高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金(200345)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：沈忠耀于慧敏罗晖史悦马玉超更多>>
- 相关机构：清华大学北京科技大学更多>>
- 发文基金：高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程理学更多>>
- 红球菌启动子识别及β-半乳糖苷酶报告基因表达被引量：5
- 2009年
- 红球菌属在生物降解、生物修复、生物转化和生物表面活性剂等领域得到了日益广泛的应用。本研究以红球菌-大肠杆菌穿梭质粒pNV18.1为载体,以腈水合酶为模式酶,研究了大肠杆菌tac、lacZ启动子和红球菌酰胺酶启动子(ami-1/ami-2)在红球菌中的启动效率。结果表明,启动子Ptac、Pami-1(7bpSD-ATG间隔)、Pami-2(13bpSD-ATG间隔)和PlacZ在紫红红球菌ATCC33278中启动表达腈水合酶的比酶活分别是野生菌株的7.5、6.3、5.3和1.8倍,表明这些启动子都可以被红球菌的RNA聚合酶所成功识别。采用PlacZ启动子在红球菌宿主中启动β-半乳糖苷酶报告基因(lacZ),结果表明,lacZ能够在红球菌中高效表达,是优选的红球菌报告基因。
- 刘昌春于慧敏马玉超潘雯宇罗晖沈忠耀
- 关键词：红球菌腈水合酶报告基因Β-半乳糖苷酶
- 诺卡氏菌腈水合酶突变基因在重组大肠杆菌中的高活性表达被引量：2
- 2007年
- 为了提高腈水合酶基因的重组表达水平,提出了3种基因策略:在重组大肠杆菌中共表达激活子序列、在重组毕赤酵母中表达以及对α亚基的起始密码子进行定点突变。结果表明:对α亚基的起始密码子进行定点突变的基因策略为最佳方案,突变后的腈水合酶基因在重组E.coli XL1-Blue(pUC18-NHBAM)中表达时,腈水合酶的比酶活(以干菌质量计)提高到51 U/mg。进一步以pET28a为载体,插入突变后的腈水合酶基因,构建重组菌株E.coli BL21(DE3)/pETNHM。对优选菌株进行培养条件和诱导条件的优化,腈水合酶的最高比酶活达到450 U/mg。
- 史悦于慧敏罗晖田卓玲沈忠耀
- 关键词：腈水合酶重组大肠杆菌重组毕赤酵母定点突变
- 双酶法制备7-氨基头孢烷酸新工艺的研究
- ＜正＞ 7-氨基头孢烷酸（7-ACA）是生产头孢菌素的重要原料,目前都由头孢菌素C（CPC）通过化学法或生物酶法生产。在目前采用的两步酶法生产中,所用菌株的酶活还比较低,一般采用固定化酶的催化工艺,生产成本比较高。本文利...
- 罗晖周航李强于慧敏沈忠耀
- 文献传递
- 折射法与定时进样气相色谱法快速测定丙烯酰胺和丙烯腈
- 2005年
- 为了满足游离细胞催化、多级膜生物反应器连续转化生产丙烯酰胺的新工艺对丙烯酰胺和丙烯腈浓度进行监控的需要,分别提出了采用阿贝折射仪快速分析丙烯酰胺和定时进样气相色谱外标法快速分析丙烯腈浓度的新方法。与传统的丙烯酰胺和丙烯腈的气相色谱内标方法相比,新方法在保持原有气相色谱分析精度的基础上,显著提高了分析的时效性,可以对各级成分变化做准确及时的分析和监控,从而保证了多级膜反应器连续转化过程的操作稳定性。
- 孙旭东于慧敏史悦沈忠耀
- 关键词：丙烯酰胺丙烯腈
