江苏省高技术研究计划项目(BG2007324)
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
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- 相关机构：南京农业大学安徽科技学院江苏沿江地区农业科学研究所更多>>
- 发文基金：江苏省高技术研究计划项目国家科技支撑计划江苏省高校重点实验室开放研究课题更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 高繁殖力黄淮山羊大卵泡颗粒细胞上调表达基因的研究
- 在卵泡发育和排卵过程中,卵巢内相关基因的表达具有严格的时空特异性,然而,目前对于山羊卵巢有腔卵泡发育中基因表达的特点并不完全清楚。本研究应用抑制消减杂交技术,对黄淮山羊卵泡期卵巢非闭锁大卵泡(6 mm)和小卵泡(4 mm...
- 庞训胜王子玉应诗家张艳丽严益波王锋
- 关键词：黄淮山羊卵泡颗粒细胞抑制消减杂交表达基因
- 文献传递
- 不同营养水平对湖羊黄体期血液理化指标及卵泡发育的影响被引量：10
- 2012年
- 【目的】研究不同营养水平对湖羊黄体期血液理化指标及卵泡发育的影响。【方法】选择28只经产母羊,于发情周期第6天分别按0.5倍体重维持需要量(R组),1倍体重维持需要量(C组)和1.5倍体重维持需要量(S组)饲喂6 d,第12天每组屠宰6头;剩下的湖羊用于观察发情;分别于发情周期第7、8、10和12天采血。【结果】随着营养水平的提高,≥3.5 mm的卵泡数量显著增加(P<0.05)、2.5—3.5 mm的卵泡数量显著降低(P<0.05),平均发情周期缩短(P<0.05),血液尿素、胆固醇和游离脂肪酸含量显著下降(P<0.05),甘油三酯含量显著提高(P<0.05);S组乳酸脱氢酶活性显著高于C组(P<0.05);血液尿酸、血氨、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白浓度和谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性差异不显著(P>0.05),但尿酸、血氨、低密度脂蛋白含量和谷草转氨酶活性具有时间效应(P<0.05)。【结论】绵羊黄体期不同生理阶段具有不同的营养需求和代谢特点,黄体期限饲抑制卵泡发育与蛋白质和脂类合成降低、分解增强有关。
- 应诗家聂海涛张国敏吴勇聪王子玉庞训胜王昌龙何东洋贾若欣王锋
- 关键词：营养水平湖羊卵泡发育
- 金标孕酮单克隆抗体复合物的制备及鉴定
- 2010年
- 为了获得高质量的金标孕酮单抗,通过采用柠檬酸三钠还原法,制备出符合要求的30nm胶体金溶液,在此基础上摸索胶体金标记孕酮单克隆抗体的最佳条件,并对其进行质量鉴定。结果发现,用柠檬酸三钠还原法制备的30nm胶体金溶液呈深红色,透射电镜观察,胶体金颗粒大小基本一致;胶体金标记孕酮单克隆抗体的最低稳定浓度为16μg/mL,最适稳定浓度为19.2μg/mL,最适标记pH为8.5。制备的金标抗体复合物经电镜观察,周围有一层明显的低电子密度晕圈,且其D520nm值在0.2～0.4之间。
- 许欣孟立王子玉王锋
- 关键词：胶体金
- 山羊卵巢颗粒细胞差异表达基因消减文库的建立
- 2010年
- 为了从单卵泡水平建立非闭锁大小卵泡颗粒细胞基因表达的消减文库,选择繁殖性能正常、空怀高繁殖力黄淮山羊2只,以氯前列烯醇处理40h后取卵巢,计数卵泡并测量卵泡直径,钝性分离采集卵泡颗粒细胞,置于液氮内保存,取样后的卵泡部分组织采用原位缺口末端标记法(TUNEL)进行闭锁鉴定。选择直径6和4mm非闭锁卵泡,提取颗粒细胞mRNA,扩增cDNA,监测抑制消减杂交及其文库构建的试验环节。结果表明:消减文库的阳性克隆测序成功率100%,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,发现12个全新表达序列标签;应用RT-PCR对已知序列的抑制素βA亚基基因(INHBA)和谷胱甘肽S-转移酶A1基因(GSTA1)进行表达水平测定,证实了颗粒细胞2个基因mRNA的表达模式与差异显示的结果相同。表明消减文库构建成功。
- 庞训胜王子玉应诗家张艳丽闫益波吴勇聪孟立王锋
- 关键词：山羊卵巢颗粒细胞基因表达消减文库
- 江苏地方山羊品种GDF9基因第二外显子SSCP分析被引量：5
- 2008年
- 采用PCR-SSCP方法,检测了长江三角洲白山羊、黄淮山羊及波尔山羊等3个繁殖力不同品种的187只个体GDF9基因第二外显子的遗传多态性。结果表明,3个山羊品种群体GDF9基因第二外显子在引物3和引物4扩增片段中均发现多态性。引物3扩增片段中,3个山羊品种都出现AA、AB和BB 3种基因型,长江三角洲白山羊还出现了AC基因型。测序结果表明,引物3的扩增片段中,与AA基因型相比,BB基因型在第二外显子的562 bp处发生了A→C的单碱基突变,导致谷氨酰胺→脯氨酸的改变;AC基因型在第二外显子的421 bp处发生了C→T的单碱基突变,导致丙氨酸→缬氨酸的改变。引物4扩增片段中,3个山羊品种都出现DD和DE两种基因型,黄淮山羊还出现EE基因型,长江三角洲白山羊及波尔山羊还出现DF基因型。测序结果表明,与DD基因型相比,DE基因型在第二外显子的792 bp处发生了G→A的单碱基突变,导致缬氨酸→异亮氨酸的改变;DF基因型在第二外显子的791 bp、792 bp处均发生了G→A的单碱基突变,其中791 bp处的突变是沉默突变。
- 张寒莹丁晓麟应诗家王子玉庞训胜王瑞芳陈启康施健飞张浩王锋
- 关键词：PCR-SSCP山羊GDF9基因外显子繁殖力
- 高繁殖力黄淮山羊大卵泡颗粒细胞上调表达基因的研究被引量：1
- 2010年
- 旨在对山羊卵巢有腔卵泡发育中基因表达特点进行研究。本研究应用抑制消减杂交技术(SSH)对黄淮山羊卵泡期卵巢非闭锁大卵泡(6 mm)和小卵泡(4 mm)颗粒细胞内差异表达基因进行了研究,建立了消减cDNA文库,通过斑点杂交分析,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,结果发现,其中有8个与已知功能基因高度相似,12个全新的表达序列标签(EST)。结果显示,这些基因可能影响着山羊卵泡的发育成熟和排卵。
- 庞训胜王子玉应诗家张艳丽吴勇聪闫益波孟立钟部帅王锋
- 关键词：黄淮山羊卵泡颗粒细胞抑制消减杂交
