国家自然科学基金(30870839)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- 神经上皮干细胞粘附壳聚糖纤维生长分化的实验研究
- 2010年
- 目的检测神经上皮干细胞与壳聚糖纤维的生物相容性,并探讨其在壳聚糖纤维材料上的生长、分化情况。方法从胚胎神经管取材神经上皮干细胞,并与壳聚糖纤维进行体外共培养。采用MTT法检测细胞在壳聚糖纤维上的活性,采用光镜和扫描电镜技术观察细胞在壳聚糖纤维上的存活、生长状况,采用免疫细胞化学染色鉴定神经上皮干细胞的分化情况。结果神经上皮干细胞可以贴附在壳聚糖纤维表面生长,并可分化为神经元和神经胶质细胞,细胞活性与单纯神经上皮干细胞培养组没有明显差别。结论壳聚糖纤维与神经上皮干细胞有良好的生物相容性,二者在外周神经损伤的治疗中具有良好的应用前景。
- 房芃李振华杨昆张静刘文静綦晓霞杨淑华孙晋浩
- 关键词：干细胞壳聚糖纤维
- 应用神经逆行示踪及激光显微切割技术精确分离mesostriatal亚群神经元
- 2011年
- 目的中脑内向纹状体投射的mesostriatal多巴胺能细胞亚群是导致帕金森病的关键神经元,本实验拟寻找该亚群投射神经元的分布及有效分离方法。方法利用立体定位技术将绿色荧光逆行示踪剂注射到新生鼠纹状体内,24h后灌注取脑做冰冻切片;应用免疫荧光组织化学染色方法行酪氨酸羟化酶(TH)染色,采用激光显微切割技术将荧光示踪剂标记且呈TH染色阳性的神经元精确切割并收集。结果荧光示踪的神经元呈TH阳性者即属于mesostriatal亚群神经元,主要分布于中脑黑质,应用激光显微切割技术可精确分离这些逆行示踪且TH染色阳性的神经元。结论应用逆行荧光示踪和激光显微切割技术可精确分离mesostriatal亚群神经元。
- 杨淑华高青李春晓王超张静李贵宝李振华孙晋浩
- 关键词：多巴胺能神经元
- EphA5介导胚胎中脑神经上皮干细胞向纹状体投射的实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨轴突导向分子EphA5在胚胎中脑神经上皮干细胞向靶组织纹状体特异性投射中的作用。方法自孕11d大鼠取材胚胎中脑神经上皮干细胞并进行体外培养,应用免疫细胞化学的方法检测EphA5在神经上皮干细胞中的表达情况;取材鼠脑纹状体组织,应用冰冻切片、RT-PCR及Western-blot等方法检测EphA5的配体Ephrin-A5的特异表达情况;将胚胎中脑神经上皮干细胞与新生鼠纹状体组织块联合培养,观察细胞的靶向生长情况。结果体外培养的胚胎中脑神经上皮干细胞可明显向纹状体生长并呈EphA5阳性,靶区纹状体组织中可检测到其配体Ephrin-A5高表达。结论轴突导向分子EphA5受体及其配体Ephrin-A5可介导胚胎中脑神经上皮干细胞向纹状体组织的靶向生长。
- 房芃杨昆刘文静杨淑华杨洁张静李振华杨琳孙晋浩
- 关键词：神经上皮干细胞纹状体
- 轴突导向因子EphA5沉默后抑制中脑神经上皮细胞投射
- 2012年
- 目的：探讨轴突导向因子EphA5在中脑神经上皮细胞向纹状体投射中的作用。方法：从孕11d大鼠胚胎取材并培养中脑神经上皮细胞；设计EphA5基因干扰序列，构建RNA干扰载体，采用电转染技术将EphA5干扰载体转入中脑神经上皮细胞，电转后将中脑神经上皮细胞与纹状体共培养，观察转染后中脑神经上皮细胞向纹状体组织的靶向生长情况。结果：中脑神经上皮细胞与纹状体组织块联合培养，神经突起明显朝向组织块生长；EphA5基因干扰载体转染中脑神经上皮细胞可降低EphA5蛋白表达，EphA5基因沉默后神经上皮细胞突起朝向纹状体生长趋势不明显。结论：EphA5基因沉默后中脑神经上皮细胞向纹状体投射减弱，EphA5基因可调控中脑神经上皮细胞向纹状体的靶向投射。
- 房芃高青冯晓雯张静暴丽华董海曼彭雷李振华孙晋浩高英茂
- 关键词：神经上皮细胞中脑RNA干扰
