国家重点基础研究发展计划(2006CB102106)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：李宁田明费菁胡晓湘李俊更多>>
- 相关机构：中国农业大学东北农业大学生物技术有限公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 猪囊胚microRNA定量PCR分析中适宜内参基因的选择被引量：3
- 2012年
- 在定量PCR中,通常使用表达量恒定的基因作为内参对实验结果进行校正,以得到准确的定量结果.本实验用低密度芯片方法对猪体细胞核移植(SCNT)、体外受精(IVF)、体内受精(IVO)及孤雌(PA)囊胚的microRNA表达情况进行了定量分析,结果发现,4种类型胚胎共同表达的microRNA数目为36种,其中11种microRNA的表达量不受胚胎种类的影响(P>0.05).以这11种microRNA为候选内参基因用GeNorm(一种以两两比较为模型,计算样品中所有候选内参基因稳定值的程序,可得到样品中表达最为稳定的一对内参基因组合)及NormFinder(excel加载宏,以方差分析为模型对候选内参基因的稳定性进行分析,可得到稳定性最高的候选内参基因)方法分析发现miR-16表达最为稳定,以miR-16为内参得到的相对定量结果与用细胞数校正的定量结果一致,证实了miR-16是猪囊胚microRNA定量PCR分析的适宜内参基因.
- 李俊卫恒习李燕李秋艳李宁
- 关键词：内参基因定量PCRMICRORNA囊胚
- microRNA-1,-133,-206在鼠肌肉中的表达谱被引量：3
- 2009年
- MicroRNAs(miRNAs)是一类重要的调节基因转录的非编码小RNA。其中miR-1、miR-133、miR-206是肌肉特异表达的microRNA,同属miR-1家族。它们在胚胎发育时期的表达及作用已有很多文章阐述,但很少有文章详细分析它们在成体中的表达。为检测这3类microRNA的表达差异,选择BALB/c品系小鼠的股二头肌,提取RNA。设计microRNA专用的茎环状引物,通过实时定量PCR,检验miR-1、miR-133、miR-206和miR-181a在骨骼肌组织中的表达情况。结果发现,miR-133的表达量要明显高于miR-1和miR-206,miR-1略高于miR-206的表达量,作为对照,miR-181a的表达量非常微小。分析该现象,根据资料和网络软件预测,绘制这3类microRNA对肌肉生长发育作用的关系图,初步解释各种microRNA之间呈现表达差异的原因。为下一步研究成体中microRNA及其靶位点提供依据和方向。
- 田明费菁胡晓湘李宁刘娣孟庆勇
- 关键词：MIRNAREAL-TIMEPCR表达谱
