浙江省自然科学基金(M303042)
- 作品数：10 被引量：126H指数：7
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- 葛根素对去卵巢小鼠学习记忆和突触结构的影响被引量：4
- 2008年
- 目的研究葛根素对雌激素剥夺小鼠学习记忆和突触结构的影响。方法卵巢摘除(Ovx)或假手术(Sham)后一周,雌性小鼠给予4周的葛根素(Pur,40,120mg·kg-1,ip)或苯甲酸雌二醇(EB,4μg·d-1,sc)治疗。分别用Morri′s水迷宫和穿梭箱检测小鼠的空间记忆和主动回避行为;通过制备超薄切片电镜观测学习记忆相关脑区海马CA1和前皮层的突触超微结构变化。结果Ovx小鼠经120mg·kg-1Pur治疗后,在水迷宫中搜寻平台的平均路径显著缩短(P<0.05),主动逃避电击的次数明显增多(P<0.01)。同时,葛根素增加Ovx小鼠海马和前皮层的突触后密度(PSD)厚度,并减小突触间隙宽度,但对突触界面曲度、突触活性带长度没有明显作用。结论长期Pur治疗可通过影响海马和前皮层突触结构改善雌激素剥夺小鼠的记忆损伤。
- 徐晓虹
- 关键词：葛根素雌激素卵巢摘除学习记忆
- 丰富环境对脑缺血大鼠突触界面结构修饰和PSD-95基因表达的影响被引量：10
- 2008年
- 探讨丰富环境干预对局部脑缺血大鼠突触界面结构修饰和突触后致密物-95(postsynaptic density-95,PSD-95)mRNA表达的影响。栓塞健康雄性Sprague-Dawley大鼠的右侧大脑中动脉,建立脑中动脉栓塞(mid-dle cerebral artery occlusion,MCAO)模型后,分为丰富环境缺血组(IE)、标准环境缺血组(IS),同时分别设丰富环境假手术组(SE)、标准环境假手术组(SS)。以Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,应用透射电镜、图像分析和细胞形态计量学技术,观察海马CA1区和额叶皮层突触界面结构变化,采用RT-PCR检测突触后脚手架蛋白PSD-95 mRNA的表达。结果表明:丰富环境干预能有效改善脑缺血导致的空间学习记忆能力下降,并对正常大鼠的空间学习记忆能力也有改善作用。同时,丰富环境干预能抑制局部脑缺血导致的突触数密度减少,该作用对额叶皮层特别明显;丰富环境干预不同程度地逆转脑缺血造成的突触界面参数变化,特别使突触间隙宽度显著减小、PSD厚度明显增加;并有效抑制因脑缺血诱导的PSD-95 mRNA表达下调。以上结果提示,丰富环境改善脑缺血大鼠的空间学习记忆能力可能与其促进缺血区边缘组织突触界面结构修饰,提高PSD-95 mRNA表达有关。
- 叶灵静徐晓虹王亚民张婧傅吉强钟浦峰朱艇
- 关键词：丰富环境PSD-95MRNA
- 灯盏花素对谷氨酸诱导大鼠海马神经细胞毒性的保护作用被引量：14
- 2007年
- 选用培养的海马神经细胞研究灯盏花素(breviscapine,Bre)对谷氨酸(glutamate,Glu)诱导神经细胞毒性的保护作用及其机制。新生大鼠海马神经细胞体外培养8 d后,用L-谷氨酸(0.1,0.5及1.0 mmol.L-1)处理30min;灯盏花素处理组在加入L-谷氨酸的同时给予不同剂量的灯盏花素(10,20及40μmol.L-1);继续正常培养24h后,用Annexin V联合流式细胞仪检测细胞的凋亡和坏死率;RT-PCR分析凋亡蛋白抑制剂XIAP mRNA的表达。结果表明,L-谷氨酸浓度依赖性地诱导神经细胞发生凋亡和坏死,并使细胞XIAP mRNA表达发生浓度依赖性的双向变化:0.1 mmol.L-1L-谷氨酸使神经细胞XIAP mRNA表达增强,而较高浓度使XIAP mRNA表达下调。灯盏花素(20和40μmol.L-1)可有效抑制谷氨酸诱导的神经细胞死亡,分别使细胞凋亡率下降30.4%和40.1%,坏死率下降32.5%和38.8%;并上调XIAP mRNA表达45.1%和54.9%。激光共聚焦显微技术联合Fluo-3荧光标记检测表明,L-谷氨酸处理过程中海马神经细胞内Ca2+水平显著升高,而灯盏花素可抑制谷氨酸引起的细胞内Ca2+超载(P<0.01)。以上结果提示,灯盏花素可能通过抑制细胞Ca2+超载,调节凋亡抑制因子XIAP的表达而有效保护谷氨酸对神经细胞的兴奋性毒性作用。
- 徐晓虹陈瑜郑筱祥
- 关键词：灯盏花素谷氨酸CA^2+
- 葛根素对雌激素剥夺小鼠学习记忆行为的影响被引量：11
- 2005年
- 目的研究葛根素对雌激素剥夺小鼠学习记忆功能的影响。方法卵巢摘除(Ovx)或假手术(sham)后一周,雌性小鼠给予4周的葛根素(Pur,50,100 mg·kg-1,ip)或苯甲酸雌二醇(EB,1,5 μg·d-1,ip)治疗。分别用Y-迷宫和水迷宫检测小鼠的分辨学习记忆和空间记忆行为:高效液相色谱分析大脑前皮层和海马组织的谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量。结果Ovx小鼠经50或100 mg·kg-1Pur治疗后,在Y-迷宫达到学会标准所需训练次数分别下降11.8%和17.8%(P>0.05和P<0.05),记忆保持率分别提高23.3%和28.3%(P<0.05)。因Ovx而延长的水迷宫平台搜寻潜伏期缩短15.5%和23.8% (P<0.05)。同时,100 mg·kg-1Pur使Ovx小鼠海马组织的Glu和GABA水平恢复正常,Glu从Ovx小鼠的(24.1±4.5)mg·g (pro)-1回升到(27.9±3.5)mg·g(pro)-1(P<0.05),而GABA则从(5.64±1.06)mg·g(pro)-1回调到(4.73±0.85)mg·g(pro)-1 (P<0.05)。结论长期Pur治疗可通过影响海马谷氨酸能和GABA能递质系统改善雌激素剥夺引起的记忆损伤,该作用可能与Pur的植物雌激素样活性有关。
- 徐晓虹张洁净姜科声
- 关键词：葛根素雌激素卵巢摘除学习记忆氨基酸递质
- 灯盏花素对缺血性记忆障碍和血脑屏障的保护作用被引量：21
- 2008年
- 采用行为观察和生化检测相结合的方法,研究了灯盏花素对小鼠缺血性记忆障碍和血脑屏障的保护作用.结果表明:前脑重复缺血再灌注使小鼠的学习记忆能力显著下降(P<0.01),同时伴随脑内髓过氧化物酶(MPO)活性上升(P<0.01)、脑组织伊文思蓝(EB)及水含量升高(P<0.01).灯盏花素治疗可提高缺血小鼠的学习记忆能力,并使脑组织EB含量下降(P<0.05和P<0.01)、水含量减少(P<0.05),使血脑屏障损伤程度有所减轻;同时,伴随MPO活性的下降(P<0.05和P<0.01),炎症反应减弱.提示灯盏花素能减轻缺血再灌注引起的脑损伤,改善小鼠的学习记忆能力.该作用可能与灯盏花素提高脑组织抗血脑屏障损伤和抗炎症反应能力有关.
- 尹明华徐晓虹
- 关键词：灯盏花素脑缺血再灌注学习记忆血脑屏障
- 葛根素对脑缺血再灌注损伤大鼠纹状体氨基酸水平的影响被引量：5
- 2008年
- 目的研究葛根素对脑缺血再灌注损伤大鼠纹状体氨基酸水平的影响。方法大脑中动脉栓塞(MCAO)60min建立大鼠局部脑缺血模型。给药组在缺血前30min和再灌注开始时分别腹腔注射Pur(50,100mg·kg-1,ip)。用脑微透析仪收集缺血前后和再灌注过程纹状体的细胞外液,高效液相色谱分析其兴奋性和抑制性氨基酸水平;缺血再灌注24h取脑用TTC染色法测算脑梗死体积和水肿率。用流式细胞仪结合Annexin-V荧光标记法检测Pur(40,100μmol·L-1)对体外培养海马神经细胞谷氨酸(0.5mmol·L-1)诱导细胞凋亡的保护作用。结果缺血开始后,纹状体的天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)和牛磺酸(Tau)水平快速升高,最高时分别达缺血前的8.92,14.15,9.07和4.84倍。再灌注开始后,氨基酸水平迅速下降,120min后接近正常。100mg·kg-1Pur在减小脑梗死体积和脑水肿的同时,显著降低脑缺血过程纹状体氨基酸水平,其最高值分别比缺血组降低35.7%(Asp)、43.2%(Glu)、28.5%(GABA)和31.8%(Tau)(P<0.01);Glu/GABA比值明显低于缺血大鼠。流式细胞检测结果显示,100μmol·L-1Pur明显抑制谷氨酸兴奋毒作用,分别使海马神经细胞的凋亡率和坏死率降低33.1%和35%(P<0.01)。结论Pur可有效抑制脑缺血诱导的细胞外氨基酸水平升高和谷氨酸兴奋毒作用,该机制可能与Pur的抗脑缺血作用有关。
- 徐晓虹郑筱祥李惠
- 关键词：葛根素脑缺血脑微透析氨基酸递质
- 葛根素对氧糖剥夺大鼠海马神经细胞Ca^(2+)和NO的影响被引量：6
- 2008年
- 目的研究葛根素(puerarin,Pur)对缺氧缺糖状态下海马神经细胞内Ca2+和NO水平的影响。方法选用新生大鼠体外培养8 d的海马神经细胞,进行3 h的氧糖剥夺(oxygen/glucose deprivation,OGD)或30 min的L-谷氨酸(0.5mmol·L-1)处理后再正常培养24 h,Pur处理组在OGD或谷氨酸处理的同时和以后24 h给予不同剂量(40,100μmol·L-1)Pur,Annexin V联合流式细胞仪检测细胞的凋亡率和坏死率;以Fluo-3或DAF-2为荧光标记,用激光共聚焦显微镜观测30 min的OGD过程中海马神经细胞Ca2+和NO的动态变化以及Pur的影响。结果OGD诱导海马神经细胞Ca2+和NO水平快速升高,其最高值分别达正常对照组的2.9和1.9倍;Pur明显减缓OGD期间神经细胞Ca2+内流和NO合成,与OGD组相比,40和100μmol·L-1的Pur分别使细胞Ca2+峰值降低29.2%和37.1%(P<0.05和P<0.01),NO峰值降低23%和33%(P<0.05和P<0.01),显著抑制细胞内Ca2+和NO水平的升高;同时Pur可有效抑制OGD和谷氨酸引起的神经细胞死亡。结论Pur可通过抑制神经细胞谷氨酸/Ca2+/NO通路的活动而有效保护缺氧缺糖对神经细胞的损伤作用。
- 徐晓虹郑筱祥
- 关键词：葛根素海马神经细胞缺氧缺糖CA^2+
- 灯盏花素对缺血再灌注小鼠脑细胞凋亡的保护作用被引量：36
- 2008年
- 目的探讨灯盏花素对脑缺血再灌注诱导细胞凋亡损伤的保护机制。方法小鼠采用双侧颈总动脉结扎法建立重复全脑缺血再灌注模型。术后24或48h,制备石蜡切片(HE染色)检测脑组织海马CA1区锥体细胞形态学变化;用紫外分光光度计检测脑组织一氧化氮合成酶(NOS)活性;用琼脂糖凝胶电泳技术检测DNA损伤情况,同时用RT-PCR技术检测缺血再灌注过程中小鼠海马CA1区凋亡蛋白抑制剂XIAP(X-chromosome linked inhibitor of apoptosis protein)mRNA的表达。结果全脑重复缺血再灌注可以使海马CA1区幸存的锥体细胞数量减少(P<0.01),提高NOS活性,并增加DNA片段化程度,同时伴随着XIAPmRNA表达显著下调(P<0.01)。5,20和80mg.kg-1灯盏花素能剂量依赖性减少缺血小鼠海马CA1区神经细胞的死亡(P<0.05,P<0.01),降低NOS(P<0.01)活性,并抑制DNA片段化的产生以及XIAP mRNA表达的下调(P<0.05,P<0.01)。结论灯盏花素可通过抑制神经细胞凋亡而减轻缺血再灌注引起的脑损伤。
- 尹明华徐晓虹李怡佳
- 关键词：灯盏花素脑缺血再灌注细胞凋亡
- 葛根素对脑缺血诱导神经细胞凋亡的保护作用被引量：21
- 2006年
- 目的探讨葛根素(puerarin,Pur)对脑缺血诱导神经细胞凋亡和凋亡蛋白抑制剂XIAP表达的影响。方法SD大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)的同时ip50,100mg.kg-1Pur,MCAO50min后再灌注24h,用TTC染色法、Annexin-V和PI双荧光标记结合流式细胞检测法、半定量RT-PCR等技术分别检测大鼠脑水肿、梗死体积、细胞凋亡和坏死率、caspase-3活性、XIAPmRNA表达。结果Pur(100mg.kg-1)明显缓解缺血引起的脑水肿和神经行为障碍(P<0.05);减少脑梗死体积,以皮层尤其显著(P<0.01)。Pur(100mg.kg-1)还显著降低背外侧皮层的细胞凋亡和坏死率,抑制caspase-3活性,逆转缺血诱导的XIAPmRNA表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论Pur通过调节神经细胞XIAPmRNA表达,抑制细胞凋亡而保护缺血性脑损伤。
- 徐晓虹陈瑜郑筱祥
- 关键词：葛根素脑缺血细胞凋亡CASPASE-3活性XIAP基因
- 灯盏花素对缺血再灌注诱导小鼠学习记忆损伤的保护作用被引量：24
- 2007年
- 目的探讨灯盏花素对脑缺血再灌注诱导小鼠学习记忆损伤的保护机制。方法双侧颈总动脉结扎法建立重复前脑缺血再灌注模型。小鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物对照组(银杏叶提取物,35mg.kg-1,ip)和灯盏花素治疗组(80,20,5mg.kg-1,ip)。小鼠适应3d后,灯盏花素治疗组和阳性药物对照组分别腹腔注射灯盏花素和银杏叶提取物,连续给药7d。模型组和对照组在相同时间点注射等量生理盐水。第7天给药30min后,用1.275g.kg-1乌拉坦腹腔注射麻醉小鼠,重复缺血再灌注手术。术后第2天用开场行为模型检测小鼠在新异环境中的自发行为;第3天用水迷宫检测小鼠学习记忆能力;用紫外分光光度计检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;同时检测灯盏花素对H2O2引起红细胞溶血的影响。结果前脑重复缺血再灌注并没有明显影响小鼠在新异环境中的自发活动和探究行为,但使小鼠的学习记忆能力显著下降,同时伴随脑内SOD活性降低和MDA含量升高。5,20和80mg.kg-1灯盏花素及银杏提取物能显著提高缺血小鼠学习记忆能力(P<0.05,P<0.01),并提高脑组织SOD活性(P<0.01),使MDA含量明显下降(P<0.05,P<0.01);体外实验表明,0.015g.L-1以上剂量的灯盏花素能明显降低H2O2引起的红细胞溶血率(P<0.05,P<0.01),且呈剂量依赖关系。结论灯盏花素能减轻缺血再灌注引起的脑损伤,改善小鼠学习记忆能力,该作用可能与其提高脑组织抗氧化能力有关。
- 尹明华徐晓虹姜科声
- 关键词：灯盏花素脑缺血再灌注学习记忆抗氧化
