国家科技重大专项(2009ZX08009-100B)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：郭宝太王斌高磊刘涛翁曼丽更多>>
- 相关机构：青岛农业大学中国海洋大学中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学天文地球更多>>
- 条斑紫菜Rab1基因的克隆与生物信息学分析
- 2011年
- Rab蛋白是小分子量GTP结合蛋白家族中的成员之一,它与植物抗逆性密切相关。以拟南芥Rab基因序列为探针,通过筛选条斑紫菜EST数据库中的同源序列,拼接出了其Rab1基因的含有完整开放阅读框(ORF)的cD-NA序列。根据拼接的序列设计引物,利用RT-PCR成功克隆了条斑紫菜Rab1基因的cDNA。T-A克隆后测序结果显示其cDNA含有长615bp的完整ORF,编码产物含203个氨基酸残基,分子量为22.5kDa。条斑紫菜Rab1与拟南芥Rab1聚为一类,它与多种生物的Rab1具有较高的序列一致性。
- 孙明业郭宝太隋炯明
- 关键词：条斑紫菜聚类分析
- 坛紫菜TPS基因的克隆及其原核表达被引量：3
- 2013年
- 以叶状体总DNA为模板,用3对DNA引物进行PCR扩增,获得了坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶基因(PhTPS)3个重叠的片段,大小分别为1.3,1.1,0.7 kb。用pMD18-T载体克隆这些片段,经测序与序列拼接获得了该基因完整的ORF序列,其长度为2 727 bp。在已经构建条斑紫菜TPS基因原核表达载体pET22b-PyTPS的基础上,用PhTPS基因替代该表达载体中的PyTPS基因,获得了PhTPS基因的原核表达载体pET22b-PhTPS。重组菌BL21(pET22b-PhTPS)经IPTG诱导,SDS-PAGE显示获得了约100 kDa的特异性蛋白条带;目测及OD600的测定结果表明重组菌的耐盐性明显高于对照菌,即PhTPS基因的表达提高了重组菌的耐盐性。为利用PhTPS基因进行作物耐盐等抗逆转基因改良提供了依据。
- 邓淑贞王斌高磊牛倩雅刘涛翁曼丽郭宝太
- 关键词：坛紫菜原核表达重组菌
