国家自然科学基金(3087299331070137)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：陕西师范大学更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 携带三种报告基因慢病毒载体的构建及其实验研究被引量：1
- 2011年
- 慢病毒是逆转录病毒科的一个属。它具有可以感染分裂期及非分裂期细胞、容纳外源性目的基因片段大、目的基因表达时间较长、免疫反应小等诸多优点,因此成为运载目的基因的理想载体而得到广泛的应用。构建了带有3种报告基因即红色荧光蛋白(mCherry)、荧光素酶基因(luciferase)及绿色荧光蛋白(eGFP)的慢病毒载体,其中mCherry及eGFP由于其成像的直观性特点便于用于体外细胞株的筛选,而luciferase由于其敏感性高,则可以用于灵敏检测动物体内肿瘤模型的生长及转移情况。选择了一种恶性程度较高的脑胶质瘤母细胞U87MG(malignantglioblastoma)作为研究对象,体外成功构建了表达3种报告基因的细胞株并建立了裸鼠体内肿瘤模型,为该肿瘤疾病动物体内的实验治疗效果评估及肿瘤转移的检测奠定了基础;同时也为携带报告基因的其它肿瘤细胞系及其肿瘤模型的建立提供了方便的载体工具。
- 王丽娴王东阳李星夏海滨
- 关键词：慢病毒载体报告基因脑胶质瘤动物模型
- 红色荧光蛋白遗传标记腺病毒衣壳蛋白pⅨ的实验研究被引量：1
- 2011年
- 采用在细菌Bj5183中同源重组的方法成功构建了红色荧光蛋白mCherry标记pⅨ蛋白的腺病毒质粒载体.将PacⅠ线性化的腺病毒质粒载体转染HEK293细胞7～10d后获得病毒裂解液,然后将其在体外进一步扩增并经CsCl密度梯度离心纯化后获得mCherry标记腺病毒pⅨ蛋白的病毒颗粒.在采用荧光显微镜检测荧光标记的病毒颗粒之后,将其加入A549细胞中,并在不同时间点追踪观察荧光标记的病毒颗粒在细胞内的定位.结果表明,在荧光显微镜下观察到病毒颗粒的红色荧光;在病毒与细胞孵育过程中,随着荧光标记病毒与A549细胞孵育时间的延长,病毒颗粒逐渐向细胞核周围聚集.
- 赵俊丽王东阳南天惠王丽娴廖晓玉夏海滨
- 关键词：基因治疗腺病毒
