国家教育部博士点基金(20111301130001)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：李正平王愈聪高金鹏王志彬张学晶更多>>
- 相关机构：陕西师范大学河北大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于荧光偏振的高灵敏度蛋白激酶活性分析被引量：2
- 2013年
- 利用TiO2纳米棒与磷酸化肽的特异性相互作用,基于荧光偏振检测,建立了快速、简便的高灵敏度蛋白激酶活性分析方法.在蛋白激酶催化作用下,荧光标记的肽底物被磷酸化,磷酸化的荧光肽通过磷酸基团特异性结合在TiO2纳米棒表面,从而使底物肽上标记的荧光分子的旋转速率发生改变,通过对荧光偏振度进行测量,可实现蛋白激酶活性的定量检测,该方法对蛋白激酶A(PKA)的检出限可达0.0004 UμL-1.此外,该方法还成功用于PKA抑制剂H-89的检测,在基于蛋白激酶抑制剂的靶向药物筛选方面具有很好的应用前景.
- 王志彬张学晶王愈聪高金鹏李正平
- 关键词：荧光偏振蛋白激酶A磷酸化抑制剂筛选
- 利用模拟酶催化显色和等温核酸扩增反应检测特定序列DNA被引量：1
- 2014年
- 基于血红素（Hemin）与G-四联体（G4）所形成模拟酶的催化作用,结合等温指数扩增反应（IEX-PAR）,建立了特定序列DNA的显色检测方法.目标DNA引发IEXPAR,通过设计模板序列,IEXPAR产生大量富含鸟嘌呤的单链DNA,在K＋存在时,该单链DNA可形成G4结构,G4可以与Hemin结合形成具有过氧化物酶活性的模拟酶（Hemin-G4）,Hemin-G4催化H2 O2氧化2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）,使体系颜色发生变化,反应产物最大吸收波长为421 nm.对显色反应体系中的实验参数进行了优化,包括Hemin浓度、ABTS浓度、H2 O2浓度、IEXPAR时间和显色反应时间.在最佳条件下,所建立的体系可以简便、快速检测0.1 ～ 10 nmol/L的目标DNA分子,且本方法能够很好地区分单个碱基的差别,具有良好的特异性.
- 汤薇王辉王洪红李正平
