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荧光定量RT-PCR检测鸡α干扰素mRNA方法的建立被引量：5: 2009年; 根据鸡IFN-α基因序列设计引物,建立了定量检测鸡IFN-α基因表达水平的荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法,并对新城疫病毒（NDV）感染的鸡法氏囊、胸腺中IFN-αmRNA表达水平进行了检测.结果表明,该方法对鸡IFN-αmRNA的扩增效率为103.99%,线性范围为10-2～10-9,相关系数为0.996,最低能检出73拷贝/反应;熔解曲线分析RRT-PCR产物在（88.6±0.2）℃出现单特异峰;特异性评价结果显示,本方法只扩增鸡IFN-αmRNA,不与常见禽源病原微生物发生交叉反应.对NDV感染鸡的法氏囊、胸腺中IFN-αmRNA表达水平的定量检测结果表明,IFN-αmRNA在感染后36,48 h显著升高.本研究建立的检测鸡IFN-αmRNA表达水平的RRT-PCR方法具有敏感性高、稳定性好和特异性强的特点,为鸡IFN-αmRNA的精确定量提供了新方法.; 雷小文岳华李明义汤承; 关键词：新城疫病毒干扰素Α 荧光定量RT-PCR

犬源近平滑念珠菌的分子鉴定及部分生物学特性研究: 应用核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列分析技术从47株临床分离的犬源真菌中鉴定出一株近平滑念珠菌,对其部分生物学特性进行研究。结果显示该菌株在沙堡氏培养基上形成白色奶油状菌落,菌体里典型酵母菌形态。腹腔接种小鼠出现脏...; 王晓佳杨金福岳华汤承; 关键词：近平滑念珠菌内转录间隔区药敏试验; 文献传递

同一猪场副猪嗜血杆菌感染的多样性研究: 2007年12月,某大型规模化猪场300余头30～70日龄仔猪爆发疑似副猪嗜血杆菌病。经鉴定,最终从21头猪的多部位分离到41株副猪嗜血杆菌。血清型鉴定结果显示,血清5型18株(43.9%)、血清14型12株(29.3%...; 陈小飞岳华郭定乾匡学谦杨发龙汤承; 关键词：副猪嗜血杆菌血清型基因多样性; 文献传递

猪繁殖与呼吸综合征病毒和副猪嗜血杆菌混合感染的诊断: 2009年; 四川省某种猪场70日龄仔猪发生以发绀、呼吸困难、多发性关节炎、肺出血、实变及多发性浆膜炎为特征的传染病，发病率为100％，死亡率为90％以上，经实验室诊断为猪繁殖与呼吸综合征病毒和副猪嗜血杆菌混合感染。; 陈小飞岳华杨帆张斌夏梦芸汤承; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒副猪嗜血杆菌 PCR

副猪嗜血杆菌的分离鉴定被引量：2: 2009年; 某猪场70日龄仔猪发生以呼吸困难、多发性关节炎和多发性浆膜炎为特征的传染病,从1头濒死猪心血和胸腔渗出液中各分离出1株有多形性趋势的革兰氏阴性小杆菌,生化试验和PCR鉴定为副猪嗜血杆菌;挑选心血分离株以1.5×1010CFU/只腹腔接种,可引起成年豚鼠发病死亡(2/3),剖检可见胸腔与腹腔积液、纤维素性心包炎、肝周炎,从心血、胸腔积液、腹腔积液、脑、肝脏及肺脏回收到该菌。; 陈小飞岳华张彬杨帆夏梦芸刘海燕汤承; 关键词：副猪嗜血杆菌 PCR

牦牛空肠弯曲菌的分离鉴定及系统发育分析被引量：1: 2010年; 采集692份临床健康成年牦牛肛门棉拭子标本,无菌划线接种于改良Skirrow培养基上,根据特征的形态学观察、生化试验和PCR检测方法共分离鉴定出空肠弯曲菌15株,阳性率为2.17%;对其中14株菌进行16 S rRNA克隆、测序,经系统发育分析发现牦牛源菌株组内的同源性为99.5%~100%,与Gen-Bank中其他源菌株的同源性为95.8%~100%,系统发育研究表明,牦牛源空肠弯曲菌菌株与国内鸡、猪源和澳大利亚人源L14630菌株的遗传关系较近,与国外其他人源、牛源、鸡源及黑头鸥源菌株有较远的遗传距离。; 匡学谦汤文陈小飞杨发龙张焕容岳华; 关键词：空肠弯曲菌牦牛系统发育分析

靶向新城疫病毒NP基因的shRNA重组腺病毒表达载体的构建及鉴定: 2010年; 为验证腺病毒载体在鸡胚成纤维细胞(CEF)及鸡胚中递送小干扰RNA的可行性,本实验利用共转染技术将表达针对新城疫病毒(NDV)NP基因shRNA的重组质粒同源重组到pGSadeno腺病毒载体系统,用重组腺病毒感染CEF和鸡胚,通过红荧光报告基因的表达情况和荧光定量PCR检测NP基因mRNA的表达对其进行鉴定,并通过细胞形态观察、血凝价的测定评价其在CEF和鸡胚上对NDV增殖的影响。实验结果显示重组腺病毒能够感染CEF,感染CEF后6h、9h、12h与对照组比较NP基因mRNA的表达量分别降低了3.2倍,25.6倍,2.57倍,并能够推迟NDV致细胞病变效应,抑制NDV在鸡胚上的增殖,延缓鸡胚的死亡。本实验构建的重组腺病毒能够在CEF和鸡胚上递送特异的shRNA,为在CEF中的RNA干涉研究开辟了新的递送途径。; 杨帆岳华侯巍汤承; 关键词：腺病毒载体新城疫病毒

H5N1亚型禽流感病毒和新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞IFN-β基因的动态表达被引量：1: 2010年; 根据鸡β-干扰素（ChIFN-β）基因保守序列设计引物建立了检测鸡IFN-βmRNA表达水平的荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法,并对H5N1亚型禽流感病毒（AIV）和新城疫病毒强毒株（vNDV）感染后3、6、12、24、30 h的鸡胚成纤维细胞（CEF）中IFN-βmRNA表达水平进行了检测。结果显示,建立的RRT-PCR特异性好,对鸡IFN-βmRNA的扩增效率为94.18%,线性范围为10-8-10-3,相关系数为0.992,最低能检出48拷贝/反应。AIV在感染CEF后6、12 h显著抑制IFN-βmRNA的表达,24 h开始诱导IFN-βmRNA表达,30 h时IFN-βmRNA水平显著升高;vNDV在感染CEF后的24 h内显著抑制IFN-βmRNA的表达,30 h时则显著诱导IFN-βmRNA表达。本试验结果为进一步研究H5N1和NDV与机体的相互作用提供了有价值的信息。; 高艳杨松沛雷小文岳华李明义汤承; 关键词：Β-干扰素荧光定量RT-PCR 禽流感病毒新城疫病毒鸡胚成纤维细胞

一株犬源近平滑念珠菌的分子鉴定及部分生物学特性试验被引量：1: 2010年; 应用核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列分析技术从47株临床分离的犬源真菌中鉴定出一株近平滑念珠菌,对其部分生物学特性进行研究。结果显示,该菌株在沙堡氏培养基上形成白色奶油状菌落,菌体呈典型酵母菌形态。腹腔接种小鼠出现脏器病变并回收到该菌,而皮肤接种小鼠未出现病变。药敏试验显示,该菌株对制霉菌素高度敏感,对两性霉素B、伊曲康唑和酮康唑中度敏感,对氟康唑耐药。ITS区基因序列分析表明,该菌株与人源近平滑念珠菌高度同源;系统进化分析表明,该菌与日本的人源分离株遗传关系较近。; 王晓佳杨金福岳华汤承杨松沛; 关键词：近平滑念珠菌转录间隔区药敏试验

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