河南省医学科技创新人才工程项目(2002-119)
- 作品数：7 被引量：32H指数：4
- 相关作者：马远方白慧玲刘广超张军李淑莲更多>>
- 相关机构：河南大学华中科技大学更多>>
- 发文基金：河南省医学科技创新人才工程项目河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗人DR5单克隆抗体——mDRA-6与顺铂协同杀伤白血病细胞HL-60作用研究被引量：5
- 2007年
- 目的:观察抗死亡受体5(Death receptor5,DR5)单克隆抗体———mDRA-6与顺铂(DDP)对HL-60细胞的协同杀伤作用。方法:DR5蛋白免疫BALB/c小鼠,融合筛选抗DR5杂交瘤细胞,制备抗DR5单抗———mDRA-6;流式细胞术测定顺铂对HL-60细胞表面DR5表达及细胞凋亡率;荧光显微镜下观察mDRA-6与顺铂协同作用下HL-60细胞形态变化;MTT法测定不同浓度的顺铂与mDRA-6对HL-60细胞存活的影响;琼脂糖凝胶电泳检测mDRA-6与顺铂联合对HL-60细胞DNA片段化的影响。结果:顺铂可诱导HL-60细胞表面DR5表达增加,mDRA-6与顺铂联用致HL-60细胞出现染色质浓缩、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成等细胞凋亡形态学变化;250ng/ml的mDRA-6作用于HL-60细胞10小时,细胞凋亡率为16.61%;0.16μg/ml的DDP作用于HL-60细胞10小时,细胞凋亡率为2.35%;二者联合作用后,HL-60细胞凋亡率增至57.10%;mDRA-6与DDP联合作用HL-60细胞,DNA琼脂糖凝胶电泳显示明显“梯形”条带。结论:抗DR5单抗———mDRA-6与DDP对HL-60细胞具有强大的协同杀伤作用。
- 李淑莲马远方刘广超张军白慧玲刘英杰
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体死亡受体单克隆抗体顺铂
- 死亡受体5诱导Jurkat细胞凋亡的作用被引量：2
- 2005年
- 目的:探讨DR5在TRAIL诱导Jurkat细胞凋亡中的作用.方法:用含人全长DR5细胞外全长结构域重组DR5免疫BALB/c小鼠,制备抗DR5 mAb.将96孔U型细胞培养板加1×105/孔Jurkat细胞和5 mg/L抗DR5 mAb,采用TRAIL试剂盒检测细胞凋亡率.结果:抗DR5 mAb与Jurkat细胞表面的DR5作用后,TRAIL对Jurkat细胞的杀伤功能几乎被抗DR5 mAb完全阻断,阻断率高达90.49%.结论:DR5在TRAL诱导的Jurkat细胞凋亡中起关键作用.
- 白慧玲龚非力马远方
- 关键词：JURKAT细胞TRAIL细胞凋亡DR5
- 抗DR5单克隆抗体对NCL-H446的致凋亡作用被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨抗DR5单克隆抗体(mDRA-6)对小细胞肺癌NCL-H446的凋亡作用。方法:NCL-H446细胞常规培养24 h后分为对照组、抗DR5单克隆抗体(mDRA-6)及mDRA-6+顺铂处理组。以细胞形态学改变、流式细胞仪和DNA凝胶电泳分析为凋亡观察指标。结果:经mDRA-6处理的NCL-H446细胞出现核固缩、染色质边缘化和凋亡小体形成;琼脂糖凝胶电泳呈现细胞凋亡特征性DNA梯状带;细胞凋亡发生率与抗DR5单克隆抗体(mDRA-6)剂量及细胞表面DR5的表达呈相关性。结论:mDRA-6对小细胞肺癌NCL-H446的杀伤作用主要通过诱导凋亡实现的,细胞表面DR5受体表达上调可促进凋亡作用。
- 卢锋马华娟乔玲张军刘广超马远方
- 关键词：凋亡
- 抗死亡受体-5单克隆抗体的制备及特性鉴定被引量：13
- 2006年
- 目的：研制抗DR5单克隆抗体（mAb），并鉴定其特性。方法：以纯化的DR5免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术制备抗DR5mAb。用Ig亚类ELISA试剂盒鉴定抗DR5mAb的亚类。用ELISA法测定sDR5对抗DR5 mAb与DR5结合的阻断作用及流式细胞术检测与Jurkat细胞膜上DR5结合的阻断作用。以鉴定mAb的特异性。用间接ELISA法检测腹水mAb的效价、亲和常数并进行表位分析。结果：获得4株可分泌抗DR5 mAb的的杂交瘤细胞系YM366EC、YM366ED、YM369F5和YM369E6。4株mAb的Ig亚类均为IgG1；腹水mAb效价为1×10^-4-5×10^-6；亲和常数为1×10^9水平，4株mAb可识别2种不同的抗原表位。结论：获得4株抗DR5的mAb，为进一步用于临床诊断和实验研究创造了条件。
- 白慧玲赵粤萍刘广超马远方
- 关键词：DR5单克隆抗体
- 抗人DR5单克隆抗体mDRA-6对HL-60细胞的诱导凋亡作用被引量：5
- 2007年
- 目的观察抗死亡受体5(DR5)单克隆抗体mDRA-6对HL-60细胞的凋亡作用。方法制备抗人DR5单克隆抗体mDRA-6;荧光显微镜下观察mDRA-6作用后HL-60细胞的形态变化;MTT法测定不同浓度mDRA-6在不同作用时间对HL-60细胞存活的影响;通过FITC-Annexin V及PI标记细胞,以流式细胞仪检测mDRA-6对HL-60细胞凋亡率的影响;琼脂糖凝胶电泳检测mDRA-6对HL-60细胞DNA片段化的影响。结果mDRA-6导致HL-60细胞染色质浓缩、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成;mDRA-6对HL-60细胞具有明显的杀伤作用,24 ng/mL mDRA-6作用HL-60细胞10 h,细胞死亡率达21.2%;1μg/mL的mDRA-6作用8 h,可使HL-60细胞死亡44.1%;Annexin V及PI双染显示,10μg/mL mDRA-6作用2 h,HL-60细胞的凋亡率达48.1%;20μg/mL mDRA-6作用HL-60细胞3 h,DNA琼脂糖凝胶电泳显示明显的“梯形”条带。结论抗DR5单克隆抗体mDRA-6具有诱导HL-60细胞凋亡作用。
- 李淑莲马远方刘广超张军白慧玲刘英杰卢峰
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体死亡受体凋亡抗体
- 交联抗DR5单抗YM366EC诱导的Jurkat细胞凋亡机制探讨被引量：1
- 2007年
- 为探讨抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的死亡受体5(DR5)单抗-YM366EC引起Jurkat细胞凋亡信号转导通路,阐明抗DR5抗体的抗肿瘤效应机制。观察了交联366EC对Jurkat细胞的形态变化,细胞增殖和细胞凋亡率影响。进一步用Western blot法检测YM366EC作用于Jurkat细胞不同时间Bcl-2、Cyt-C、Bax、Caspase 3、Caspase 9的表达变化。结果发现DR5抗体YM366EC单独应用无凋亡作用,但抗小鼠IgG交联366EC后可致Jurkat细胞染色质边集、断裂,细胞出芽,形成凋亡小体,并可直接诱导TRAIL敏感的Jurkat细胞凋亡。Western blot检测到随着抗体诱导时间的延长Jurkat细胞Bel-2蛋白表达减少;Cyt-C、Bax、有活性的Caspase 3和Caspase 9蛋白的表达增加。结果表明交联抗DR5抗体YM366EC对Jurkat细胞增殖有明显的抑制作用,诱导的Jurkat细胞凋亡的分子机制涉及到Cyt-C、Bax、Caspase 3、Caspase 9。
- 白慧玲杜耀武王雪垠李淑莲王靖刘广超马远方
- 关键词：交联JURKAT细胞凋亡流式细胞术免疫印迹
- 阿霉素增强抗人DR5单克隆抗体mDRA-6诱导HL-60细胞凋亡的作用被引量：6
- 2006年
- 目的观察抗死亡受体5(DR5)单克隆抗体(单抗)mDRA-6与阿霉素(Adr)对 HL-60细胞的协同杀伤作用。方法用 DR5蛋白免疫 BALB/c 小鼠,融合筛选抗 DR5杂交瘤细胞,制备抗人DR5单抗 mDRA-6;流式细胞术测定 Adr 对 HL-60细胞表面 DR5表达的影响;荧光显微镜下观察mDRA-6与 Adr 协同作用下 HL-60细胞的形态变化;MTT 法测定1μg/ml Adr 与不同浓度的 mDRA-6对 HL-60细胞存活的影响;琼脂糖凝胶电泳检测 mDRA-6与 Adr 联合对 HL-60细胞 DNA 片断化的影响结果 Adr 诱导 HL-60细胞表面 DR5表达,mDRA-6作用后 HL-60细胞出现染色质浓缩、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成,mDRA-6与 Adr 联用细胞形态变化更明显;mDRA-6与 Adr 对 HL-60细胞具有明显的协同杀伤作用,20 ng/ml 的 mDRA-6作用 HL-60细胞10h,细胞死亡率为9.32%,1μg/ml Adr作用 HL-60细胞10 h,细胞死亡率为17.47%,20 ng/ml mDRA-6联合1μg/ml Adr,可使 HL-60细胞死亡率增至65.06%;20 μg/ml mDRA-6与1μg/ml Adr 联合作用于 HL-60细胞3 h,DNA 琼脂糖凝胶电泳显示明显“梯形”条带。结论抗 DR5单抗 mDRA-6与 Adr 对 HL-60细胞具有强大的协同杀伤作用。
- 李淑莲马远方刘广超张军白慧玲刘英杰卢锋
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体死亡受体抗体MDRA-6阿霉素
