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检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立: 选用猪肺炎支原体168株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。结果显示,ELISA试验的最佳反应条件:抗原包被浓度为1.5μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度为1:100,酶标抗体1...; 刘茂军靳岷杜改梅邵国青张映; 关键词：猪肺炎支原体间接ELISA; 文献传递

猪肺炎支原体P46基因的克隆及表达: 参考GenBank登录的猪肺炎支原体(Mhp)P46基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成引物,通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)对猪肺炎支原体P46基因的3个位点进行定点突变,将此突变基因插入到表达载体pET...; 迟灵芝刘茂军冯志新单虎邵国青; 关键词：猪肺炎支原体重叠延伸PCR 定点突变; 文献传递

猪气喘病实验猪模型的建立被引量：21: 2007年; 目的研究建立猪气喘病人工发病模型。方法将分离得到的一株猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)Js株进行各种试验鉴定,证实其为Mhp强毒株。每头猪肺内接种Js株培养物2ml,15～25d后观察临床症状和病理变化,采集病变组织,经冻干制成攻毒用组织毒。安检合格,批号为20000324。给15头小梅山二元杂交猪分别气管内注射以KM_2培养基作10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)和10^(-5)稀释的强毒,每头猪5ml,对照组注射培养基。攻毒后25d观察试验猪临诊症状,X线透视,记录病理变化。结果10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)稀释的强毒试验组猪均出现了典型的猪气喘病临床症状和病理变化。结论人工发病试验测得Mhp Js株组织强毒接种气管内注射最小发病剂量为10^(-4)稀释5ml,正式试验人工发病可用100个最小发病剂量即强毒冻干物1:100稀释气管内注射5ml,可确保攻毒成功。; 邵国青刘茂军孙佩元王继春杜改梅周勇岐刘冬霞; 关键词：猪气喘病猪肺炎支原体

替米考星预混剂对人工诱发猪气喘病的疗效试验被引量：10: 2007年; 本试验利用人工诱发猪气喘病的动物模型,设计高、中、低剂量(剂量分别为400、200、100mg/kg饲料)的替米考星治疗试验组和阳性对照组(不用药、强毒感染)、阴性对照组(不用药不感染),通过观察、检测试验猪在试验前后的增重变化和试验治疗后肺部病变率来判定替米考星的治疗效果。结果成功建立了人工诱发的猪气喘病模型,替米考星高、中剂量组的治疗效果显著,在增重和肺部病变率方面和阴性对照组差异不显著(P>0.05),而替米考星低剂量组的治疗效果略差,在增重方面和阴性对照组差异不显著(P>0.05),但在肺部病变率方面和阴性对照组差异显著(P<0.05)。这些结果为临床合理地使用替米考星防治猪气喘病提供了科学依据。; 赵永前刘茂军周勇歧刘冬霞邵国青; 关键词：替米考星气喘病疗效

检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立被引量：16: 2007年; 选用猪肺炎支原体Mhp J株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA(酶联免疫吸附)方法。结果显示,ELISA试验的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1.5μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度1∶100,2%明胶作封闭液,抗原抗体最佳结合时间为90 min,酶标抗体1∶10 000(体积比)稀释,最佳作用时间为60 min。对136份样品检测结果表明,建立的猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法与美国IDEXX公司生产的猪肺炎支原体抗体检测试剂盒检测的符合率达到83.8%,假阴性率8.8%,假阳性率1.5%。; 刘茂军靳岷杜改梅邵国青张映; 关键词：猪肺炎支原体间接ELISA

猪肺炎支原体P46基因的克隆及表达被引量：6: 2008年; 参考GenBank登录的猪肺炎支原体(Mhp)P46基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成引物,通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)对猪肺炎支原体P46基因的3个位点进行定点突变,将此突变基因插入到表达载体pET-32a(+)中,经IPTG诱导后成功地在大肠杆菌Rosetta(DE3)宿主菌中表达分子量约为63500的融合蛋白。West-ern blotting分析表明,该融合蛋白具有较好的免疫原性。为猪肺炎支原体抗体ELISA检测方法的建立奠定了基础。; 迟灵芝刘茂军冯志新单虎邵国青; 关键词：猪肺炎支原体重叠延伸PCR 定点突变

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江苏省农业科学院科研基金(6110640)