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外源褪黑素对猪卵母细胞体外成熟的影响: 引言/目的褪黑素(Melatonin,MLT)是一种广泛存在于生物有机体各组织器官的多功能内源性激素,对动物生殖细胞及胚胎发育有重要影响。但MLT在猪卵母细胞体外减数分裂成熟过程中的作用及机制尚不清晰。本研究采用体外培养...; 洪仁芸陈真李辉左小元丁彪张运海

外源褪黑素对猪卵母细胞体外成熟的影响: ＜正＞引言/目的褪黑素（Melatonin,MLT）是一种广泛存在于生物有机体各组织器官的多功能内源性激素,对动物生殖细胞及胚胎发育有重要影响。但MLT在猪卵母细胞体外减数分裂成熟过程中的作用及机制尚不清晰。本研究采用体...; 洪仁芸陈真李辉左小元丁彪张运海

可溶性Sox2-11R重组蛋白的制备与鉴定: 2014年; 旨在通过原核表达制备可溶性Sox2-11R重组蛋白,并验证其穿膜能力。首先,采用增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)与蛋白转导域11聚精氨酸(11 arginine,11R)的融合表达和与成纤维细胞的共孵育验证11R的穿膜能力。其次,将目的基因Sox2-11R在原核表达载体pET30a中表达,通过优化表达条件获取可溶性Sox2-11R重组蛋白。最后,利用Ni柱纯化重组蛋白,SDS-PAGE及Western blotting对其进行鉴定;并用免疫荧光染色验证重组蛋白是否具有进入细胞核的能力。结果表明,成功构建了pET30a-Sox2-11R原核表达载体,纯化的Sox2-11R重组蛋白具有穿膜能力,且在细胞培养基中具有较高溶解度,这为制备其他重编程因子的重组蛋白提供了参考,也为外源蛋白诱导iPSCs奠定了基础。; 李侠姜少帅韩菲张鹏飞张运海; 关键词：SOX2 重组蛋白可溶性

Nesfatin-1对猪卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响: 引言/目的研究表明,Nesfatin-1是一种调控动物代谢的新型多肽,其主要参与调节鱼类和啮齿类动物的繁殖活动。然而,Nesfatin-1在大型家养动物繁殖中的研究还未见报道。本研究对猪Nesfatin-1基因进行了系统...; 左小元杨洁洪仁芸李辉丁彪张运海

Nesfatin-1对猪卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响: ＜正＞引言/目的研究表明,Nesfatin-1是一种调控动物代谢的新型多肽,其主要参与调节鱼类和啮齿类动物的繁殖活动。然而,Nesfatin-1在大型家养动物繁殖中的研究还未见报道。本研究对猪Nesfatin-1基因进行...; 左小元杨洁洪仁芸李辉丁彪张运海

不同培养条件和卵母细胞来源对黄牛卵母细胞第一极体排出的影响: 2013年; 研究了培养液组分浓度、培养方法和卵母细胞来源对黄牛卵母细胞第一极体(PB1)排出的影响。从屠宰场收集黄牛卵巢,使用抽吸法获取卵丘卵母细胞复合物(COCs)进行体外培养。结果表明,采用以下培养条件能够显著促进黄牛卵母细胞PB1排出:在培养液中添加10μg·mL-1FSH和LH、1.0μg·mL-117-βE2、33.0μg·mL-1丙酮酸钠;培养时间24 h,培养密度每50μL培养液培养10～20枚COCs;卵巢储运温度25～37℃,储运时间<3 h,卵泡直径3～6 mm,卵丘细胞包裹2层以上。选择最佳的培养液组分浓度、培养方法和卵母细胞来源可获得最大PB1排出量,为下一步利用PB1进行保护物种、扩大优良母畜遗传资源的来源和植入前遗传学诊断等研究提供参考。; 李东伟章美玲张运海章孝荣; 关键词：黄牛卵母细胞体外培养

猪多能干细胞的研究进展被引量：1: 2014年; 多能干细胞,如胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)、诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)和成体干细胞(adult stem cells,ASCs),是一类具有巨大潜能的独特细胞。猪作为试验材料,在遗传、代谢、生理生化及基因序列等方面较小鼠更接近于人类,正逐渐成为人类异种移植和再生医学研究的理想生物学模型。然而,目前对猪多能干细胞种类、来源、特征及机制的有限认识直接阻碍了其相关应用。该文将分别对猪ASCs的研究现状、猪类ESCs的分离培养、猪iPSCs的研究进展、多能干细胞间的联系和展望进行论述,以期为从事该领域研究的科研人员提供参考。; 李侠李运生张运海; 关键词：多能干细胞胚胎干细胞诱导多能干细胞成体干细胞

化学限定性培养基中添加卵泡抑素对猪胚胎体外发育的影响: ＜正＞引言/目的卵泡抑素（Follistatin,FST）能够加速牛和恒河猴早期胚胎第一次卵裂,并提高囊胚发育效率及质量。在非限定性培养基中添加FST虽然对猪胚胎早期体外发育没有像牛、猴上有显著促进作用,我们推测可能是由...; 李辉宋丹丹洪仁芸丁彪左小元张运海

化学限定性培养基中添加卵泡抑素对猪胚胎体外发育的影响: 引言/目的卵泡抑素(Follistatin,FST)能够加速牛和恒河猴早期胚胎第一次卵裂,并提高囊胚发育效率及质量。在非限定性培养基中添加FST虽然对猪胚胎早期体外发育没有像牛、猴上有显著促进作用,我们推测可能是由于非限...; 李辉宋丹丹洪仁芸丁彪左小元张运海

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国家自然科学基金(31272442)