重庆市卫生局科研项目(2011-1-083)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：徐发良陈太忠龚建平熊弢张艳更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院重庆医科大学附属永川医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂多糖预处理对GSK-3功能活性的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)耐受和糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase 3,GSK-3)抑制剂对其功能活性的影响。方法雄性健康SD大鼠36只,随机数字表法分为对照组(NC)、LPS耐受组(ET)和LiCl处理组(LiCl),每组12只;LPS耐受组(ET)于第1、2、3天接受0.015、0.030和0.060 mg/kg LPS腹腔注射;LiCl处理组(LiCl)同样时间点腹腔注射2.5 mol/L LiCl 0.25 ml,饮水含3 mmol/L LiCl;对照组每天腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)0.25 ml;处理结束后每组再按是否接受致死量LPS(10 mg/kg)攻击而分为LPS攻击前和LPS攻击后2个亚组,LPS攻击后组按10 mg/kg腹腔注射LPS,LPS攻击前亚组等体积的PBS腹腔注射,12 h后取材。按照[γ-32P]放射性掺入法、用液体闪射仪检测肝组织GSK-3激酶总活性,RT-PCR法检测GSK-3α、GSK-3βmRNA表达,Western blot法分析GSK-3α/β、pGSK-3α/β蛋白表达,考马斯亮蓝法测定Calpain活性,激光共聚焦显微镜下观察GSK-3亚细胞定位状况。结果 LPS攻击后ET组GSK-3活性显著低于NC组LPS攻击前水平[(1 311±57),P=0.023 5],其他各组在LPS攻击前后差异无显著性。LPS耐受、LiCl预处理和LPS攻击未导致GSK-3α和β的mRNA表达变化和GSK-3α和β的总蛋白表达变化(P>0.05)。LPS攻击前,NC、ET和LiCl组GSK-3α磷酸化无显著增加(P>0.05),但LPS攻击后,LiCl组GSK-3α磷酸化显著增加[(3.07±0.62),P<0.05]。LPS攻击前,ET和LiCl组GSK-3β磷酸化比NC组显著增加[ET(1.49±0.26);LiCl(2.05±0.43),P<0.05];但LPS攻击后,只有LiCl组GSK-3β磷酸化显著增加[(1.54±0.32),P<0.05]。同时,LPS耐受动物经大剂量LPS攻击后肝组织GSK-3α严重降解。LPS攻击导致各组与LPS攻击前比较Calpain显著升高[NC(2.78±0.53);ET(2.45±0.22);LiCl(2.39±0.86),P<0.05],但组间比较没有显著差异(P>0.05)。GSK-3亚细胞定位分析,LPS耐受时胞核内聚集的GSK-3减少,并主要集中于细胞质内;在不同浓度LiCl刺激下,胞核GSK-3也可减少,但不显著;在大剂量LPS攻击下,胞�
- 陈太忠张艳熊弢徐发良龚建平余正
- 关键词：脂多糖内毒素耐受糖原合成酶激酶-3
