国家自然科学基金(30060054)
- 作品数：4 被引量：47H指数：3
- 相关作者：林俊芳郭丽琼杨丽卿刘瑞瑞刘世强更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院华南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 金针菇产植酸酶菌株的筛选及植酸酶基因区域的克隆被引量：2
- 2005年
- 从金针菇(Flammulina velutipes)7个菌株中筛选出1株高产植酸酶菌株。根据GenBank中植酸酶基因的保守区设计并合成一对特异性引物,以金针菇菌丝的总DNA为模板,通过PCR扩增,获得了一条长约790bp的片段。DNA序列测定结果表明,该片段长度为788bp,采用Blast软件进行序列比对发现,该片段与平田头菇(Agrocybe pediades)的植酸酶基因phy(GenBankAccession:CAC48160)编码的氨基酸具有64%的序列同源性。该片段含有2个内含子,含有植酸酶基因的活性位点高度保守序列(Active-site sequence)-RHGXRXPT[1]。
- 刘世强郭丽琼林俊芳郭安平
- 关键词：金针菇植酸酶克隆
- 应用cDNA-AFLP技术分离草菇冷诱导表达基因被引量：25
- 2005年
- 采用cDNA-AFLP技术筛选获得了5个草菇冷诱导表达基因片段VC1、VC2、VC3、VC4和 VC5。测序结果表明,5个DNA片段大小分别为247bp、219bp、172bp、350bp和171bp。同源性BLAST 搜索结果显示,VC1、VC2、VC3、VC4和VC5片段目前都没有同源的核酸序列;VC1片段翻译的蛋白质序 列与粗糙脉孢菌(Neurosporacrassa)的假拟蛋白具有一定的同源性,VC2片段翻译的蛋白质序列与水稻的 AMP脱氨酶具有一定的同源性,VC3片段翻译的蛋白质序列与Daniorerio的糖原合酶激酶3α具有较高的 同源性,VC4片段翻译的蛋白质序列与Leuconostocmesenteroides的假拟蛋白有一定的同源性,VC5片段翻译 的蛋白质序列没有搜索到同源序列。
- 郭丽琼林俊芳杨丽卿刘瑞瑞
- 关键词：草菇CDNA-AFLP
- 草菇基因工程育种研究
- 本研究采用基因工程技术,从多种食用菌中克隆了gpd启动子,从异源生物中克隆了目的基因抗冷冻蛋白基因(afp)和多功能纤维素酶基因(mfc),采用多种转化方法把afp基因和mfc基因导入草菇细胞中,有目的地改良现有草菇菌株...
- 林俊芳郭丽琼王杰赵风云张凯
- 关键词：草菇基因工程启动子
- 文献传递
- 单酶切cDNA-AFLP改良法分离草菇冷诱导基因被引量：14
- 2004年
- 采用单酶切cDNA-AFLP改良法克隆分离了十条草菇冷诱导基因片段VC7、VC8、VC9、VC10、VC11、VC12、VC13、VC14、VC15、VC16。DNA序列测定结果表明,克隆分离的十条DNA片段分别为504bp、549bp、555bp、301bp、189bp、602bp、605bp、834bp、703bp、1085bp。同源性BLAST程序搜索结果显示,除VC14与粗糙脉孢菌Neurosporacrassa的钙磷型ATP酶基因有较高的同源性外,其余九条DNA片段目前都没有搜索到同源的核酸序列;而其翻译的蛋白质序列,除了VC11和VC15目前未能搜索到同源的蛋白质序列外,其余八条DNA片段翻译的蛋白质序列与粗糙脉孢菌Neurosporacrassa、裂殖酵母Schizosaccharomycespombe、链霉菌Streptomycesavermitilis等的有关蛋白质序列具有较高的同源性。
- 郭丽琼林俊芳杨丽卿刘瑞瑞
- 关键词：草菇蛋白质序列
- 草菇ras启动子区域的克隆及其序列分析被引量：7
- 2004年
- 根据KajiwaraS[1]等报道的ras启动子的序列设计并合成一对特异引物,以草菇菌丝的总DNA为模板,通过PCR扩增,获得一条长约0.75kb片段。DNA序列测定结果表明,该片段长度为751bp。采用Blast软件和Promoterpredictions软件进行启动子序列结构分析,结果表明,该片段中243～293bp和539～589bp两区域为ras启动子的基础启动子区。在283bp和579bp处有两个转录起始位点,在244～247bp和292～295bp之间有2个TATAbox,在36～39bp、377～380bp、434～437bp和716～719bp之间有4个CAATbox。此外,该片段中还含有9个Gbox、12个Ibox、2个Pbox以及3个重要顺式作用元件:ABRE元件、WUN motif(基元)和HSE元件。
- 刘世强杨丽卿郭丽琼林俊芳
- 关键词：草菇克隆PCR扩增基因工程
