特有名贵中药材，具有广谱的抗肿瘤作用，诱导肿瘤细胞凋亡是其主要机制之一；冬虫夏草对糖尿病等疾病具有一定的疗效作用也与其抑制相关炎性细胞高水平凋亡相关。冬虫夏草诱导肿瘤细胞、免疫细胞等凋亡呈现多靶点、多环节、多效应的特点，其对多种凋亡相关细胞生物因子的调控及不同细胞信号传导通路的影响，诱导不同的凋亡级联反应发生，从而对机体细胞凋亡系统进行适宜调节以发挥其药理作用，如表现为对肿瘤细胞凋亡的诱导而对免疫细胞等凋亡的抑制等。但是，相关研究目前仍集中于对其抗肿瘤、抗病现象的观察及少数重要凋亡指标的检测，而细胞凋亡的过程是多层次、多因素、多基因协同作用的结果，其确切作用及调控机制十分复杂，冬虫夏草重要活性成份调节细胞凋亡分子机制仍有待深入探索。
- 项鹏周晓红
- 关键词：冬虫夏草细胞凋亡抗肿瘤
- 番茄遗传转化筛选及其子代选育体系的优化研究被引量：8
- 2008年
- 目的以弓形虫多表位抗原基因(MAG)和截短的速殖子主要表面抗原1(tSAG1)为插入子建立优化的番茄遗传转化筛选及其子代选育体系。方法从培养基激素配方、番茄外植体选择等方面进行番茄再生体系的优化。自番茄品种、外植体选材、培养温度、培养基激素配方以及在共培养时是否加入乙酰丁香酮(AS)等进行以农杆菌介导的番茄基因组稳定转化体系的优化。采用不同浓度卡那霉素抗性压力对转基因小苗进行根筛选诱导的比对。转基因番茄幼苗练苗移栽开花结果后收集种子,以无菌播种卡那霉素抗性筛选法进行番茄转基因植株子代的选育。结果子叶较下胚轴具有更强的再生能力,在优化的番茄再生培养基ZB3中,番茄子叶可达到98%(59/60)的高频再生芽萌发率。番茄的转化体系优化,培养基激素配方、培养温度是番茄转化芽诱导过程中的关键影响因素,(23±1)℃能显著提高转化芽的萌发率,AS的施加亦能显著提高番茄转化芽萌发率,Zhongshu No.5番茄子叶于ZB2培养基和(23±1)℃的条件下转化芽萌发率为35%(28/81)。80mg/L卡那霉素抗性进行HK种番茄转化小苗根的筛选诱导比较适宜,生根率为48%(31/65)。抗性苗移栽成活,正常开花结果的转化植株117株。无菌播种,卡那霉素浓度≥100mg/L时能显著抑制非转基因番茄种子的发育尤其是根的萌发与植株的伸长,根出现紫化且无侧根生长;将转基因番茄种子置于150mg/L卡那霉素抗性浓度下培养,能有效进行转基因植株后代遗传分离的选育。结论成功建立番茄高频再生体系以及优化的番茄转化、抗性筛选及其转基因植株子代的选育体系。
- 应彩云黄小琴郭瑜琪钟莉莉刘艳黎事伦顾晓敏周晓红
- 关键词：转基因番茄弓形虫
- 转基因植物疫苗应用于1型糖尿病免疫干预的研究进展
- 2008年
- 1型糖尿病（T1DM）的发生与胰岛β细胞的可溶性抗原如胰岛素、谷氨酸脱羧酶、酪氨酸磷酸酶等密切相关，是一种自身免疫性疾病。诱导免疫耐受可有效维持体内的免疫平衡，以免疫干预T1DM的发生与发展，已成为目前T1DM防治研究的重点方向之一。近年来，以自身抗原经各种途径在实验动物模型中诱导免疫耐受，相继有获得成功的报道。利用植物转基因技术，将谷氨酸脱羧酶等自身免疫抗原基因转入植物细胞内，使其表达相应抗原，通过口服食用此转基因植物组织以诱导机体产生免疫耐受，为T1DM提供了一条新的防治途径。
- 应彩云周晓红
- 关键词：1型糖尿病胰岛素谷氨酸脱羧酶转基因植物
- 转基因番茄Zeneca B,Da,F实时荧光定量PCR检测体系的建立被引量：4
- 2011年
- 目的构建转基因番茄Zeneca B,Da,F品系的质粒标准分子及其实时荧光定量PCR(qPCR)检测体系。方法基于反向遗传学原理构建分别含有番茄内标准基因apx检测序列(ERG-apx),转基因番茄B,Da,F品系pg基因的基因特异性序列(GS-pg)及其构建特异性序列(CS-16S、CS-16A)的番茄内参质粒标准分子pEasy-T3-APX,转基因番茄B,Da,F品系的构建特异性质粒标准分子pEasy-T3-16A、pEasy-T3-16S;以Beacon Designer 7.5设计用于定性PCR和qPCR检测的引物对和Taqman探针;基于质粒标准分子建立了定性PCR和qPCR检测体系,对方法的特异性、敏感性、重复性、检测下限等指标进行评估;使用PicoGreen试剂盒对质粒标准分子进行定量,以质粒pEasy-T3-APX为背景DNA定量混有pEasy-T3-16A或pEasy-T3-16S制备成含量为1%和0.1%(w/w)的两组核酸标准物质,进行所构建qPCR检测体系的定量性能评价。结果锚定qPCR检测靶序列:ERG-apx 108 bp,GS-pg 108 bp,CS-16S 109 bp、CS-16A 102 bp;酶切鉴定所构建的质粒标准分子均可得到预期大小的插入子片段;所建立的实时荧光定量PCR(qPCR)检测体系,重复性的相对标准差(RSD)0.2%～1.5%,检测下限25 copies,标准曲线方程线性关系R2值在0.994～0.998,效率在93.3%～102.4%。经换算系数Cf换算,对PicoGreen定量的样品进行验证,其实测值与真值的偏差是-9.7%～17.3%。结论成功构建了转基因番茄Zene-ca B,Da,F品系的质粒标准分子及其qPCR检测体系,为转基因番茄Zeneca B,Da,F品系转基因成分的监测建立了可行的可供使用的定性与定量检测体系。
- 麦荣嘉陈敏芳莫倩珍胡良勇黎事伦唐敏然顾晓敏蔡永洪周伦彬周晓红
- 关键词：转基因番茄核酸检测技术荧光定量PCR
