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国家高技术研究发展计划(2001AA221041)

作品数:6 被引量:2H指数:1
相关作者:张斌周严袁建刚范明强伯勤更多>>
相关机构:中国医学科学院中国协和医科大学中国医学科学院军事医学科学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 3篇医药卫生

主题

  • 4篇克隆
  • 3篇基因
  • 3篇基因克隆
  • 2篇蛋白
  • 2篇神经系
  • 2篇神经系统
  • 2篇全长CDNA
  • 2篇RTN
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇神经细胞
  • 1篇神经细胞黏附...
  • 1篇死因
  • 1篇内质网
  • 1篇内质网膜
  • 1篇球蛋白
  • 1篇中枢神经
  • 1篇中枢神经系统
  • 1篇肿瘤
  • 1篇肿瘤坏死因子

机构

  • 2篇军事医学科学...
  • 2篇中国医学科学...
  • 2篇中国医学科学...
  • 1篇北京协和医院

作者

  • 2篇彭小忠
  • 2篇强伯勤
  • 2篇范明
  • 2篇袁建刚
  • 2篇周严
  • 2篇张斌
  • 1篇李光涛
  • 1篇刘炳岩
  • 1篇胡晓燕
  • 1篇陶波
  • 1篇代芸
  • 1篇汪俊华
  • 1篇陈建萌

传媒

  • 2篇中国医学科学...
  • 1篇中国科学(C...
  • 1篇科学通报
  • 1篇Scienc...

年份

  • 3篇2003
  • 2篇2002
6 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
人肿瘤坏死因子样蛋白全长cDNA的克隆及原核表达
2002年
目的分离、克隆编码人肿瘤坏死因子样蛋白(TNFLP)的全长cDNA,并对其功能进行初步研究。方法从本室构建的λZAP表达胎脑文库中分离到编码TNFLP的全长cDNA。应用多种软件对该基因及其编码蛋白进行分析,寻找其同源蛋白,分析其亲、疏水性及其存在的结构域和基序。以Northern印迹分析检测TNFLP的mRNA的组织分布,并用谷胱苷肽-S-转移酶(GST)原核表达系统分段表达TNFLP的N端和C端蛋白。结果TNFLP全长共2112bp,编码一208个氨基酸的蛋白。亲、疏水性分析显示,TNFLP有两个疏水区,且C端95个氨基酸与小鼠的TNF-α一致性为42%。基序分析显示,TNFLP的C端有一内质网膜定位信号-TYKRL,与TNF-α完全一致。人的TNFLP位于人的16号染色体上。Northern杂交显示,TNFLP在心、脑和胰腺中呈高表达,可见一个转录本。用GST原核表达系统,分段表达了TNFLP的N端和C端。结论初步分析了TNFLP的组织表达谱,并分段表达了其N端和C端,为进一步研究其功能提供了条件。
胡晓燕周严代芸陈建萌张斌彭小忠袁建刚强伯勤
关键词:肿瘤坏死因子原核表达基因克隆
人M961全长cDNA及剪接异构体的分离与克隆被引量:1
2002年
目的分离、克隆人M96基因,并初步探索其在不同血细胞系中的表达。方法根据与鼠M96基因有较高同源性的人表达序列标签(EST)设计筛库引物,筛选成人睾丸及胎脑cDNA文库,采用BLAST及CLUSTALW等程序比较分析筛选到的阳性克隆;应用多细胞系杂交膜分析该基因在各细胞系的表达;用氯化血红素诱导K562细胞向红系分化,探讨该基因在此过程中的表达变化。结果从文库中筛出长度分别为1878和1382bp的M96cDNA克隆,二者为剪接异构体,其开放阅读框分别编码491及262个氨基酸,分别命名为M961和M962(GenBank接受号分别为AF072814和AF073293)。Northern杂交结果表明,在所检测的10种血细胞系中,人淋巴细胞白血病细胞系CEM的M961基因表达量最高,在有巨核及红系特点的Hel、Dami及K562白血病细胞系中M961的表达量也较高。在K562细胞分化过程中,M961基因表达略有升高。结论M961基因在某些白血病细胞系中表达量较高。
张斌汪俊华陶波李光涛周严彭小忠袁建刚强伯勤
关键词:剪接异构体基因克隆基因分离白血病
小鼠RTN3基因mRNA和蛋白在小鼠中枢神经系统的分布模式
2003年
根据与人RTN3基因同源的小鼠EST AA237377设计筛库引物,克隆得到小鼠RTN3 cDNA,该cDNA长2814 bp,含1个714 bp的可读框,编码1个具237个氨基酸的蛋白.Northern杂交检测该基因在小鼠不同组织中的表达谱,发现它有3个转录本,分别为1.8,2.8和4.2 kb,其中1.8和 2.8 kb的转录本存在于多种组织中,2.8 kb的转录本在脑中的表达量最高,4.2 kb的转录本仅在脑中存在.用成年小鼠脑和脊髓切片进行原位杂交和免疫组织化学反应,发现该基因在中枢神经系统的非胶质细胞中广泛表达,且在某些区域表达较高,如海马、大脑皮层、下丘脑及一些神经核团.
刘瑾黄晓玮彭小忠阳洪波阴彬谈昕煜范明范文红刘炳岩强伯勤袁建刚
关键词:蛋白中枢神经系统克隆内质网膜RTN
人neurotrimin基因的克隆及初步功能研究被引量:1
2003年
在神经系统的发育过程中,免疫球蛋白超家族成员参与多种特异的细胞与细胞间相互作用。为了发现及研究这个家族在人神经系统中的新成员,对人脑cDNA文库进行筛选,得到一全长cDNA克隆。该cDNA含一个1032bp的开放阅读框,编码一个含344个氨基酸的蛋白质。序列分析发现它是一个糖蛋白,含3个C_2样免疫球蛋白结构域,通过GPI锚定到膜上。同源性比较发现,该蛋白质与大鼠neurotrimin(Ntm)有97%的同源性,因此将它命名为人neurotrimin(NTM)。Northern杂交发现它有3.2,4.0和9.0kb3个转录本。值得注意的是,NTM在胎脑中的表达高于成年脑,在神经肿瘤中的表达高于正常脑组织。将HA表位插入第3个免疫球蛋白结构域与GPI信号之间,构建入真核表达载体pcDNA3.1+/Zeocin中,转染CHO细胞筛选出稳定表达的细胞株。凝集实验发现,HA-NTM表达于CHO细胞的表面并能加强细胞间的凝集。
刘瑾李光涛彭小忠刘炳岩阴彬谈昕煜范明范明强伯勤袁建刚
关键词:基因克隆免疫球蛋白超家族神经系统神经细胞黏附分子
Patterns of mouse reticulon 3 mRNA and protein expression in the mouse central nervous system
2003年
Reticulons (RTN) are endoplasmic reticulum- associated protein complexes, which are localized in the endoplasmic reticulum (ER) and identified as markers for neuroendocrine differentiation. At least four different RTN genes have been identified in mammals, but in most cases, the functions of the encoded proteins except mammalian RTN4-A and RTN4-B are still elusive. In the present study, mouse reticulon 3 (mRTN3) is cloned and its expression pattern in a variety of tissues is investigated. Three alternatively spliced transcripts of 1.8, 2.8 and 4.2 kb are revealed by Northern blotting hybridization. The 1.8 and 2.8 kb transcripts are expressed in many tissues. The 2.8 kb transcript has a high level in brain and the 4.2 kb transcript is only found in brain. In situ hybridization and immunohistochemical analysis indicated its high expression in non-glial cells in some particular region of mouse central nervous system, such as hippocampus, sub-thalamus nucleus, thalamus nucleus and cerebrum cortex.
LIUJinHUANGXiaoweiPENGXiaozhongYANGHongboYINBinTANXinyuFANMingFANWenhongLIUBingyanQIANGBoqinYUANJiangang
关键词:MRNARTN
共1页<1>
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