国家自然科学基金(30670512)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
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- 油酰乙醇胺对脂多糖诱导的THP-1细胞炎症因子表达的影响
- 2012年
- 目的探讨油酰乙醇胺(OEA)对细菌脂多糖(LPS)诱导的人急性白血病单核细胞(THP-1)中前炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达的影响,并初步探讨OEA作为过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PPAR-α)激动剂参与对炎症调节的作用机制。方法体外培养的THP-1细胞,分别加入不同浓度的OEA(10,20,40μmol/L)或非诺贝特(100μmol/L)共同孵育1 h后,用1μg/mL LPS分别诱导6或24 h。采用RT-PCR、实时定量PCR和酶联免疫吸附检测测定细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA和蛋白的表达的变化,并使用实时定量PCR及Western blot方法检测PPAR-α及Toll样受体4(TLR4)的mRNA和蛋白的表达。结果相对于正常THP-1细胞,LPS诱导后细胞中炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)表达明显增加。OEA对TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA和蛋白的表达有抑制作用,并呈现出一定的剂量依赖性。且OEA在激活PPAR-α表达的同时能够抑制TLR4的表达。结论 OEA对LPS诱导的炎症反应有抑制作用,其机制可能与激活PPAR-α,下调TLR4的表达有关。
- 孟祥岚邹军张乐金鑫
- 关键词：炎症因子PPAR-Α
- IL-18、IL-12及相关因子在大鼠实验性自身免疫心肌炎心肌中的表达时程和特征被引量：9
- 2010年
- 目的:探讨IL-18、IL-12及相关细胞因子在大鼠实验性自身免疫心肌炎(EAM)心肌中的表达时程和特征。方法:以猪心脏肌球蛋白加等体积弗氏完全佐剂,辅结核杆菌H37Ra株之乳液为抗原,于Lewis大鼠双后肢皮下注射造模(EAM);用胶原酶灌流和网筛过滤法分离纯化心肌细胞;经免疫组化技术评估心肌损伤程度;按实时荧光定量法测急性期和慢性期,IL-18、IL-12及相关因子(IL-18R,IL-18RAcPL,IL-18BP以及IL-12p40,IL-12p35,IL-12Rβ1,IL-12Rβ2)mRNA表达情况。结果:IL-18、IL-12及相关因子表达主要在急性期,免疫后2周表达增多并达峰值(P<0.01,与正常对照组比较),4周后减少,并与EAM病程正相关;IL-18、IL-12及相关因子主要在巨噬细胞表达,其受体复合物在αβT细胞表达;慢性期仅IL-18BP在心肌细胞有表达。结论:IL-18、IL-12及相关因子参与EAM病理过程,各因子主要集中于急性期巨噬细胞和αβT细胞表达。
- 常贺李刚张乐邹军朱铉金鑫
- 关键词：IL-18IL-12实验性自身免疫性心肌炎实时荧光定量RT-PCR
- 液相色谱-质谱联用法对大鼠体内s-油酰丙醇胺的组织分布研究(英文)被引量：3
- 2011年
- 建立大鼠不同组织(脑、心、肺、肝、脾、小肠、肾、脂肪和肌肉)中s-油酰丙醇胺含量的测定方法,并研究s-油酰丙醇胺在大鼠体内的组织分布情况。s-油酰丙醇胺提取采用液-液萃取,以10-十一烯酰乙醇胺为内标。SD雄性大鼠灌胃给予s-油酰丙醇胺(50 mg.kg-1)后,于4个时间点(各时间点5只大鼠)处死大鼠后,取相应组织匀浆处理,通过LC-MS/MS法测定其各脏器或组织中浓度。通过多反应检测模式测得定量下限1μg.L-1,各组织匀浆中s-油酰丙醇胺在1～2×104μg.L-1内线性良好(r≥0.999 0),方法经验证符合生物样品分析要求。灌胃给药后药物浓度最高的组织为小肠和心脏,达峰时间分别为15和90 min。该法操作简便、灵敏度高,适用于s-油酰丙醇胺在大鼠体内的组织分布研究。
- 郑城微金鑫沈燕慧马昂卢伟
- 关键词：LC-MS/MS
