陕西省自然科学基金(2006C237)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：蒋文慧马爱群管思彬更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第一附属医院西安交通大学西安交通大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 原代培养乳鼠窦房结细胞的形态学及表面抗原研究被引量：5
- 2009年
- 目的建立乳鼠窦房结细胞(SNC)的体外分离纯化培养方法,了解SNC的形态结构特点,观察表面抗原超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因4(HCN4)和缝隙连接蛋白45(Cx45)的细胞表达特点,为细胞生物起搏的深入研究提供一定实验依据。方法取新生SD乳鼠的窦房结组织,胰酶逐次消化,并予差速贴壁及5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)纯化处理进行原代窦房结细胞的培养。结果在培养的窦房结细胞中可观察到3种形态的细胞,即梭形细胞、三角形细胞和多边形细胞,其中梭形细胞所占比例最大,搏动频率最快,细胞器不发达,肌原纤维稀少,表达HCN4和Cx45;三角形细胞微量表达Cx45。结论①胰酶消化法结合差速贴壁及5-BrdU处理,是可靠的窦房结细胞纯化培养技术;②搏动频率最快、HCN4和Cx45表达阳性的梭形细胞可能系窦房结起搏细胞。
- 管思彬马爱群蒋文慧
- 关键词：窦房结细胞HCN4
- 细胞接触诱导骨髓间充质干细胞获得窦房结细胞表型的初步研究被引量：2
- 2009年
- 目的通过建立体外骨髓间充质干细胞（BMSCs）与纯化培养的乳鼠窦房结细胞共培养体系，探讨窦房结微环境对BMSCs分化的诱导作用。方法自新生乳鼠的心脏分离窦房结细胞，并差速贴壁纯化培养，免疫荧光检测超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因4（HCN4）和缝隙连接蛋白45（Cx45）的表达。自成年大鼠的骨髓分离BMSCs，传2代后，用脂质体介导pEGFP-N1转染标记BMSCs，再与纯化培养的窦房结细胞以1：5比例进行直接接触共培养，并用窦房结细胞条件培养液对转染后的BMSCs进行培养作为对照。1周后应用免疫荧光检测BMSCs的HCN4和Cx45表达。结果接触共培养组中，可见部分表达绿色荧光蛋白的BMSCs同时表达HCN4和Cx45，而条件液培养组中未见HCN4和Cx45的表达。结论直接接触共培养体系可诱导BMSCs初步分化为窦房结样细胞。
- 管思彬马爱群蒋文慧
- 关键词：干细胞窦房结细胞培养
