陕西省自然科学基金(SJ08B12)
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 相关作者：魏新元丑敏霞闻盼盼赵艳茹张新颖更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学华中农业大学更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 异形胞分化蓝细菌dnaA温度敏感型突变体的构建
- 2010年
- 以能分化异形胞的蓝细菌(Anabaenasp.PCC7120)为材料,采用重组PCR在体外对控制DNA复制起始的dnaA基因进行定点突变后克隆到整合质粒中,再通过三亲本杂交将整合质粒转移到Anabaena PCC7120中,以分离和筛选温度敏感型突变体。结果成功获得Anabaena PCC 7120 dnaA高温敏感性突变体。研究表明,利用重组PCR技术可在体外实现对Anabaena PCC 7120的dnaA的定点突变,并可通过同源重组双交换成功实行整合质粒中突变基因对野生型基因的置换,使突变基因插入到细胞染色体中,进而成功构建温度敏感型突变菌株。
- 魏新元丑敏霞闻盼盼
- 关键词：DNAA定点突变异形胞
- 异形胞发育的蓝细菌Dna A蛋白的表达研究
- 2009年
- 构建了Anabaena PCC7120的复制起始蛋白Dna A的重组表达质粒,在Escherichiacoli中诱导其超量表达,纯化后免疫家兔获得抗体,采用western blotting检测Dna A在营养细胞和异形胞中的表达情况.结果显示,两种不同类型的细胞中都能够检测到Dna A的表达,而且在不同缺氮诱导时间,异形胞中Dna A的表达存在差异.说明DNA复制起始与异形胞的发育可能存在着一定的关系.
- 魏新元丑敏霞陈文莉
- 关键词：蓝细菌异形胞DNA复制DNA分化
- 重组牛乳铁素融合蛋白的原核表达及其抑菌活性分析
- 2010年
- 为建立生物合成牛乳铁素的方法,根据牛乳铁素氨基酸序列确定其编码序列,利用PCR技术获得基因扩增产物,接着将该产物与编码鱼腥蓝细菌Anabaena sp.PCC7120的DNA聚合酶基因dnaENI中断裂的内含肽基因Asp dnaEIn的PCR产物进行重组PCR,将获得的重组融合基因再克隆到表达载体pET-28a构建重组融合表达质粒。结果显示,融合表达质粒转化大肠杆菌后经诱导能在大肠杆菌表达宿主Escherichia.coli BL21(DE3)中大量表达,且细胞裂解液与纯化的Anabaena sp.PCC7120中含断裂内含肽Asp DnaEIc的DNA聚合酶蛋白DnaECI混合反应后对金黄色葡萄球菌具有抑制作用。
- 魏新元闻盼盼丑敏霞樊明涛
- 关键词：重组PCR融合基因融合蛋白
- 三株食用乳酸菌对抗生素的药敏性研究被引量：2
- 2010年
- 乳酸菌是人体胃肠道内的益生菌,抗生素的施用可能导致乳酸菌功能的降低或丧失。为了了解乳酸菌对药物的敏感性,以便指导人们合理使用乳酸菌制品和施药,本实验通过对保加利亚乳酸杆菌、嗜热链球菌和乳酸链球菌三株常用乳酸菌对氨苄青霉素、氯霉素、红霉素、链霉素和四环素等五种医疗常用抗生素的敏感性进行研究,结果显示,不同的乳酸菌对不同的抗生素表现出不同的敏感性。研究结果提示人们在使用乳酸菌制品时,要注意施用药物对乳酸菌的影响。
- 魏新元张新颖赵艳茹
- 关键词：乳酸菌抗生素敏感性
- 蓝细菌断裂DNA聚合酶DnaE的体内/外反式剪接分析
- 2010年
- 蓝细菌Anabaena PCC7120的DNA聚合酶DnaE由2个断裂基因dnaENI和dnaECI编码.通过纯化它们的部分基因在大肠杆菌中的表达产物DnaENI′和DnaECI′来免疫家兔获得抗体,用于对断裂的DnaE在体内和体外的反式剪接活性进行鉴定.在体外实验中,将2个断裂的DNA聚合酶DnaENI′和DnaECI′混合,进行反应,并利用它们的抗体对反应产物进行鉴定;在体内实验中,利用以上抗体对Anabaena PCC7120细胞总蛋白进行免疫杂交分析.实验结果表明,蓝细菌AnabaenaPCC7120中断裂的2个DnaE多肽在体内和体外均能进行反式剪接.体外实验中,纯化的DnaENI′和DnaECI′的混合反应产生新的蛋白产物,既有成熟的反式剪接产物DnaEN′-,又有剪切了内含肽后的副产物DnaEN′和DnaE,且DTT的存在对剪接反应具有促进作用;此外体内实验中,在Anabaena PCC7120细胞中既能检测到完整的DnaE,也能检测到未作用的DnaENI,但未能检测到DnaECI.
- 魏新元闻盼盼丑敏霞
- 关键词：ANABAENAPCC内含肽反式剪接
