国家自然科学基金(20706024)
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 代谢工程改善野生酵母利用木糖产乙醇的性能被引量：4
- 2008年
- 从256个自然样品中筛选得到1株可高效转化D-木糖的酵母。通过生理生化和分子生物学方法鉴定,证实该菌株是属于Candidat ropicalis。以该酵母为研究对象,增加木糖醇脱氢酶表达量,通过改变代谢流以达到提高酒精产率的目的。以pXY212-XYL2质粒为基础载体,构建了含有潮霉素抗性的pYX212-XYL2-Hygro,电击转化进入野生型C.tropicalis,潮霉素抗性筛选,得到含高拷贝木糖醇脱氢酶基因的重组菌株C.tropicalis XYL2-7。重组菌的比酶活达到0.5u/mgprotein,比原始菌株提高了3倍。实验表明,重组菌木糖醇得率比原始菌株降低了3倍,酒精得率提高了5倍。首次通过实验验证了热带假丝酵母利用木糖产乙醇的可行性,这对研究酵母利用秸秆、麦糠、谷壳等纤维质农业废弃物生产燃料乙醇具有重要启示。
- 张凌燕张梁丁重阳王正祥石贵阳
- 关键词：热带假丝酵母木糖乙醇木糖醇脱氢酶
- 扣囊复膜孢酵母BGL1基因在工业酒精酵母中的整合表达被引量：2
- 2008年
- 构建了含有工业酿酒酵母自身GPD2启动子和终止子、扣囊复膜孢酵母β-葡萄糖苷酶基因(BGL1)和潮霉素选择性标记hyg的重组质粒pPIC-gpd-bgl-hyg,通过酵母染色体同源重组,将BGL1基因整合进入工业酒精酵母的染色体上。重组酵母可以在以纤维二糖为唯一碳源的培养基上生长,48h时β-葡萄糖苷酶酶活达到0.764U/mL。在玉米浓醪酒精发酵实验中,与宿主菌株相比,重组酵母醪液中纤维二糖含量减少约80%,达到了消耗醪液中纤维二糖含量的目的。
- 张梁周衍石贵阳
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶同源重组
- 甘油代谢对酿酒酵母酒精发酵的影响被引量：2
- 2008年
- 以工业酒精酵母菌株(Saccharomyces cerevisiae Y)为对象,通过生孢子法获得其a型和α型单倍体。根据同源重组原理构建整合载体pUC19-GPD1::ΩKm线性化后电击转化进入a型单倍体,G418抗性筛选缺失GPD1基因的转化子S.cerevisiae Y(a,△gpd1)。重组菌S.cerevisiae Y(a,△gpd1)与α型单倍体杂交获得二倍体,采用PCR扩增法鉴定得到GPD1全突变菌株S.cerevisiae Y(△gpd1,△gpd1)。分别以20g/L和150g/L的初糖在摇瓶中进行发酵实验考察。结果表明,S.cerevisiae Y(a,△gpd1)的葡萄糖转甘油率分别从12.43%和6.04%降低到9.35%和5.54%,葡萄糖转酒精率分别从36.4.9%和39.96%提高到36.91%和40.29%;而S.cerevisiae Y(△gpd1,△gpd1)的葡萄糖转甘油率分别从14.16%和7.49%降低到10.46%和5.79%,葡萄糖转酒精率分别从36.23%和39.89%提高到38.52%和41.50%。
- 张国英郭忠鹏张梁丁重阳王正祥石贵阳
- 关键词：微生物酒精酵母乙醇甘油
- 一株高效利用木糖的酵母菌的分离及鉴定被引量：7
- 2008年
- 从256个自然试样中筛选到1株高效转化D-木糖为木糖醇的酵母菌株441-28-1。初始木糖质量浓度为90 g/L的条件下,24 h内的木糖利用效率为3.0 g/(L.h)。通过高效液相分析,菌株441-28-1的主要代谢产物为木糖醇。在初始木糖质量浓度为65 g/L的条件下,摇瓶分批发酵,木糖醇生成速率达1.1 g/(L.h),木糖醇转化率为70%。经过形态、生理生化特征测定,以及ITS序列分析(GenBank的登记号为EU121523),将441-28-1菌株鉴定为热带假丝酵母(Candida tropicalis)。Candida tropicalis(热带假丝酵母)已保存于中国高校工业微生物资源数据平台,保藏编号CICIM Y0092。
- 张凌燕张梁王正祥石贵阳
- 关键词：热带假丝酵母木糖木糖醇乙醇
