湖北省自然科学基金(2003ABA188)
- 作品数：5 被引量：38H指数：3
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- 胞浆型磷脂酶A_2介导弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡被引量：3
- 2004年
- 探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白 (MM LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)凋亡以及胞浆型磷脂酶A2 (cPLA2 )在此过程中的作用 .MTT法测定细胞存活率 ;相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡 ;3 H 花生四烯酸 (3 H AA)预标法测定PLA2 活性 ;蛋白质印迹检测cPLA2 磷酸化 ;激光共聚焦显微镜检测单个细胞内钙离子浓度的变化 .结果表明 ,MM LDL (10 0～ 30 0mg/L)作用后的HUVECs呈现凋亡典型的形态特征 ,凋亡率随MM LDL浓度的增加而上升 .MM LDL能引起胞内钙离子浓度增加 ,cPLA2 的活化及磷酸化 .15 μmol/LAACOCF3 和 5mmol/LEGTA在抑制cPLA2 活性的同时 ,部分抑制MM LDL诱导的HUVECs凋亡 .加入外源性AA (5 0 μmol/L)能逆转AACOCF3 引起的凋亡抑制 .结果提示 ,cPLA2 参与了MM LDL诱导HUVECs凋亡的信号传递 .
- 王■周新汪炳华陈丽达张冀曹金秀
- 关键词：钙花生四烯酸内皮细胞细胞凋亡胞浆型磷脂酶A2
- 高浓度花生四烯酸诱导ECV304细胞凋亡被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨花生四烯酸是否能诱导人膀胱癌细胞ECV30 4凋亡及其可能机制。方法 :噻唑蓝 (MTT)法检测细胞存活率 ,比色法测定乳酸脱氢酶 (LDH)释放率 ,硫代巴比妥酸法测定细胞脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量 ,Hoechst 332 5 8染色观察凋亡细胞核形态变化。结果 :ECV30 4细胞在 80～ 1 6 0 μmol·L-1 花生四烯酸作用 2 4h后 ,细胞存活率明显下降 ,LDH释放率和细胞MDA含量显著增加 (P <0 .0 1 )。经 1 6 0 μmol·L-1 花生四烯酸处理 2 4h后的ECV30 4细胞呈现典型的凋亡核固缩表现 ,琼脂糖凝胶电泳显示DNA凋亡梯带。结论 :80～ 1 6 0 μmol·L-1 的高浓度花生四烯酸能诱导ECV30 4细胞凋亡 ,脂质过氧化作用参与了花生四烯酸致ECV30
- 陈志桥王韵许喜泳张冀陈丽达
- 关键词：花生四烯酸细胞凋亡脂质过氧化ECV304细胞膀胱癌
- 花生四烯酸诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤和凋亡被引量：10
- 2004年
- 探讨花生四烯酸 (AA)能否诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)凋亡及其机制。以不同浓度的AA与细胞分别作用 8、16、2 0和 2 4h ,噻唑蓝 (MTT)法检测细胞存活率 ,Hoechst 3 3 2 5 8染色法观察细胞形态学变化 ,琼脂糖凝胶电泳检测DNA降解 ,流式细胞术测定细胞凋亡率。测定细胞脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量和胞内还原型GSH含量来判断细胞氧化程度。结果表明 ,AA呈浓度和时间依赖性引起HUVECs存活率下降 (P <0 0 1)。AA处理 2 4h的HUVECs可见凋亡典型的形态学变化 ,琼脂糖电泳示“DNAladder”。AA( 5 0～ 15 0 μmol L)作用 2 0h后 ,流式细胞术检测显示细胞凋亡峰 ,细胞凋亡率分别为 2 0 7% ,3 8 6%和 5 2 5 % (P <0 0 5 )。随着AA浓度的增加 ,细胞MDA含量相应增加 ,而胞内还原型GSH含量则减少 (P <0 0 5 )。表明花生四烯酸 ( 5 0～ 15 0 μmol L)能诱导HUVECs凋亡 。
- 王韻汪炳华陈丽达张冀曹金秀李小明
- 关键词：花生四烯酸人脐静脉内皮细胞细胞氧化损伤细胞凋亡脂质过氧化
- 同型半胱氨酸诱导PC12细胞凋亡的研究被引量：10
- 2006年
- 目的:研究同型半胱氨酸(Hcy)在生理浓度铜离子(10μmol/LCu2+)作用下能否诱导PC12细胞凋亡及对bcl-2、bax基因表达的影响。方法:将细胞随机分成对照组和处理组,采用MTT法检测细胞活力;倒置相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡;半定量RT-PCR分析bcl-2和baxmRNA的表达水平。结果:0.125-1.0mmol/LHcy在Cu2+的作用下可以导致PC12细胞凋亡,具有明显的剂量-效应关系;bcl-2mRNA表达降低,baxmRNA表达升高,且效应与Hcy浓度相关。结论:高浓度Hcy在生理浓度Cu2+作用下可诱导PC12细胞凋亡,且凋亡作用与Hcy浓度相关。其机制可能是通过调节bcl-2和baxmRNA的比值起作用的。
- 曹金秀汪炳华王韵陈丽达邹文菁郑颖
- 关键词：同型半胱氨酸PC12细胞细胞凋亡基因,BCL-2
- 川芎嗪对花生四烯酸诱导血管内皮细胞凋亡的保护作用被引量：13
- 2004年
- 目的 研究川芎嗪 (TMP)对花生四烯酸 (AA,16 0μm ol/ L )诱导的血管内皮细胞株 ECV 30 4损伤和凋亡的保护作用及其机制。方法 MTT法检测细胞存活率 ,比色法测乳酸脱氢酶 (L DH)释放率和细胞丙二醛(MDA)含量 ,Hoechst 332 5 8荧光染色法观察细胞核形态变化并测定细胞凋亡率 ,琼脂糖凝胶电泳检测 DNA降解。结果 TMP(0 .2 5～ 1.0 m mol/ L)能浓度依赖性地抑制 AA引起的细胞存活率下降 (P<0 .0 5 ) ,并降低细胞L DH释放率和 MDA含量 (P<0 .0 5 )。 AA处理 2 4 h后的细胞呈典型的凋亡核固缩表现 ,凝胶电泳显示 DNA凋亡梯带 ,TMP(0 .2 5～ 1.0 m mol/ L)能降低其凋亡率 (P<0 .0 5 )。结论 TMP对 AA引起的 ECV30 4细胞损伤和凋亡具有保护作用 。
- 王韻周新汪炳华张冀陈丽达李小明
- 关键词：川芎嗪花生四烯酸内皮细胞细胞凋亡脂质过氧化
