江西省卫生厅资助项目(2001005)
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
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- 新鲜制备及中长期保存的羊膜细胞外基质结构特征被引量：12
- 2006年
- 目的:制备并保存羊膜细胞外基质,观察新鲜制备及中长期保存的羊膜细胞外基质的结构特点。方法:实验于2004-01/12在赣南医学院科研中心完成。①采用目前国际公认的羊膜制备与保存方法,制备并保存羊膜细胞外基质。②取新鲜制备的羊膜细胞外基质、中期保存的羊膜细胞外基质(4℃恒温冰箱储存备用1周)、长期保存的羊膜细胞外基质(-80℃超低温冰箱中储存备用3个月),通过大体、光镜、透射电镜和扫描电镜观察其形态及结构特点。结果:①羊膜细胞外基质大体观察:新鲜制备及中、长期保存的羊膜细胞外基质均为透明、无色、有一定韧性生物膜,其厚度约0.02～0.4mm。②光镜观察结果:新鲜制备和经中、长期保存的羊膜细胞外基质可见2层结构:基底膜厚薄不均,无细胞结构;致密层由结缔组织组成。新鲜羊膜与中期保存的羊膜细胞外基质致密层较长期保存的羊膜细胞外基质略厚;新鲜羊膜细胞外基质可见少量成纤维细胞,而中、长期保存羊膜细胞外基质的成纤维细胞较少见。③透射及扫描电镜观察结果:新鲜制备与中期保存的羊膜细胞外基质两者的基底膜厚约0.1～0.2μm,致密层厚约30～400μm,其主要结构由胶原纤维、网状纤维和基质组成,偶见成纤维细胞;长期保存的羊膜细胞外基质的基底膜厚约0.2～0.3μm,致密层厚约20～400μm,其中致密层的主要成分为胶原纤维和网状纤维,无细胞结构;三者的胶原原纤维结构完全一致。结论:羊膜经过组织工程技术处理后去除其上皮细胞或使上皮细胞失活,保留基底膜与致密层,形成羊膜细胞外基质。羊膜细胞外基质主要成分是胶原纤维和网状纤维,因其免疫原性低于羊膜并具有抗炎性,是一种特殊的细胞外基质,作为一种细胞黏附的基膜和生物支架,具有广阔的研究和应用前景。因此羊膜细胞外基质可作为体外细胞培养的生物�
- 罗晓婷李舒梅文道源熊跃玲
- 关键词：细胞外基质羊膜结构特征
- 人角膜缘干细胞初步建系研究被引量：1
- 2004年
- 目的 :探讨建立人角膜缘干细胞系 ,为组织工程研究提供足够的细胞储备。方法 :取健康人角膜缘深部色素区组织块 ,经消化后 ,在含有RPMI- 1 6 4 0、2 0 %胎牛血清的培养瓶和以羊膜细胞外基质为培养载体的培养皿中分别进行体外培养 ,并对连续传代的细胞行光镜、扫描电镜观察 ,比较细胞形态的变化并进行细胞计数与冻存处理。结果 :人角膜缘干细胞具有人上皮细胞培养的特性 ,在培养液中传 33代后 ,细胞仍然保持旺盛的分化、增殖能力 ,并且更适宜在羊膜细胞外基质上生长 ;目前我们冻存细胞的复苏率为 82 .2 %。结论 :将人角膜缘干细胞经体外培养 33代并逐代冻存后初步建立了人角膜缘干细胞系。
- 文道源李舒梅严宜明曾祥云罗晓婷陈水亲熊跃玲叶金花汤军桥曾爱萍赵清明
- 关键词：角膜缘干细胞细胞系
- 羊膜建库及其临床应用研究被引量：2
- 2002年
- 目的 :制备与保存羊膜 (Amnioticmembrane,AM ) ,为临床移植治疗眼表泪液 (Ocularsur face&Teardisease ,OSTD)提供新鲜羊膜 (Freshamnioticmembrane ,FSAM )、冻干羊膜 (Frozenam nioticmembrane ,FZAM )并观察其眼表重建的特点与临床疗效。方法 :采用目前国际公认的羊膜制备与保存方法 ,制备FSAM、FZAM并进行保存研究 ,经组织染色和电子显微镜检查 ,观察保存羊膜的形态及其活性 ;并将FSAM、FZAM应用于 12例OSTD患者 ,行患眼FSAM或FZAM移植术。通过术后印迹细胞学追踪观察移植后AM上皮细胞存活与移行、替代时间 ,评估AM移植重建眼表的临床疗效。结果 :FSAM、FZAM在光镜和电镜下均与正常球结膜组织结构相近 ,主要结构为胶原纤维和网状纤维。 12例OSTD患者行羊膜移植术 (Amnioticmembranetransplantation ,AMT)后均未见明显急性排斥反应 ,术后 1～ 2周可见少量新生血管长入植片 ,AMT后印迹细胞学追踪检查 ,术后 3个月为阴性 ,4个月出现阳性反应。所有患者术后随访 5～ 18个月 ,平均 11个月 ,AM在术后 4～ 9个月逐渐溶解、消失 ,移植区眼表的色泽与结构基本恢复正常。结论 :FSAM、FZAM是目前理想的结膜替代材料并可有效地用于重建角、结膜表面 ,减轻炎症反应 ,减少新生血管的生成 ,抑制纤维组织增生 。
- 文道源李舒梅曾祥云王辉钟瑞冲熊跃玲叶金花罗晓婷
- 关键词：羊膜羊膜移植眼表重建
