北京市科技计划项目(H060920051430)
- 作品数：4 被引量：12H指数：1
- 相关作者：黄大伟陈香美傅博孙雪峰蔡广研更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：北京市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血管组织工程种子细胞的建立及意义被引量：1
- 2011年
- 目的:利用人Nanog基因转染血管组织工程的种子细胞(血管内皮细胞ECV304),提高其增殖能力,以在较短时间内获得大量种子细胞,从而为克服血管组织工程种子细胞来源的匮乏及组织工程血管的快速构建提供新途径。方法:制备含有人Nanog基因的复制缺陷型重组腺相关病毒血清2型病毒颗粒rAAV2-hNanog,用rAAV2-hNanog转染ECV304细胞,然后采用RT-PCR检测hNanog基因在转染的ECV304细胞中的表达,再用MTT、免疫荧光及激光共聚焦技术检测hNanog基因对血管内皮细胞ECV304生长的影响。结果:(1)rAAV2-hNanog转染ECV304细胞后,RT-PCR检测表明hNanog基因能在血管内皮细胞ECV304中稳定表达;同时,血管内皮细胞在转染后的增殖能力也显著增强(P<0.05)。光镜下观察发现,转染的血管内皮细胞的形态无明显改变。结论:转染hNanog基因后,血管内皮细胞的形态无显著变化,但其增殖能力明显增强。利用hNanog基因提高血管内皮细胞的增殖能力,能够克服血管组织工程种子细胞来源不足的瓶颈,为组织工程血管的快速构建及应用提供一种新的方法。
- 傅博黄大伟孙雪峰谢院生蔡广研马强陈香美
- 关键词：种子细胞组织工程血管转染
- 生物人工肾小管上皮种子细胞的建立被引量：1
- 2008年
- 目的利用人Nanog基因转染生物人工肾的种子细胞（肾近曲小管上皮细胞HKC），提高其增殖能力，在较短时间内获得大量种子细胞，为克服肾脏组织工程种子细胞来源的匮乏及生物人工肾的快速构建提供新途径。方法制备含有人Nanog基因的复制缺陷型重组腺相关病毒血清2型病毒颗粒rAAV2-hNanog，用rAAV2-hNanog转染肾小管上皮细胞，然后采用RT-PCR检测hNanog基因在转染的肾小管上皮细胞中的表达，再用MTT、免疫荧光及激光共聚焦技术检测hNanog基因对肾小管细胞HKC生长的影响。结果rAAV2-hNanog转染肾小管上皮细胞后，RT-PCR检测表明hNanog基因能在肾小管上皮细胞中稳定表达；同时，小管上皮细胞在转染后的增殖能力也显著增强（P〈0．05）。光镜下观察发现，转染的小管上皮细胞的形态无明显改变。结论利用hNanog基因提高生物人工肾小管种子细胞的增殖能力，可为生物人工肾的快速构建及应用提供一种新的方法。
- 黄大伟傅博陈香美孙雪峰谢院生蔡广研严泉剑
- 关键词：种子细胞转染
- 细胞混合种植法构建生物人工肾小管的初步研究被引量：9
- 2008年
- 目的为构建一种既有滤过及抗凝功能、同时又有重吸收及内分泌功能的新型生物人工肾小管提供实验基础。方法以层黏连蛋白0.74mg/ml包被的AV400滤器为载体,将转染人Nanog基因的血管内皮细胞(ECV304)悬液与转染人Nanog基因的肾小管上皮细胞(HKC)悬液等体积混匀,分次注入实验组滤器内腔,构建生物人工肾小管。对照组只在层黏连蛋白包被的AV400滤器内腔注入不含细胞的培养基。采用PKH26、PKH67标记法分别观察ECV304、HKC在聚砜膜中空纤维上的分布;应用扫描电镜检测混合细胞在聚砜膜中空纤维上的生长状况及形态。结果混合细胞能在聚砜膜中空纤维上较好地黏附、生长。PKH26、PKH67标记检测发现细胞呈致密点片状分布;扫描电镜观察可见细胞形成单层片状。结论两种转染细胞在层黏连蛋白包被的聚砜膜中空纤维上生长良好,这为构建一种既有血管内皮细胞抗凝、同时又有小管上皮细胞重吸收功能的新型生物人工肾小管奠定了实验基础。
- 黄大伟傅博陈香美刘维萍汪杨
- 关键词：转染上皮细胞肾小管
- 生物人工肾系统的组织工程构建及应用被引量：1
- 2007年
- 一、生物人工肾的研究及应用概况
1．研究概况：急慢性肾功能衰竭是临床上较常见的肾脏疾病，尽管采用血液透析、透析滤过及非卧床持续性腹膜透析（CAPD）治疗可延缓疾病的进展，但临床上仍有较高的病死率。发生肾功能衰竭时，代谢废物在体内潴留，危及患者生命，因此，人们利用具有良好生物相容性、水及溶质通透性的生物材料模拟肾小球的滤过功能，建立了血液透析的方法。后来，又将内皮细胞种植在生物材料（如聚砜膜）中空纤维腔内，制成生物人工血滤器，即生物人工肾小球。
- 黄大伟陈香美
- 关键词：急慢性肾功能衰竭非卧床持续性腹膜透析血液透析内皮细胞种植肾脏疾病
