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家蚕虎斑基因Ze的SSR标记定位分析被引量：2: 2013年; 虎斑是家蚕常见斑纹之一,在家蚕经典遗传学研究中虎斑性状受位于第3染色体上的显性基因Ze控制。利用雌性家蚕染色体不发生交换的特点,采用家蚕纯合虎斑品系Zebra(ZeZe)作母本,纯合隐性非虎斑品系p50(+Ze+Ze)作父本和回交亲本,组配BC1M分离群体p50×(Zebra×p50),选择其中的479头非虎斑表型个体为作图群体,应用高分辨率熔解曲线(HRM)分析技术筛选出9个与Ze基因连锁的多态性SSR标记进行精细定位。绘制的Ze基因的分子遗传连锁图的遗传总距离为10.7 cM,Ze基因位于6.4 cM处,并得到2个与Ze基因前后相邻的SSR标记s2924-01(nscaf2924:26 159～26 297 nt)和s2930-09(nscaf2930:6 097 376～6 097 542 nt),与Ze的遗传距离分别为1.5 cM和0.2 cM。; 杨思思张业顺刘晓晓张洁葵夏定国余俊杰刘丽丽张国政; 关键词：家蚕 SSR分子标记

基于HRM分析技术的家蚕眠性主基因M的精细定位被引量：1: 2013年; 就眠蜕皮是家蚕幼虫的一种重要生理现象,家蚕眠性性状主要受第6连锁群眠性主基因M控制。用四眠蚕品种大造(p50)与三眠蚕品种C3白构建BC1M群体p50×(C3白×p50),选择其中的598头三眠蚕个体作为定位群体,应用高分辨率熔解曲线(HRM)分析技术进行家蚕基因组SSR标记基因型分析,对M基因进行精细定位。通过HRM筛选出8个与M基因连锁的多态性SSR标记,据此绘制出遗传总距离为2.4 cM的分子连锁图,标记S2853-2527和S2853-2843位于M基因两侧,遗传距离分别为0.2 cM和0.7 cM,M基因位于家蚕基因组nscaf2853:2527929～2843864之间,其间有4个预测基因都属于序列特异的DNA结合转录因子,推测眠性主基因的作用方式可能与DNA序列特异性转录调控有关。研究结果也验证了HRM技术应用于家蚕SSR标记基因型分析的可行性和可靠性。; 刘晓晓张洁葵张业顺杨思思夏定国余俊杰刘丽丽吴阳春张国政; 关键词：家蚕高分辨率熔解曲线分析 SSR标记

基于HRM分析技术和SSR分子标记对家蚕伴性早熟基因Lm^e的精细定位: 2014年; 化性是家蚕的重要生理特性,受第6染色体上的化性主基因V及Z染色体上的伴性成熟基因Lm的影响,伴性早熟基因Lme促进家蚕化性趋向多化性。采用多化性家蚕品种nistari和二化性家蚕品种p50配制BC1M群体[p50×(nistari×p50)],选择其中734头产非滞育卵的雌蛾个体作为定位群体,以其基因组DNA为模板进行SSR标记的PCR扩增,应用高分辨率熔解曲线分析(HRM)技术进行各个标记位点的基因型分析,绘制出遗传总距离为12.91 c M的分子遗传连锁图,Lme基因位于标记s2734-299和s2734-525之间,与2个标记的遗传距离均为0.41 c M。s2734-299和s2734-525间的物理距离为226 kb,其间有18个预测基因,有2个属于DNA序列特异性结合转录因子基因,但尚不能判定这2个基因是否与Lme有明确的关联。; 余俊杰刘晓晓张业顺夏定国张美蓉张国政; 关键词：家蚕化性高分辨率熔解曲线 SSR分子标记

家蚕黑缟基因(pS)的精细定位及色素合成相关基因分析被引量：3: 2014年; p-复等位基因位于家蚕第2连锁群,普通斑纹(+p)与黑缟斑纹(pS)基因均属其中。采用分子标记和HRM结合的基因型分析技术对家蚕黑缟基因进行精细定位,通过RNA-Seq差异表达基因分析筛查与色素合成相关的基因。以幼虫斑纹为黑缟(pS/pS)的品系为母本,普通斑(+p/+p)的品系p50为父本和回交亲本,经杂交及连续多次回交构建BC7M分离群体,以其中的585头黑缟斑纹个体作为定位群体,PCR扩增筛选具有HRM多态性的SSR分子标记,并进行基因型定位分析,将pS基因精细定位于家蚕第2连锁群nscaf2623:97 113~222 422之间,pS基因与相邻的2个标记S2623-97和S2623-222之间的遗传距离分别为0 cM、0.3 cM。用p50继续回交得到BC8,对黑缟斑与普通斑表型个体的幼虫在3眠期每隔2 h分别解剖获取体壁组织,利用RNA-Seq高通量测序技术,在不同斑纹表型个体的样本间筛选出60个显著差异表达基因,对其中与色素合成相关基因的分析表明,黑缟斑纹形成主要是通过加快酪氨酸向多巴的转化速度来实现黑色素的合成。; 刘丽丽刘晓晓余俊杰张业顺夏定国张国政; 关键词：差异表达基因

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国家自然科学基金(31272499)