国家自然科学基金(81270630) 作品数:12 被引量:12 H指数:2 相关作者: 钱军 林江 姚冬明 杨静 马吉春 更多>> 相关机构: 江苏大学附属人民医院 江苏大学 昆山市第三人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 镇江市科技支撑计划(社会发展)项目 江苏省“333工程”科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
PDLIM4基因低表达与急性髓系白血病患者预后良好相关(英文) 2013年 本实验旨在研究急性髓系白血病(AML)患者中PDLIM4基因表达模型,并分析其临床相关性。运用EvaGreen实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测AML患者中PDLIM4基因表达量。结果表明,与21例对照相比,94例AML患者PDLIM4转录本水平降低非常显著(P<0.01),共有42例(45%)AML患者为PDLIM4转录本低表达,M1/M2/M3亚型的PDLIM4低表达率非常显著地高于M4/M5/M6亚型(56%对20%,P<0.01),AML中PDLIM4低表达患者的总体生存时间(OS)显著长于非低表达者(P<0.05);受试者工作特征曲线(ROC)分析显示,ROC曲线下面积为0.865(95%可信区间:0.801-0.930),表明PDLIM4低表达对AML具有诊断意义。结论:PDLIM4低表达是一个常见事件,且对AML预后具有良性影响,可能成为潜在的诊断肿瘤的分子标记。 李云 钱军 林江 钱炜 杨静 柴海彦 王翠竹 邓兆群 姚冬明 陈芹 马吉春关键词:实时定量PCR 急性髓系白血病 预后 慢性髓系白血病PDLIM4基因表达与其启动子甲基化水平的关系 被引量:2 2013年 目的:分析慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者PDLIM4(PDZ and LIM domain 4)基因转录本表达状况、启动子高甲基化改变及临床相关性。方法:应用实时定量PCR(RQ-PCR)及实时定量甲基化特异性PCR(RQ-MSP)技术分别检测CML患者PDLIM4基因转录本及启动子甲基化水平。结果:8/36例(22%)CML患者存在PDLIM4低表达,低表达率与21例对照组间差异有统计学意义(P=0.021);PDLIM4表达水平和CML患者bcr/abl融合基因转录本正相关(r=0.434,P=0.043)。13/59例(22%)CML患者出现PDLIM4启动子高甲基化改变,而24例对照未显示高甲基化,两组差异有统计学意义(P=0.016)。PDLIM4高甲基化与患者血液学相关参数无明显相关性。PDLIM4启动子高甲基化频率随疾病进展而增高,在慢性期、加速期及急变期中分别为16%(7/44)、33%(2/6)及44%(4/9)。结论:PDLIM4基因启动子甲基化改变可能与CML的疾病发展有关。 李云 钱军 陈芹 姚冬明 王翠竹 柴海彦 杨静 林江 马吉春 陈星星 马玉娟关键词:慢性髓系白血病 高甲基化 慢性髓细胞白血病患者PRAME基因启动子甲基化改变 2013年 目的:慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者中黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)基因启动子区域的甲基化改变其及其临床相关性。方法:应用实时定量甲基化特异性PCR(real-time quantitative methylation-specific PCR,RQ-MSP)技术对55例CML患者及20例对照组骨髓单个核细胞标本的PRAME基因启动子甲基化状态进行检测。结果:28/55例(51%)CML患者出现PRAME启动子低甲基化改变,而20例对照未显示低甲基化,两组差异有显著统计学意义(P<0.001)。PRAME低甲基化与患者血液学相关参数及染色体分组均无相关性。PRAME启动子低甲基化频率随疾病进展而降低,在慢性期、加速期及急变期中分别为48%(22/46)、33%(1/3)及17%(1/6)。结论:PRAME基因低甲基化可能是参与CML发生的早期分子事件之一。 姚冬明 钱军 林江 李云 陈芹 陈星星关键词:白血病 髓样 PRAME基因 甲基化 慢性髓系白血病miR-378甲基化研究 2016年 目的:探讨miR-378基因启动子在慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者中的甲基化状态,并分析其临床意义。方法:运用实时定量甲基化特异性PCR(real-time quantitative methylation-specific PCR,RQ-MSP)分别检测25例健康供髓者及53例CML患者骨髓单个核细胞中miR-378基因启动子未甲基化水平。结果:17/53例(32.1%)CML患者miR-378基因低甲基化,与对照组仅1/25例(4.0%)相比,两组差异有显著统计学意义(P<0.01)。CML慢性期、加速期、急变期患者miR-378未甲基化频率分别为14/40例(35.0%)、2/5例(40.0%)、1/8例(12.5%),但CML患者不同分期以及核型分组之间的miR-378基因未甲基化水平并无明显差异。未甲基化阳性与阴性组患者的年龄、白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量以及BCR/AABL1融合基因转录水平无显著差异(P>0.05)。结论:miR-378基因低甲基化是CML中常见的分子事件,并且主要见于CML慢性期和加速期患者。 吴得红 杨静 杨磊 闻向梅 郭竑 姚冬明 林江 张盈盈 张铭 邓兆群 钱军关键词:慢性髓系白血病 MIRNA 低甲基化 实时荧光定量PCR检测急性髓系白血病miR-125b的表达及临床应用 被引量:2 2017年 目的采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,q PCR)法检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中微小RNA-125b(micro RNA-125b,mi R-125b)转录本含量,初步评价其在AML临床诊断中的意义。方法建立扩增mi R-125b转录本的SYBR Green I染料法q PCR,对mi R-125b转录本克隆质粒进行扩增,评价其在AML诊断中的特异性、重复性和灵敏性。并对69例AML患者的骨髓单个核细胞标本进行初步检测并评价其临床相关性。结果该方法能定量检测骨髓标本中mi R-125b的表达水平,熔解曲线呈单峰,在108~103copies/μL范围内有良好的线性关系(R2=0.999)并且检测重复性良好。结果显示69例AML患者中mi R-125b表达水平明显高于25例对照组,差异有显著统计学意义(P=0.001)。在初发AML的不同亚型中,M3型的mi R-125b表达水平高于其他亚型,差异有统计学意义(P<0.05)。mi R-125b表达水平与非M3型AML患者的年龄、性别、外周血白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量、FAB分型、核型分组之间均无相关性(P>0.05)。4例初诊AML患者在获得完全缓解后mi R-125b表达水平均较治疗前有所降低。结论所建立的实时荧光定量PCR方法能敏感、特异地检测骨髓单个核细胞标本中mi R-125b的表达水平,为进一步临床应用研究奠定了方法学基础。mi R-125b异常高表达是AML中的一个常见分子事件,检测其表达可能有助于AML患者的辅助诊断和疾病状态监测。 王语欣 杨冬琴 周静东 林江 姚东明 杨静 钱震 杨磊 钱军关键词:实时荧光定量PCR 急性髓系白血病 建立高分辨熔解曲线分析法检测SF3B1基因突变 被引量:2 2013年 目的:建立高分辨熔解曲线分析法(high-resolution melting analysis,HRMA),检测骨髓增生异常综合征(my-elodysplastic syndrome,MDS)患者中SF3B1基因的突变。方法:针对SF3B1基因热点突变位点(密码子E622、H662、K666和K700)设计PCR扩增引物,建立带有温度内标校准品的PCR扩增反应体系,对30例初诊MDS患者的骨髓标本进行PCR扩增,应用HRMA对相应PCR产物进行突变检测,并对HRMA检测结果进行DNA测序验证。结果:HR-MA检测发现2例MDS患者存在异常的熔解曲线,经DNA测序验证1例为K666M杂合子突变,另1例为K700E杂合子突变。所建立的HRMA技术检测SF3B1基因突变的灵敏度为0.05(5%)。结论:成功建立检测SF3B1基因突变的HRMA技术,可快速筛查MDS标本中的SF3B1基因突变。 杨静 姚冬明 钱军 王翠竹 杨小飞 林江 李云 陈星星 肖高飞 马吉春关键词:高分辨率熔解曲线分析 基因突变 骨髓增生异常综合征 DDX43基因与肿瘤 被引量:2 2015年 DEAD盒多肽43(DDX43)基因在肿瘤细胞恶性增殖、肿瘤细胞耐药及肿瘤免疫治疗方面发挥着重要作用。DDX43基因在多种实体瘤和某些血液系统恶性肿瘤中表达增高。DDX43基因启动子低甲基化出现于慢性髓系白血病、急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征,并且与DDX43高表达和疾病的预后相关。 陈芹 林江 钱军关键词:肿瘤 基因表达 甲基化 let-7a-3基因表达与急性髓系白血病的相关性 2014年 目的:通过检测急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中let-7a-3基因的表达水平,探讨其与临床变量的相关性。方法:应用RQ-PCR方法检测83例初诊AML患者BMMNC中let-7a-3基因表达水平,分析其与患者年龄、性别、血象、诊断分型和7个基因(FLT3-ITD,NPM1,C-KIT,IDH1/IDH2,DNMT3A,C/EBPA and N/K-RAS)突变的关系。结果:20例(24%)AML患者存在着let-7a-3转录本的过表达;let-7a-3基因过表达阳性组与阴性组在年龄、性别、血象、FAB亚型和突变基因之间均无显著性差异(P>0.05);let-7a-3基因过表达阳性组与阴性组的总体生存(OS)时间并无显著差异(P>0.05),但在治疗后获得完全缓解的患者中let-7a-3基因过表达阳性组与阴性组的总体生存时间差异有显著性(P=0.003)。结论:let-7a-3基因过表达是AML中的一个常见分子事件。 姚冬明 林江 吴得红 杨静 杨磊 钱军关键词:急性髓系白血病 急性髓系白血病患者SALL4基因的甲基化改变及其临床意义 2013年 目的:探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者婆罗双树样基因4(Sal-like 4,SALL4)启动子的甲基化状况和临床意义。方法:分别应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术和实时定量PCR(RQ-PCR)技术检测45例初发AML患者和20例缺铁性贫血患者骨髓标本的SALL4甲基化状态和SALL4表达水平;同时,对AML患者的SALL4甲基化改变与临床特征相关性进行分析。结果:9例(20.0%)AML患者存在SALL4基因启动子低甲基化改变,而20例对照均无SALL4基因低甲基化,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。SALL4启动子低甲基化改变与AML患者年龄、性别、血红蛋白含量、血小板计数均无相关性(P>0.05),但低甲基化患者的白细胞计数明显高于甲基化患者(P=0.027)。SALL4表达水平和SALL4低甲基化明显相关(P<0.05)。按WHO分型,本研究中共有7类亚型,亚型间SALL4低甲基化频率差异无统计学意义(P>0.05)。中危和高危组核型患者中SALL4低甲基化频率明显高于低危组患者(P<0.05)。结论:SALL4低甲基化是AML患者中一个常见分子事件,可能与AML患者中高危核型相关。 焦夕琴 陈芹 林江 杨静 陈星星 汤琴 钱震 马吉春关键词:急性髓系白血病 SALL4 甲基化特异性PCR 低甲基化 分化抑制因子1基因在急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中的表达 被引量:1 2018年 目的:探讨分化抑制因子1(inhibitor of differentiation-1,ID1)基因在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓单个核细胞中的表达及其临床意义。方法:应用实时定量PCR方法检测153例初诊AML患者骨髓单个核细胞ID1基因的转录本水平。结果:ID1基因的表达范围为0.000~3.536(中位为0.030)。以中位数值为界将AML患者分为高表达组和低表达组,两组AML患者性别、外周血小板计数以及常见基因突变无统计学差异(P>0.05),外周血白细胞计数、外周血血红蛋白、FAB分型、WHO分型、核型分组及核型危险程度分组趋近统计学差异(P<0.10)。ID1高表达患者年龄以及骨髓原始细胞比例显著高于ID1低表达患者(P=0.033、0.035)。ID1高表达组患者经治疗后完全缓解率低于ID1低表达组(P<0.01),且定量分析显示经1~2个疗程诱导化疗获得完全缓解的AML患者初诊时ID1表达水平显著低于未获得完全缓解的AML患者(P=0.001)。生存分析显示在全部患者、非M3患者或正常核型AML患者中,ID1高表达患者总体生存时间均明显短于ID1低表达患者(P=0.002、0.008和0.050)。结论:ID1基因表达水平可作为AML患者化疗反应以及预后判断的分子标志。 姚欣妤 周静东 张婷娟 张婷娟 张巍 林江关键词:分化抑制因子1 骨髓单个核细胞 化疗 急性髓系白血病