河北省教育厅项目(2008460)
- 作品数：6 被引量：38H指数：5
- 相关作者：张洁王冬梅商蕾郑文永张东旭更多>>
- 相关机构：河北农业大学河北省农林科学院中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：河北省教育厅项目河北省科技攻关计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 大豆胚尖遗传转化体系优化及抗逆基因GmPK转化研究被引量：6
- 2012年
- 采用GUS基因瞬时表达检测方法,通过正交试验以AS浓度、侵染菌液OD值、侵染时间、共培养时间和恢复培养时间5个因素在4个水平上进行分析,优化了农杆菌介导的大豆胚尖遗传转化体系,并在此基础上进行了抗逆基因GmPK的遗传转化。结果表明,采用共培养培养基中添加100μmol/L AS、侵染菌液OD600值0.9、侵染15h、共培养5d和恢复培养3d的转化条件最佳,GUS阳性率达74.59%,经PCR及RT-PCR进一步验证获得了转基因阳性植株。利用优化的最佳条件进行抗逆基因GmPK的转化,炼苗移栽成活的再生植株经PCR及PCR-Southern blotting验证,初步证明外源基因已经整合至大豆基因组,转化率为0.6%。
- 张洁商蕾郑文永邱丽娟王冬梅
- 关键词：大豆根癌农杆菌
- 半定量RT-PCR法检测低磷胁迫下大豆根系质膜H^+-ATPase基因的表达被引量：4
- 2009年
- 试验以大豆为材料,采用水培方法,以β-微管蛋白基因为内参基因,用半定量逆转录聚合酶链式反应(se-mi RT-PCR法)检测在低磷胁迫下大豆根系质膜H+-ATPase基因表达量的变化,以期建立适于检测该基因表达的semi RT-PCR试验体系。结果表明:在低磷胁迫2 h时,与对照相比基因表达量有所增加,在4 h时相对表达量达到最大,6 h略有下降。这表明大豆根系质膜H+-ATPase基因表达量的增加可能与适应低磷胁迫的逆境有关,半定量RT-PCR法可以用来检测特定基因在不同条件下的表达量。
- 张洁张晓红张振海韩胜芳王冬梅
- 关键词：大豆半定量RT-PCR低磷胁迫
- 大豆不同生长时期基因组DNA提取方法的优化被引量：6
- 2013年
- 以探索大豆嫩叶期基因组提取方法为基础,探索从富含酚类、多糖等代谢物质的大豆开花期叶片中获得高质量DNA的提取方法。采用不同的方法提取5种大豆品种在不同生长时期的叶片基因组,并通过对提取的DNA的含量测定、琼脂糖凝胶电泳分析和内参基因的PCR扩增,对不同方法所提取的DNA质量进行综合评价。在嫩叶期,利用前人改进的CTAB法能够分离出纯度高、质量好的DNA,而在开花期,采用本试验新改良的CTAB法可以更有效去除多糖、酚类等物质得到完整性和纯度较好的大豆基因组。前人改进的CTAB法和本试验摸索的新改良CTAB法分别适用于嫩叶期、开花期大豆基因组DNA提取,为大豆的分子生物学研究奠定了基础。
- 王月月范龙张洁王冬梅
- 关键词：大豆不同生长时期DNA提取方法多糖
- NaCl胁迫下不同大豆品种形态学变化的研究被引量：7
- 2010年
- 以8个河北省优质高产大豆品种为材料,采用组织培养方式进行NaCl胁迫,以幼苗株高、下胚轴长度、根长度为形态学指标,研究不同大豆基因型对NaCl敏感性的差异。结果表明,不同基因型大豆品种对NaCl的耐受性不同,冀豆17号、五星2号、五星3号在NaCl浓度为35mmol/L时,大豆幼苗株高和根长均受到明显的抑制,并与对照差异显著。
- 商蕾张洁张孟臣王冬梅
- 关键词：大豆株高
- 无选择标记转基因植物研究进展被引量：5
- 2009年
- 综述了近年来国内外在植物无选择标记转基因技术方面的发展和研究成果,包括共转化法、转座子法(Ac/Ds转座子系统)、位点特异性重组系统法(FLP/FRT、Cre/LoxP、R/RS)等。
- 张洁郑文永王冬梅
- 关键词：无选择标记转基因植物位点特异性重组共转化
- 转基因技术在大豆育种上的应用与研究被引量：12
- 2008年
- 近年来,转基因技术在大豆上的研究重点主要集中在建立高效再生体系和稳定地遗传转化体系方面,随着遗传转化技术的发展,我国已获得了抗病、抗虫转基因的大豆植株并取得突破性进展。笔者就大豆遗传转化在受体系统(器官发生受体系统、体细胞胚胎发生受体系统、原生质体受体系统)以及转化方法(农杆菌介导法、基因枪法)等方面的研究进展情况进行了综述,并对今后大豆转基因研究方向进行了探讨。
- 张洁张东旭商蕾
- 关键词：大豆农杆菌基因枪
