公共文化服务平台

共 3 条记录，以下是 1-3

全选清除导出

排序方式：

大鼠骨髓间充质干细胞转染GATA-4的表达及鉴定被引量：5: 2013年; 目的基因修饰间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)是增加细胞抗缺氧的新方向。文中通过建立稳定的基因重构MSC细胞模型研究GATA-4转染骨髓MSC的特征及鉴定,为GATA-4修饰的MSC应用于急性心肌梗死等心肌疾病的治疗提供有效的技术手段。方法分离、培养及纯化新生大鼠MSC,用流式细胞仪进行鉴定。将培养第3代的MSC用pMSCV逆转录病毒表达系统转染GATA-4基因(MSCGATA-4),对照组为空质粒组(MSCNull)。用RT-PCR、Western blot印迹和免疫组化鉴定转染的效果。结果大鼠MSC表面抗原CD45和CD44表达阴性,CD31表达弱(<3%),CD90表达强阳性,其阳性率达95%。MSCGATA-4组GATA-4 mRNA和蛋白表达明显高于对照组MSCNull。MSCGATA-4组GATA-4和GFP都显示阳性,而对照组只表达GFP。结论 GATA-4成功转染到MSC,这将为研究GATA-4对MSC抗缺氧作用奠定基础。; 李红霞周亚峰蒋彬陈弹杨向军蒋文平; 关键词：骨髓间充质干细胞 GATA4 基因转移技术

GATA-4过表达增加大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞被引量：4: 2013年; 目的研究GATA-4转染骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌细胞及表达心肌细胞特异性标志物的能力。方法分离培养MSCs及心肌细胞(CM)。第3代MSCs转染GATA-4基因(MSCGATA-4)并通过实时定量聚合酶链反应(PCR)、Western blot和免疫组化鉴定GATA-4的表达。MSCGATA-4与CM嵌套式共培养1周,通过real-time PCR和Western blot检测其心肌基因BNP、α-actinin和Islet-1的表达,用免疫组化观察α-actinin的表达。与CM混合共培养后1周后,观察MSCs的搏动情况,并用流式细胞仪检测心肌分化率。结果 MSCGATA-4组GATA-4的表达明显高于对照组(只表达GFP)。MSC与CM嵌套式共培养后,MSCGATA-4组的BNP、α-actinin和Islet-1的mRNA和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。混合共培养后,可见部分MSCGATA-4的搏动,同时部分MSC的α-actinin染色阳性。用流式细胞仪检测心肌分化率,MSCGATA-4组的心肌分化率明显高于对照组(P<0.05)。结论 GATA-4过表达可以增加MSCs分化成心肌样细胞,高表达BNP、α-actinin和Islet-1。; 李红霞周亚峰杨向军蒋文平; 关键词：骨髓间充质干细胞心肌细胞 GATA-4 共培养

GATA-4过表达对大鼠骨髓间充质干细胞保护心肌细胞的影响被引量：1: 2013年; 目的研究GATA-4转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)对心肌细胞(CM)保护的影响。方法体外分离培养BMSCs及CM。实验分为常氧培养CM(A)组、低氧培养CM(B)组、低氧+CM+BMSCsNull(C)组和低氧+CM+BMSCsGATA-4(D)组。倒置显微镜下观察CM形态变化,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、MTT摄取及膜联蛋白V阳性细胞数。结果与A组相比,B组大部分CM明显收缩变圆,LDH释放增多,MTT摄取减少,膜联蛋白V阳性细胞数增加(P<0.05);而C组和D组能改善B组上述各指标变化过程,其中D组作用更为明显(P<0.05)。结论 GATA-4过表达BMSCs与CM共培养可以通过降低LDH释放、增加MTT摄取和降低膜联蛋白V阳性细胞数来保护CM。; 李红霞周亚峰蒋彬杨向军蒋文平; 关键词：骨髓间充质干细胞心肌细胞 GATA-4 心肌保护

全选清除导出

共1页<1>

江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXZZ110118)