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西瓜ClPDF2.1蛋白的原核表达及其对香蕉枯萎病菌的抑制活性测定: 2015年; 尖孢镰刀菌古巴专化型侵染香蕉引起的香蕉枯萎病严重危害中国香蕉产业。植物防卫素是一类小的富含半胱氨酸的抗真菌蛋白。本研究旨在了解西瓜(Citrullus lanatus)防卫素蛋白Cl PDF2.1对香蕉枯萎病菌的抑制活性。提取西瓜RNA后反转录为c DNA,以西瓜c DNA为模板,克隆Cl PDF2.1基因,将测序正确的Cl PDF2.1连接到载体p GEX-6P-1,随后转化Trans BL21(DE3)p Lys S,IPTG诱导GST-Cl PDF2.1融合蛋白表达16 h后,经SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定GST-Cl PDF2.1融合蛋白的表达,进行GST-Cl PDF2.1融合蛋白体外抑制香蕉枯萎病菌生长的功能初探。本研究为进一步培育转基因香蕉抗病品种奠定基础。; 张继友景晓辉吴伦英刘国道; 关键词：原核表达抗真菌活性香蕉枯萎病菌

热研4号王草原生质体的制备被引量：3: 2015年; 开展原生质体融合育种以及利用原生质体瞬时表达系统进行分子生物学实验的前提和基础是建立高效、有活力的原生质体制备体系。为建立热研4号王草原生质体制备体系，本研究以热研4号王草叶片为原生质体制备的外植体，将切成细丝的热研4号王草幼叶置于含2.0%纤维素酶＋0.5%果胶酶Y-23＋0.5%崩溃酶＋0.6 mol/L甘露醇＋40 mmol/L KCl＋6 mmol/L MES，pH 5.7＋20 mmol/L CaCl2＋0.15%BSA的酶液中，在避光条件下置于50 r/min的摇床酶解6~8 h，获得了大量有活力且均匀一致的原生质体。经过荧光素双醋酸酯（fluoresceindiacetate, FDA）染色和Western blot检测目的蛋白表达，结果发现采用酶解法制备的热研4号王草原生质体活力可达75%，且可用于表达拟南芥外源蛋白。本研究可为下一步利用热研4号王草开展分子生物学研究奠定基础。; 张继友景晓辉吴伦英刘国道吴琳; 关键词：热研4号王草原生质体制备酶解法 BLOT

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国家重点基础研究发展计划(2007CB08903)