全球变化研究国家重大科学研究计划(2012CB945101)
- 作品数：10 被引量：127H指数：5
- 相关作者：张博王贵学黄鹏沈延朱作言更多>>
- 相关机构：北京大学重庆大学中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：全球变化研究国家重大科学研究计划国家自然科学基金中国科学院战略性先导科技专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 血流剪切应力与动脉粥样硬化被引量：10
- 2012年
- 动脉粥样硬化（atherosclerosis，As）斑块的形成是心血管疾病的共同病理学基础，其发生发展是一个多步骤、多因素、多因子参与的慢性炎症过程。研究发现，As病变好发于动脉的弯曲、分又及分支部位，如主动脉弓、颈动脉分支、冠状动脉、腹主动脉分支和股动脉分支等剪切应力异常的区域，表现为As发生部位的局灶性。
- 危当恒王贵学
- 关键词：剪切应力内皮细胞动脉粥样硬化
- 模拟微重力对斑马鱼血管发育有显著影响
- 随着空间生命科学的发展,微重力对生物体的影响及其机理研究已成为科学家们日益关注的课题。航天员对失重环境的适应及返回着陆后出现的立位耐力下降,与心血管机能有着密切联系。开展模拟微重力下的血管生成研究,具有重要意义。大量研究...
- 孙婷谢翔汤川政黄露周添邱菊辉王贵学
- 血脑屏障的研究进展被引量：43
- 2016年
- 血脑屏障精密控制血液与脑组织的物质交换,对维持脑内微环境的稳定至关重要。血脑屏障是脑内的毛细血管内皮细胞彼此紧密相连,同时与周围的周细胞和星形胶质细胞相互作用形成的屏障系统。组成血脑屏障的细胞通过表达紧密和黏附连接蛋白、转运体、及相关信号分子,调节血脑屏障的发育和功能。神经元和小胶质细胞在生理和病理状态下也参与血脑屏障的功能调节。近年来研究显示,多种神经系统疾病的发生与发展,都伴随着血脑屏障结构和功能的破坏。因此,对血脑屏障的研究,将深化对神经-血管相互作用的认识,为神经系统疾病的诊疗提供重要的理论依据。本文概要总结血脑屏障的研究现状和进展,并对未来发展作出展望。
- 许兵张俞杜久林
- 关键词：血脑屏障血管内皮细胞周细胞星形胶质细胞神经元神经系统疾病
- 类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)介导的基因组定点修饰技术被引量：53
- 2013年
- 人工构建的序列特异性核酸内切酶能够识别并切割特定的DNA靶序列,造成双链断裂,从而引起基因组结构的定点改变。人工核酸内切酶技术使得研究人员有可能对任意物种的基因组进行定点修饰,开启了反向遗传学研究的新天地。类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)自2010年底开始成功应用于基因打靶,很快成为一种比锌指核酸酶(Zinc-finger nuclease,ZFN)更容易设计、特异性更高和毒性更低的人工核酸内切酶。文章综述了TALEN技术的研究进展及应用前景,重点介绍TALEN的结构、作用机制与构建方法和利用TALEN进行基因组定点修饰的策略,以及目前利用这一技术已成功实现突变的物种及内源基因,特别是在斑马鱼中的应用,为开展这一领域的研究工作提供参考。
- 沈延肖安黄鹏王唯晔朱作言张博
- 水平回转培养对斑马鱼血管发育的影响被引量：2
- 2013年
- 随着空间生命科学的发展,微重力对生命体的影响已成为科学家们日益关注的问题。多数研究表明,微重力对生物体胚胎早期发育有着重要影响,而血管系统作为胚胎最早行使功能的系统备受关注。目前关于微重力对血管发育影响的研究大多来自对离体培养细胞的体外回转模拟实验,在体实验相对较少。文章利用斑马鱼作为模式动物,在体探究水平回转培养环境下斑马鱼胚胎早期发育及水平回转培养对其血管系统发育的影响。在斑马鱼受精后24 h(24 hpf)时进行水平回转培养处理,至36 hpf时收集胚胎,通过体视显微镜观察斑马鱼表型变化,通过半定量RT-PCR、qPCR及全胚原位杂交等手段对比水平回转培养环境下与对照组血管相关因子的表达情况,并通过BrdU掺入及TUNEL法进行斑马鱼全胚细胞凋亡及增殖检测。结果表明,在90 r/min水平回转培养环境下,斑马鱼死亡数量没有差异,24 hpf时破壳数量显著降低(10.3±0.41 vs.0.0,P<0.05),心率显著加快(223.5±2.32 vs.185.0±3.23,P<0.05),黑色素明显增加,动静脉发育紊乱,且在120 r/min转速下,胚胎血管特异性表达因子flk1、flt4及ephrinB2的表达均显著降低,斑马鱼细胞凋亡明显增加,而细胞增殖无显著差异,提示水平回转培养对斑马鱼胚胎发育特别是早期血管发育具有重要影响。
- 孙婷谢翔张剑卿包静汤川政雷道希邱菊辉王贵学
- 关键词：斑马鱼血管发育
- MyosinⅡ是血管内皮细胞力学信号转导的关键因素
- <正>由于血管动脉和静脉一直处于持续的血液循环系统中,因此内皮层作为血流的直接接触者是感知生物力学、周向应力以及剪切力的承载体。血流动力学通过影响内皮细胞形态结构,特别是细胞骨架变化,来影响内皮功能和基因表达,从而影响胚...
- 谢翔孙婷黄露周添邱菊辉王贵学
- 文献传递
- 大众化的基因组定点修饰技术--从TALEN到CRISPR/Cas系统
- 近年来，以锌指核酸酶(ZFN)和TALEN为代表的人工构建的序列特异性核酸内切酶为基因组定点修饰技术带来了革命性的飞跃，使原来只能在小鼠、果蝇等极少数物种中实现的基因打靶迅速扩展到多种实验材料.本实验室在斑马鱼中建立了一...
- 刘达王展翔肖安张雨田李文渊祖尧姚少华林硕张博
- 关键词：斑马鱼基因打靶
- 用心看,用眼听,目遇之而为声被引量：1
- 2012年
- 处理外界输入的感觉信息,准确感知周围环境是大脑最重要的功能之一。在过去几十年里,单独感觉信息的加工机制已经被广泛地研究,其神经机制也逐渐被人们所了解。但是,在真实的生活场景中,往往有多种类的感觉信息一起输入大脑,并经过组合,引起综合的输出。受限于实验手段,科学家一直很难同时对多种感觉信息加工进行研究,不能用微观观察到的实验现象圆满地解释宏观发生的多感觉感知,因此多感觉模态信息加工的神经机制到现在依然很不清楚。杜久林实验室创造性地想到使用斑马鱼这一模式生物,对清醒的动物给予多种感觉刺激并进行细致的电生理学记录,终于探索出一套从视觉神经结构发起,对听觉信息处理过程进行调节的神经机制。这种跨感觉模态调节的神经机制,第一次将微观的细胞学变化无缝连接到宏观的多感觉信息处理;同时,它也展示了一种研究的方法过程,帮助今后的多感觉研究能更加深入地开展。
- 穆宇李小泉
- 关键词：神经机制信息加工信息处理周围环境
- 应用双荧光报告系统检测斑马鱼microRNA的动态表达被引量：2
- 2012年
- microRNA(miRNA)是一类细胞内源表达的小分子非编码RNA,主要通过降解靶基因的mRNA或者抑制靶基因的翻译,在动植物的发育以及其他重要的生理过程中起调控作用。miRNA的功能跟它的表达位置与时间密切相关,但是目前尚缺乏一个能够在活体与个体水平稳定、持续地实时观察miRNA动态表达的方法。文章以斑马鱼为模式,建立了一个双荧光报告系统(我们称之为miRNA Tracer),用于在斑马鱼整体胚胎中追踪特定miRNA的表达谱及动态变化过程。该系统以Tol2转座子为基础,采用来自斑马鱼hsp70基因的热激启动子分别驱动eGFP和mRFP1荧光报告基因,同时在其中一个报告基因的3′-UTR区连接待测miRNA的互补序列,构成Tracer质粒。该互补序列与斑马鱼胚胎中相应的内源miRNA结合后能够使对应报告基因的荧光信号强度减弱,通过比较两个报告基因在表达谱上的差异辨别miRNA的表达区域,检测斑马鱼胚胎中miRNA起作用的位置和时间。文章选择在肌肉系统特异表达的miR-206以及在神经系统特异表达的miR-219,分别在显微注射瞬时表达和转基因稳定整合等两个层次上验证了上述Tracer系统。结果表明,所用的方法能够如实地在单细胞水平和整体水平检测到目标miRNA的时空表达动态变化。miRNA Tracer系统为在斑马鱼发育过程中对miRNA进行活体、实时的时空定位提供了一个独特而有效的方法,也为对miRNA进行功能与作用机制等更深入的研究奠定了基础。
- 杨红波梁巍刘新星朱作言林硕张博
- 关键词：斑马鱼MIRNA
- 斑马鱼精子冻存与复苏实验方法与流程被引量：6
- 2012年
- 斑马鱼是研究胚胎发育及其遗传机制的重要模式脊椎动物。目前人们已经积累了大量的突变体和转基因鱼系,如何安全、妥善地长期保存这些品系是每一个研究斑马鱼的实验室都会面临的问题。精子冻存与复苏技术是目前最为简单有效的一种长期保存斑马鱼遗传品系的方法。应用这一技术不仅可以节省大量的鱼房空间与人力、物力,使鱼系的使用与保存更加灵活和持久,更重要的是能够防止珍贵鱼系的意外丢失,为鱼系保种提供额外的保障。这类方法一般是通过体外挤出精子或研磨精巢获取新鲜的精子,用适量的冻存液混匀后,分装保存在液氮罐中。需要时可以随时通过体外授精的方法使精子复苏。经过30年的发展,随着冷冻保护剂的不断改良和冻存与复苏条件的不断优化,斑马鱼精子冻存与复苏技术已逐渐成熟。文章简单回顾了斑马鱼精子冻存与复苏技术的历史与发展,并重点介绍本实验室自2005年以来常规使用的斑马鱼精子冻存与复苏的方法及具体流程。
- 郑乃中张博
- 关键词：斑马鱼体外授精
