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胶质瘤干细胞错配修复基因hMLH1和hMSH2与替莫唑胺耐药相关性研究被引量：6: 2013年; 目的研究替莫唑胺（TMZ）对胶质瘤干细胞（GSC）错配修复基因hMLH1和hMSH2的影响及其与TMZ耐药的相关性。方法采用悬浮培养法分离培养GSC株。免疫荧光法检测CD133、Nestin和GFAP。细胞毒性实验计算TMZ半数抑制浓度（IC50）。甲基化特异性PCR（MSP）和Western blot分别检测hMLH1和hMSH2基因启动区甲基化和蛋白表达。结果（1）从U251和A172胶质瘤细胞系中成功分离胶质瘤干细胞株U251g和A172g。（2）U251g和A172g的IC50分别为1695．41μmol／L和724．63μmol／L。以IC50、150％IC50两种浓度对U251g和A172g诱导培养1周后对应U251g-1、U251g-2和A172g-1、A172g-2，IC50各为1913txmol／L、2555μmol／L和754μmol／L、1549μmol／L。（3）诱导后的U251g和A172g的hMLHI基因启动区发生异常甲基化和蛋白表达缺失，且A172g的甲基化水平随药物浓度的增加而增高；诱导后的U251g和A172g的hMSH2基因启动区未发生甲基化和蛋白表达缺失。结论GSC存在于U251和A172细胞系中，对TMZ不同程度耐药。TMZ诱导下，胶质瘤干细胞U251g和A172g错配修复系统功出现异常，主要表现为hMLH1基因启动区甲基化和蛋白表达缺失。; 李孟凯孙彦辉张亚楠历俊华李杰飞黄铂渊张红波; 关键词：胶质瘤干细胞错配修复基因替莫唑胺

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国家自然科学基金(2060146)