湖北省教育厅科学技术研究项目(B2013115)
- 作品数：10 被引量：67H指数：5
- 相关作者：杨靖姜红梅刘建光李明远王保宁更多>>
- 相关机构：湖北医药学院四川大学四川万可泰生物技术有限责任公司更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅科学技术研究项目四川省科技厅科技支撑计划项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 急性冠脉综合征患者心肌氧化损伤情况评估及与血清IMARs的关系被引量：3
- 2015年
- 目的:研究急性冠脉综合征患者心肌氧化损伤情况及其与血清缺血修饰清蛋白和清蛋白比值(IMARs)的关系。方法:将稳定性心绞痛患者(SAP)、不稳定型心绞痛(UAP)、非ST段抬高的急性心肌梗死(NSTEMI)、ST段抬高的急性心肌梗死(STEMI)患者及体检的健康者纳入研究,检测抗氧化指标总抗氧化能力(TAS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD),心肌氧化损伤指标髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)以及清蛋白氧化修饰指标缺血修饰清蛋白(IMA)、清蛋白(Alb)、IMAR。结果:(1)抗氧化指标:UAP、NSTEMI、STEACS患者的MPO、MDA、AOPP含量均高于健康者、SAP患者(P<0.05);(2)心肌氧化损伤指标:UAP、NSTEMI、STEACS患者的MPO、MDA、AOPP含量均高于健康者、SAP患者(P<0.05);(3)清蛋白氧化修饰指标:UAP、NSTEMI、STEACS患者的IMA含量以及IMAR比值均高于健康者、SAP患者,Alb含量低于健康者、SAP患者(P<0.05);(3)IMAR与TAS、GSH、SOD含量呈负相关,与MPO、MDA、AOPP含量呈正相关。结论:急性冠脉综合征患者存在心肌氧化损伤且血清中IMRA异常升高;IMRA与氧化指标和抗氧化指标具有良好的相关性,是反映急性冠脉综合征病情的理想指标。
- 胡俊华刘益国谢铁松
- 关键词：急性冠脉综合征缺血修饰清蛋白髓过氧化物酶
- 奥美拉唑与泮托拉唑辅助治疗对幽门螺杆菌阳性消化性溃疡患者免疫功能的影响被引量：20
- 2016年
- 目的对比奥美拉唑与泮托拉唑辅助治疗对幽门螺杆菌阳性消化性溃疡患者免疫功能的影响。方法采用前瞻性研究方法,选择2014年1月~2016年3月湖北医药学院附属东风医院收治的幽门螺杆菌阳性消化性溃疡患者240例作为研究对象,根据信封随机抽签原则将其分为观察组与对照组,各120例。对照组给予奥美拉唑辅助治疗,观察组给予泮托拉唑辅助治疗,治疗14 d,记录两组患者预后与免疫功能变化情况。结果治疗后观察组与对照组有效率分别为99.2%和89.2%,差异有统计学意义（P〈0.05）。观察组与对照组治疗期间头晕、耳鸣、口干、腹胀等不良反应发生率分别为2.5%和11.7%,观察组不良反应发生率明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗后两组CD4＋、CD8＋细胞含量显著高于治疗前（P〈0.05）,且治疗后观察组CD4＋、CD8＋细胞含量显著高于对照组（P〈0.05）。门诊随访6个月,观察组与对照组的复发率分别为2.5%和20.0%,观察组复发率明显低于对照组（P〈0.05）。结论相对于奥美拉唑,泮托拉唑辅助治疗幽门螺杆菌阳性消化性溃疡患者能改善患者的免疫功能,从而提高疗效,减少不良反应的发生与远期复发。
- 姜红梅刘建光杨靖
- 关键词：奥美拉唑泮托拉唑幽门螺杆菌消化性溃疡免疫功能
- 幽门螺杆菌在胃癌形成中的作用机制被引量：5
- 2014年
- 尽管近年来胃癌的发病率和死亡率有所下降,但在世界范围内它仍位于常见恶性肿瘤发病率和死亡率的第二位。胃癌的形成是一个多因素、多步骤的复杂过程,幽门螺杆菌感染、宿主遗传因素和环境因素等共同决定了这个过程。本文综述了近年来幽门螺杆菌在胃癌形成中的作用机制研究进展,探明幽门螺杆菌与胃癌相关的特异性因子或特异性作用链有助于人类胃癌的防治。
- 谢铁松雷如军邵义敏杨靖刘益国
- 关键词：幽门螺旋杆菌胃癌
- 幽门螺杆菌多表位重组原核表达工程菌的构建及表达特性研究被引量：4
- 2014年
- 目的构建含有幽门螺杆菌尿素酶(UreI、UreB)及粘附素(HpaA)的多表位原核表达质粒pET28a(+)/ureI-ureB-hpaA〔pET28a(+)/IBA〕及相应的原核表达工程菌,研究其表达特性。方法通过生物信息学方法从ureI、ureB和hpaA基因中筛选T细胞和B细胞优势表位基因序列,人工合成并构建原核重组表达质粒pET28a(+)/IBA。经限制性内切酶(NdeⅠ,XhoⅠ)酶切鉴定及DNA测序鉴定后导入大肠杆菌BL21(DE3)。该工程菌经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测重组蛋白(rIBA)的表达情况,以抗幽门螺杆菌悉尼株(SS1株)特异卵黄抗体采用Western blot检测rIBA的抗原性。结果构建的多表位原核表达质粒pET28a(+)/IBA双酶切和测序鉴定与设计序列100%一致。工程菌经IPTG诱导后SDS-PAGE电泳显示在相对分子质量40×103左右有一条明显蛋白条带,Western blot显示有相应位置特异反应条带。结论成功构建幽门螺杆菌多表位重组原核表达质粒pET28a(+)/IBA及相应原核表达工程菌,该工程菌表达的rIBA具有抗原性,表明该重组蛋白与幽门螺杆菌有高度相关性。
- 丁娜娜杨靖潘兴周永君李建春祝捷王保宁李明远
- 关键词：幽门螺杆菌表位尿素酶粘附素工程菌
- 两株抗幽门螺杆菌特异性卵黄抗体的制备及性能被引量：2
- 2015年
- 目的分别制备抗幽门螺杆菌(H.pylori)全菌(SS1株)和尿素酶I和尿素酶B的重组蛋白(r IB)的特异性卵黄抗体(Ig Y),纯化后研究其体外抑菌效果。方法分别以超声破碎SS1菌液和r IB为抗原免疫来杭鸡,用水稀释法和硫酸铵沉淀法纯化获得相应特异性Ig Y(SS1-Ig Y、IB-Ig Y)。将特异性Ig Y与SS1混合作用后共培养检测其抑菌效果,快速脲酶试验检测其抗尿素酶作用。结果成功制备2种特异性Ig Y:SS1-Ig Y和IB-Ig Y,效价超过1∶12 800,纯度超过80%。SS1-Ig Y和IB-Ig Y均有体外抗尿素酶活性和抑菌作用。结论 SS1-Ig Y和IB-Ig Y均具有在体外抑制H.pylori尿素酶活性和抑制H.pylori生长的作用。
- 杨廷敏杨靖王保宁潘兴李建春祝捷周永君李明远曹随忠
- 关键词：幽门螺杆菌卵黄抗体来杭鸡尿素酶
- 幽门螺杆菌BIB原核表达工程菌的构建及微生物学特性分析被引量：4
- 2013年
- 目的构建融合了幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(Ure I)、尿素酶B亚单位(Ure B)的表位基因及霍乱毒素B亚单位(CTB)的原核表达质粒pET28a(+)/ct B/ure I-B(简称BIB)及其原核表达工程菌,并研究其生物学特性。方法参考基因库中ure I、ure B、ct B的基因序列,合成不含信号肽的ct B基因及ure I、ure B优势表位基因,串联融合,形成多靶点重组ct B/ure I-B基因(简称BIB基因),并构建pET28a(+)/BIB原核表达质粒,经限制性内切酶Nco I、Xho I酶切以及DNA测序鉴定正确后,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建含BIB基因的原核表达工程菌。经乳糖诱导后,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白(rBIB),Western blot及肌注BALB/c小鼠实验检测rBIB的免疫反应性和免疫原型。结果构建的原核表达质粒pET28a(+)/BIB,经双酶切和测序分析显示,构建的BIB基因与设计序列100%一致。乳糖诱导后,SDS-PAGE电泳显示在33kD左右出现一条明显蛋白条带,Western blot检测在33kD左右出现特异反应条带,肌注免疫BALB/c小鼠产生了较高的抗体水平。结论成功构建了pET28a(+)/BIB原核表达质粒及BIB原核表达工程菌,该工程菌可表达重组蛋白rBIB,且该重组蛋白具有良好的免疫反应性及免疫原性。
- 潘兴肖继红杨靖王保宁李健春周法庭祝捷周永君李婉宜李明远
- 关键词：幽门螺杆菌URECTB
- 幽门螺杆菌对不同类型胃癌细胞和正常胃上皮细胞凋亡和增殖的影响被引量：5
- 2016年
- 目的探讨幽门螺杆菌（Hp）对胃癌细胞和正常胃上皮细胞形态、细胞周期以及细胞凋亡与增殖的影响。方法采用倒置显微镜观察人低分化胃腺癌细胞株MGC-803、人胃上皮细胞GES-1、人胃癌细胞株BGC-823、人胃腺癌细胞株SGC-7901与感染复数为100／l、200／l的Hp活菌悬液共同培养24、48h后实验组和对照组（不加入Hp活菌悬液）的细胞形态改变；采用蛋白质印迹法检测加入感染复数为100／1的Hp活菌悬液培养24h后4种细胞凋亡蛋白半胱天冬酶（Caspase）-9、Caspase-3和增殖蛋白E2F转录因子1、P21、P53表达情况；采用噻唑蓝比色法（MTT）测定4种细胞与Hp活菌悬液共同培养24、28h后实验组与对照组的增殖活性抑制率；采用流式细胞仪测定4种细胞与Hp活菌悬液共同培养24h后实验组与对照组的凋亡、增殖指数及细胞周期情况。结果经Hp处理后，4种细胞的正常形态随着培养时间的延长、细菌数目增加均发生明显变化。经Hp处理24h后，4种细胞凋亡及增殖蛋白表达水平均呈不同程度改变。加入Hp活菌悬液感染48h后，4种细胞均受到增殖活性抑制，且在感染复数200／1的Hp活菌悬液影响下细胞增殖活性抑制率均明显高于感染复数100／1[MGC-803细胞：（40．2±3．8）％比（32．7±3．2）％，GES-1细胞：（63．7±3．6）％比（41．2±3．5）％，BGC-823细胞：（31．0±2．7）％比（22．7±2．2）％，SGC-7901细胞：（32．0±2．9）％比（27．3±2．5）％]，差异均有统计学意义（均P〈n05）。经感染复数100／1的Hp活菌悬液感染24h后，4种细胞的凋亡指数均明显高于相应对照组[MGC-803细胞：（2．6±0．9）比（0．5±0．5），GES-1细胞：（4．9±0．8）比（1．9±0．6），BGC-823细胞：（2．7±1．1）比（0．7±0．4），SGC-7901细胞：（2．2±0．6）比（0．9±0．6）]，SCC-7901细胞的增殖指数明显低于相应对照组[（46．8±2．
- 姜红梅刘建光杨靖
- 关键词：胃癌幽门螺杆菌细胞增殖细胞凋亡
- 内镜下治疗后早期口服营养液对肝硬化食管胃底静脉曲张破裂再出血的预防作用被引量：18
- 2016年
- 目的观察肝硬化并发食管胃底静脉曲张破裂出血患者在内镜治疗后,早期口服营养液的可行性。方法我院2013年5月至2014年4月就诊的肝硬化并发食管胃底静脉曲张破裂出血患者228例,观察组114例在内镜止血后12 h早期给予口服营养液,114例对照组患者则接受流质饮食。结果治疗后1 w,观察组血清TBIL为(15.4±4.2)μmol/L、A LB为(32.4±6.1)g/L,对照组则分别为(18.7±3.67)μmol/L和(29.1±3.7)g/L,观察组血清白蛋白水平显著高于对照组(P<0.05);观察组INR为(12.0±1.0),对照组为(14.5±0.7),两组差异显著(P<0.05);在随访期间,两组自发性腹膜炎、肺部感染、尿路感染发生率无显著性相差(P>0.05)。结论肝硬化并发消化道出血患者在内镜下止血后早期进食营养液,对肝功能的恢复有帮助,并可能减少再出血的发生。
- 姜红梅刘建光杨靖
- 关键词：肝硬化食管胃底静脉曲张内镜治疗
- 幽门螺杆菌感染与食管鳞癌发生的相关性分析被引量：6
- 2017年
- 目的研究食管鳞癌发生与幽门螺杆菌(Hp)感染两者之间的关系。方法选择2014年至2015年住院的72例食管鳞癌患者作为病例组,另选同时期75例慢性食管炎患者(慢性食管炎组)、60例重度食管不典型增生患者(重度食管不典型增生组)、38例轻-中度食管不典型增生患者(轻中度食管不典型增生组)作为三个对照组。整理四组患者相关的临床资料,利用Warthin-Starry银染及快速尿素酶法对其Hp感染情况进行检测,同时比较四组患者Hp阳性感染率,Hp感染与食管鳞癌患者临床病理特点的关系。统计学检验水准取α=0.05,采用分割χ~2检验时,α'校正为0.017。结果各组患者的Hp感染率依慢性食管炎组→轻-中度不典型增生组→重度不典型增生组→食管癌组之序呈上升趋势,差异具有统计学意义(P<0.01),且食管癌组患者的Hp感染率均高于其他三组(P均<0.017)。Hp感染与食管癌患者性别(P=0.924)、年龄(P=0.933)、肿瘤大小(P=0.985)、部位(P=0.926)及淋巴结的转移与否(P=1.000)之间无统计学关联,与肿瘤的分化程度有关(P=0.046)。结论在食管癌的发生发展的过程,Hp感染起着重要的影响作用。
- 姜红梅刘建光杨靖
- 关键词：食管鳞癌分化程度幽门螺杆菌
- 幽门螺杆菌双基因多表位重组原核表达工程菌的构建及其表达特性的研究被引量：3
- 2013年
- 目的构建含幽门螺杆菌尿素酶保守基因序列ureI和ureB的双基因(简称IB)多表位原核表达质粒以及原核表达工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选T细胞和B细胞优势表位基因序列,人工合成所选择的表位基因序列并构建原核重组表达质粒pET28a(+)/IB。经限制性内切酶(EcoR I,Xho I)鉴定及DNA测序鉴定后,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)。该工程菌经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测重组蛋白(rIB)的表达情况,用Western blot检测rIB的免疫反应性。结果构建的双基因多表位基因序列与所设计的一致;工程菌经IPTG诱导后做SDS-PAGE电泳显示,在28kD左右有一条明显蛋白条带,Western blot结果显示在28kD左右出现特异反应条带。结论成功构建含ureI和ureB双基因序列的原核表达质粒pET28a(+)/IB及工程菌,该工程菌表达的重组蛋白rIB能被抗幽门螺杆菌悉尼株(H.pylori SS1)的特异抗体所识别,表明该新重组蛋白与幽门螺杆菌有高度相关性。
- 杨靖潘兴欧琴周法庭李建春祝捷周永君李明远王保宁
- 关键词：幽门螺杆菌多表位原核表达
