公共文化服务平台

共 8 条记录，以下是 1-8

全选清除导出

排序方式：

鼠肌纤维丝切蛋白CFL2互作蛋白的筛选与鉴定: 2016年; 筛选并鉴定小鼠腿肌组织中与丝切蛋白CFL2相互作用的蛋白质。通过免疫共沉淀技术分离小鼠腿肌组织中CFL2蛋白复合物,对获得的免疫共沉淀复合物进行SDS-PAGE分离,将分离出的差异条带用胰蛋白酶进行酶切,酶切后的肽段进行液相色谱分离,最后通过电喷雾质谱技术分析肽段组成并鉴定蛋白质,获得与CFL2互作的组织蛋白谱。通过Western blot检测,确定在天然状态下小鼠腿肌组织中CFL2与Ndufb7之间存在相互作用。首次利用免疫共沉淀联合质谱技术成功从小鼠腿肌组织中筛选并鉴定出与CFL2相互作用的蛋白Ndufb7,为进一步研究CFL2在骨骼肌肌纤维形成中的作用提供理论基础。; 赵颂杨卉新许晶朱弘焱陶晓莉田玉民苏玉虹; 关键词：免疫共沉淀质谱

利用免疫共沉淀验证肌纤维形成相关蛋白CFL2与MEF2C的相互作用: 2015年; 利用免疫共沉淀技术验证丝切蛋白(CFL2)和肌细胞增强因子-2(MEF2C)之间的相互作用关系。构建带绿色荧光蛋白(GFP)的p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C重组载体,经双酶切鉴定正确后,分别将上述重组载体共转染至人宫颈癌细胞(Hela),利用免疫共沉淀方法验证CFL2和MEF2C之间的相互作用关系。结果表明,p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFPhis-MEF2C重组载体共转染Hela细胞,分别用抗CFL2和抗MEF2C抗体沉淀蛋白复合物,用MEF2C和CFL2抗体进行Western blot检测,检测到p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C和p EGFP-N1-CFL2的表达。本试验成功构建p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C真核表达重组载体,在Hela细胞中表达后利用免疫共沉淀的方法证实了CFL2和MEF2C之间存在相互作用。; 许晶朱弘焱田玉民苏玉虹; 关键词：相互作用免疫共沉淀

鼠skMLCK多肽抗体的制备与鉴定: 2015年; 为制备鼠骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(sk MLCK)多肽抗体,根据NCBI Gen Bank中报道的sk MLCK的一级结构信息,利用TMHMM2.0和DNA Star软件分析此蛋白的跨膜结构域、二级结构、亲水性、疏水性等,以及综合分析考虑抗体设计的其他相关因素,设计出一段14个氨基酸的多肽。将合成后的多肽同牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,将BSA偶联后的sk MLCK多肽免疫新西兰大白兔,3个月后采集血清,亲和纯化抗sk MLCK多肽抗体。ELISA法检测效价,Western blot和免疫荧光法检测抗体特异性。结果得到了高效价和高特异性的鼠sk MLCK多肽抗体,ELISA法测定其效价可达到1∶128 000,并可用于免疫荧光和Western blot的研究,为后续研究sk MLCK基因提供物质基础。; 许晶朱弘焱田玉民苏玉虹; 关键词：多肽抗体特异性

CFL2基因低表达对骨骼肌肌纤维相关基因的表达影响被引量：2: 2017年; 为了研究CFL2基因与骨骼肌纤维相关基因之间的关系,本试验运用已筛选的CFL2低表达细胞株,利用实时定量和Western blot技术检测CFL2基因低表达对肌纤维组成成分MLC、α-actin与肌纤维类型MyHCslow、MyHC2b、MyHC2a、MyHC2x表达的影响。结果表明,低表达CFL2后,肌纤维组成成分MLC和α-actin的表达均显著上调(P<0.05)。MyHC2x、MyHC2b、MyHC2a、MyHCslow的表达均显著下调(P<0.05)。说明CFL2可能起到通过调节MyHC类型转换来达到调节红白肌肉比例的效果,进而直接影响猪肉品质。; 张宇婷解放朱弘焱田玉民苏玉虹; 关键词：低表达肌纤维

猪乳糖酶基因启动子及增强子的活性研究被引量：1: 2014年; 采用PCR、TA克隆、构建pGL3.0 Basic荧光素酶报告基因载体并转染Caco-2细胞、Dual-Glo萤光素酶检测系统检测细胞系中荧光信号值的方法分析猪乳糖酶基因不同基因型的启动子与增强子活性。结果表明:GA型启动子和CG型启动子相比差异极显著(P=0.001),CG型启动子能显著促进猪LCT基因表达,而GA型启动子不能促进基因表达。A型增强子,可以使GA型启动子活性显著增强(P<0.05),使CG型启动子活性显著降低(P<0.01);G型增强子对GA型启动子或CG型启动子,均起显著的抑制作用(P<0.01)。猪LCT增强子和启动子多态性位点组合形成的单倍型促进基因表达的作用从高到低顺序为:A型增强子+GA型启动子>A/G型增强子+CG型启动子>G型增强子+GA型启动子。; 杜海廷田玉民苏玉虹巴彩凤; 关键词：乳糖酶基因 CACO-2 荧光素酶报告基因

猪CFL2基因启动子区CpG岛的甲基化研究: 2015年; 运用生物信息学方法对猪CFL2基因启动子区CpG岛进行预测,并采用甲基化特异性PCR （MSP）和重亚硫酸盐测序（BSP）分析猪CFL2基因启动子区CpG岛的甲基化状态.生物信息学研究发现,猪CFL2基因启动子区存在CpG岛,并且在启动子区的995 ～2 045 bp区域的GC分布密集.通过BSP法证明了长白猪CFL2基因启动子区CpG岛出现甲基化,MSP法出现部分甲基化,提示只有1条链被甲基化,为猪CFL2基因在肌肉组织中的表达可能受甲基化调节提供了理论基础。; 解放王佳美朱弘焱郎斌丛玲毕雪苏玉虹; 关键词：CPG岛甲基化 MSP BSP

γ-氨基丁酸对大骨鸡生产性能和下丘脑采食调控相关基因调控研究被引量：2: 2017年; 为了研究γ-氨基丁酸(GABA)对大骨鸡生产性能和下丘脑采食相关基因表达的影响,将120只21日龄大骨鸡分成4组,分别在基础日粮中添加GABA 0、5、50和500 mg/kg,每组3个重复,每重复10只,试验为期2周。分析各组鸡生产性能并检测下丘脑NPY、AgRp、GABAA-α1、MC4R和POMC基因的mRNA表达量。结果:与对照组相比,日粮中添加5 mg/kg GABA(低剂量)对增重无显著影响(P>0.05),50 mg/kg(中剂量)组极显著提高平均日增重(P<0.01),500 mg/kg(高剂量)组极显著降低平均日增重(P<0.01)。与对照相比,高剂量组大骨鸡公鸡下丘脑GABAA-α_1 mRNA和MC4R mRNA表达显著提高(P<0.05),而POMC mRNA和AgRP mRNA极显著降低(P<0.01),NPY mRNA无显著变化(P>0.05);高剂量组母鸡GABAA-α_1 mRNA极显著降低(P<0.01),NPY mRNA显著降低(P<0.05),而MC4R mRNA显著提高(P<0.05)。试验提示,日粮中添加GABA,对大骨鸡下丘脑采食调控基因表达均有影响,且存在性别差异。; 柯岩毕雪朱弘焱任韧苏玉虹田玉民; 关键词：Γ-氨基丁酸大骨鸡

猪骨骼肌肌球蛋白轻链激酶单克隆抗体制备及鉴定被引量：2: 2017年; 为制备猪骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(skMLCK)的特异性单克隆抗体,设计合成多肽并与载体蛋白偶联,经细胞融合、培养基筛选、阳性细胞的检测与单克隆化后,获得3株能稳定分泌抗skMLCK单克隆抗体的杂交瘤细胞株;种植BALB/c小鼠腹腔,收集腹水,纯化后得到skMLCK的单克隆抗体。分别应用高效液相色谱、质谱和Western blot对纯化单克隆抗体进行抗体纯度、效价和敏感性检测。结果显示:获得的猪skMLCK单克隆抗体,能特异性识别skMLCK纯化蛋白、猪肌肉组织的内源性蛋白。本试验成功制备了能特异性结合猪skMLCK的单克隆抗体,这为今后进一步研究探讨skMLCK对猪肌肉发育的影响提供物质基础。; 杨卉新朱弘焱陶晓莉苏玉虹田玉民; 关键词：单克隆抗体特异性

全选清除导出

共1页<1>

国家自然科学基金(31272415)