国家自然科学基金(30060064)
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
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- 相关机构：宁夏大学宁夏医学院中国兽医药品监察所更多>>
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- 产气荚膜梭菌β_2-β_1融合基因的构建及初步表达被引量：3
- 2006年
- 目的构建产气荚膜梭菌β2-β1毒素融合基因并在重组大肠杆菌中表达。方法采用PCR方法,从含β2毒素基因质粒CPB2-9中扩增出β2毒素基因,经NcoⅠ和BamHⅠ双酶切后,回收0.73kb片段,再将含β1毒素基因质粒pXETB1经同样双酶切回收,与β2片段连接,转化BL21(DE3)中,进行诱导表达。结果经SDS-PAGE和Westernblot分析表明,重组菌株BL21(DE3)可表达β2-β1融合蛋白,且该蛋白可以被相应的抗体所识别。结论已成功构建了β2-β1融合基因,并在重组大肠杆菌中表达。
- 曾瑾王玉炯许崇波邓光存马春燕
- 关键词：产气荚膜梭菌毒素融合基因
- 产气荚膜梭菌的β_2毒素基因克隆及其核苷酸序列分析被引量：12
- 2004年
- 利用PCR技术 ,从C型产气荚膜梭菌中国标准株C5 9— 4 4基因组DNA中扩增出了约 0 .7kb的基因 ,并将其克隆到pGEM T载体上 ,经酶切鉴定及核苷酸序列分析表明 ,该基因片段的核苷酸序列与国外报道的 β2 毒素基因序列一致 .
- 王玉炯邓光存曾瑾许崇波李芳
- 关键词：产气荚膜梭菌基因克隆核苷酸
- 产气荚膜梭菌β_2毒素基因的克隆及定点突变被引量：2
- 2004年
- 目的 克隆产气荚膜梭菌 β2 毒素基因 ,并选择可能影响其生物活性的氨基酸的相关碱基位点进行定点突变 ,构建β2 毒素基因的突变体。方法 利用PCR从C型产气荚膜梭菌基因组DNA中 ,扩增出约 0 7kb的基因 ,将其克隆至pGEM T载体上。经GOLDKEY软件分析抗原表位 ,PCR定点突变技术进行 2 34位半胱氨酸→苷氨酸的定点突变。结果 β2 毒素基因核苷酸序列与报道的一致 ,其突变基因 6 99位核苷酸由T→G。结论 已成功克隆了 β2 毒素基因 ,并准确实施了预期定点突变。
- 王玉炯许崇波蒋玉文邓光存曾瑾马春燕
- 关键词：产气荚膜梭菌肠毒血症坏死性肠炎外毒素定点突变
