国家科技型中小企业技术创新基金(10C26223601934)
- 作品数：4 被引量：52H指数：4
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- 相关机构：南昌大学南昌市西湖区疾病预防控制中心江西中德生物工程有限公司更多>>
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- 双抗夹心ELISA方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌被引量：21
- 2010年
- 采用0.5%福尔马林灭活的单核细胞增生李斯特氏菌作为免疫原免疫日本大耳兔,获得抗单核细胞增生李斯特氏菌多克隆抗体,并以此多克隆抗体作为捕获抗体,以抗单核细胞增生李斯特氏菌InternalinA(InlA)单克隆抗体作为检测抗体,建立快速、特异的检测该菌的双抗夹心ELISA方法。结果表明:该方法对单核细胞增生李斯特氏菌纯培养液的最低检测量为1.7×105CFU/mL。在检测食品样品的实验中,食品样本对本方法干扰较小,运用选择性增菌液进行前增菌可提高该方法的准确性。
- 段霞黄欣黄岭芳魏华赖卫华
- 关键词：单核细胞增生李斯特氏菌多克隆抗体单克隆抗体
- 鼠伤寒沙门氏菌特异性多克隆抗体的纯化方法被引量：10
- 2011年
- 以福尔马林灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫雌性日本大耳兔,制备抗沙门氏菌的多克隆抗体。分别通过辛酸-硫酸铵沉淀法、磁珠偶联抗原吸附法纯化抗体,所制备的抗体效价为3.2×105,纯度较高,但交叉反应现象较严重。本实验以杂菌抗原反向吸附法纯化抗体,有效消除了抗体与杂菌的交叉反应,初步建立了一种高特异性多克隆抗体的纯化方法。
- 牛瑞江赖卫华熊齐荣魏华熊勇华
- 关键词：鼠伤寒沙门氏菌多克隆抗体
- 磁珠离子交换吸附法纯化兔血清中多克隆抗体的研究被引量：4
- 2011年
- 以羧基化的超顺磁纳米磁珠作为离子交换吸附介质,建立一种新型的非层析离子交换吸附方法,用于对兔血清中抗副溶血弧菌多克隆抗体进行纯化。通过优化吸附、洗脱缓冲液pH值、盐离子浓度以及洗涤液Tween-20体积分数,确立磁珠离子交换吸附纯化条件,并将该纯化方法和辛酸-硫酸铵法、亲和层析法进行比较。结果表明:血清中的多克隆抗体能够在pH6.0的磷酸盐缓冲液(0.01mol/L)中被磁珠完全吸附,经过含0.1%Tween-20的洗涤液两次洗涤,能够达到较好的洗涤效果,用含0.3mol/L NaCl的磷酸盐缓冲液(pH8.0)可以将吸附的抗体洗脱;经该法纯化后,多抗纯度为82.6%,回收率为58.0%,效价为1/64000;每克磁珠可纯化10mL的血清,整个过程只需要1h。该方法和辛酸-硫酸铵法、亲和层析法相比有明显的优势,因此具有较好的应用前景。
- 熊齐荣牛瑞江解泉源熊勇华赖卫华
- 关键词：磁珠
- 大肠杆菌O157:H7胶体金试纸条研制被引量：19
- 2010年
- 采用胶体金标记抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体(鼠源),通过将大肠杆菌O157:H7多克隆抗体和驴抗鼠抗体(二抗)喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,研制大肠杆菌O157:H7胶体金快速检测试纸条。通过优化实验,确定最佳条件为标记量16.8μg/mL、标记pH8.0、封闭剂PEG20000、检测时样品最佳pH7.0～7.5。对26株常见细菌交叉反应结果表明,该试纸条除与鼠伤寒沙门氏菌ATCC13311和金黄色葡萄球菌CMCC26003有轻微交叉反应外,与其他24株菌均无交叉反应。该试纸条灵敏度为104CFU/mL。用该试纸条检测大肠杆菌O157:H7操作简便、快捷、灵敏度高、特异性强。
- 黄岭芳段霞陈媛刘文娟魏华赖卫华
- 关键词：大肠杆菌O157:H7胶体金试纸条
