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固体豆粕为氮源根霉12~#产纤溶酶液体发酵条件的优化: 2010年; 以固体豆粕为氮源,通过单因素、Plackett-Burman试验设计和正交试验,从无机氮源、胰蛋白胨、初始pH值、接种量和发酵周期方面优化了中华根霉12#产纤溶酶的液体发酵条件。试验结果表明,该菌株液体发酵产纤溶酶的适宜培养基组成为:麸皮水5%,豆粕粉6%,NaNO30.2%,NH4Cl0.1%,胰蛋白胨2.5%,初始pH4.3;适宜的培养条件是:接种量20%,发酵周期60h,纤溶酶酶活力为182.00U/mL。; 李树文刘晓兰杜连祥咸洪泉; 关键词：纤溶酶液体发酵

根霉12^#发酵产生纤溶酶的酶学性质被引量：18: 2005年; 溶栓疗法是血栓性疾病安全有效的治疗手段 ,开发新型纤溶酶具有实际应用意义。分离自南方小酒药的根霉 12 #以豆粕和麸皮为原料可产生纤溶酶。已采用盐析 ,疏水层析、离子交换层析和凝胶层析方法对纤溶酶分离提纯。提纯的纤溶酶比活力 2 14 3u mg(尿激酶单位 ) ,有直接溶解血栓和激活纤溶酶原的双重溶栓作用 ,降解纤维蛋白α、β和γ肽链速度快 ;最适作用温度 4 5℃ ,适宜作用pH范围 6 . 8～ 8. 8;等电聚焦方法测定该酶等电点 8 .5± 0. 1;只分解生色底物N_Succinyl_Ala_Ala_Pro_Phe_pNA ,其米氏常数Km 为 0 .2 3mmol L ,酶转换数Kcat为 16 36s- 1 ;Molish实验和甲苯胺蓝实验均证明该酶为糖蛋白 ,地衣酚_硫酸法测得该酶含糖量 4 70 % ;EDTA、PMSF、PCMB对该纤溶酶有抑制作用 ,说明活性中心含有巯基、金属和丝氨酸 ;N端 12个氨基酸序列为NH2 _Ser_Val_Ser_Glu_Ile_Gln_Leu_Met_His_Asn_Leu_Gly,与其它生物来源的纤溶酶相比较没有同源性。根霉 12 #产生的纤溶酶为新型纤溶酶 ,有希望开发成溶栓药物。; 杜连祥刘晓兰路福平肖静郑喜群; 关键词：根霉发酵纤溶酶酶学性质

根霉12号固体发酵产生纤溶酶工艺条件的研究被引量：30: 2003年; 研究了根霉12号固体发酵产生纤溶酶的工艺条件。采用单因素试验、均匀设计方法对固体发酵培养基的碳源、氮源、碳氮比、初始pH、加水量、无机盐加量进行了优化;采用正交试验对发酵时间、接种量进行了研究。结果表明,实验范围内根霉12固体发酵产纤溶酶的适宜培养基组成为:麸皮∶豆粕=1∶2,初始pH5.0,加水量0.75ml/g物料, MnSO4H2O和 (NH4)2SO4加量分别为0.25%和 1.42%(对物料)。适宜培养条件为接种量107个孢子/g物料,培养时间72h。优化条件下的纤溶酶产量平均达791.81u/g物料。; 刘晓兰杜连祥路福平凌洪博

产纤溶酶菌株根霉12^#的诱变育种及固态发酵培养基的优化被引量：8: 2003年; 以产纤溶酶的菌株根霉 12 # 为出发菌株 ,对其进行紫外线氯化锂复合诱变 ,筛选到74株制霉素抗性突变株。所有抗性突变株经进一步固态发酵筛选 ,获得了 4株稳定高产纤溶酶的正突变株 ,其纤溶酶产量分别比出发菌株提高 3 2 9%、2 1 5 %、2 2 3 %和 18 0 %。以其中的 1株为菌种 ,研究了固态发酵产生纤溶酶的培养基组成。采用单因素试验、均匀设计方法对固态发酵培养基的碳源、氮源、碳氮比、初始pH、加水量、无机盐加量进行了优化。结果表明 ,实验范围内根霉 12 # 固态发酵产生纤溶酶的适宜培养基组成为 :m (麸皮 )∶m (豆粕 )=1∶2 ,初始 pH5 0 ,加水量 0 75mL/g物料 ,MnSO4·H2 O和 (NH4) 2 SO4加量分别为 0 2 5 %和1 42 % (对物料 )。优化条件下的固态发酵纤溶酶产量平均达 744 5 7U/g物料。; 刘晓兰杜连祥路福平凌洪博; 关键词：培养基组成生产菌株诱变育种溶栓剂

豆粕水解液为原料根霉产纤溶酶液体发酵培养基的优化被引量：2: 2009年; 以豆粕水解液为原料,研究根霉产纤溶酶液体发酵培养基的组成。实验结果表明,豆粕的最适水解时间为1.5 h,麸皮水与豆粕水解液的最适体积比例为2∶3,金属离子对酶活力提高无显著作用,最适培养基配方是:5%麸皮水,6%豆粕水解液,0.1%氯化铵,0.2%硝酸钠,2.5%胰蛋白胨,初始pH4.3,酶活力为177.62 U/mL。; 李树文咸洪泉刘晓兰; 关键词：根霉纤溶酶液体发酵

产纤溶酶菌株根霉12#的诱变育种被引量：5: 2003年; 以产纤溶酶的华根霉12＃为出发菌株,对其进行紫外线-氯化锂复合诱变,筛选到74株制霉素抗性突变株。所有抗性突变株经进一步固体发酵筛选,获得了4株稳定高产纤溶酶的正突变株,其纤溶酶产量分别比出发菌株提高32.9%、21.5%、22.3%和18.0%。; 刘晓兰凌洪博杜连祥张春蕾; 关键词：根霉纤溶酶诱变育种

根霉产纤溶酶液体发酵培养基的优化被引量：2: 2009年; 通过单因素,均匀设计和正交试验,从碳氮比、无机氮源、胰蛋白胨、pH值方面优化了根霉液体发酵产生纤溶酶的培养基组成。试验结果表明,试验范围内菌株液体发酵产纤溶酶的适宜培养基组成为:麸皮水5.6%,豆粕水解液5.3%,二者体积比为2:3,磷酸氢二铵0.4%,硝酸钠0.5%,pH值自然。优化培养基的纤溶酶酶活力为140.00U/mL。; 李树文刘晓兰; 关键词：纤溶酶液体发酵

纤溶酶产生菌中华根霉12#的诱变选育被引量：1: 2010年; 以产纤溶酶菌中华根霉12#为出发菌株，以SDS为抗性因子，紫外线为诱变剂，通过液体发酵的方式筛选高产菌株。共得到48株SDS抗性突变株，命名为IH-系列。经过筛选，得到了1株遗传稳定、酶活力提高了120％左右的高产菌株LH-45，以及2株具有潜在高产能力的突变株LH-15和LH-28。; 李树文刘晓兰杜连祥路福平咸洪泉; 关键词：纤溶酶液体发酵突变株

Rhizopus chinensis 12^#发酵产生纤溶酶的分离提纯被引量：2: 2003年; 分离自南方小酒药的华根霉12#(Rhizopuschinensis12#)以豆粕和麸皮为原料固体发酵可产生多种纤溶活性组分.采用饱和度40%～70%的硫酸铵溶液分步盐析、OctylSepharoseFastFlow疏水层析、Q SepharoseHighPerformance离子交换层析和SephacrylS 100凝胶层析方法对活性组分进行分离提纯,得到电泳纯的纤溶酶.SDS PAGE方法测定该酶相对分子质量为18000,凝胶过滤方法测定相对分子质量为16600,表明该酶由单亚基组成.; 刘晓兰杜连祥路福平凌洪博; 关键词：华根霉纤溶酶分离提纯疏水层析离子交换层析溶栓剂

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黑龙江省自然科学基金(D0228)