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真核表达载体pcDNA3-CTLA4lg的构建及体内表达: 2009年; 背景:CTLA-4lg的制备过程比较复杂,单克隆抗体的价格比较昂贵,而且应用CTLA-4lg单克隆抗体注射本身存在着血浆药物浓度不稳定的问题。目的:探讨Ctla4lg表达质粒构建的可行性。设计、时间及地点:基因水平观察实验,于2005/2006在中国医科大学中心实验室完成。材料:雄性Wistar大鼠10只,近交系昆明小鼠10只。方法:提取Wistar大鼠总RNA,反转录成cDNA第1链,PCR扩增CTLA4基因,将其和真核表达载体pcDNA3酶切、连接。转化感受态菌DH5α,培养后挑取阳性克隆、提取质粒,酶切鉴定重组子、测序,最后转染近交系昆明小鼠,应用Westen Blot法检测血清CTLA4lg水平。主要观察指标:构建的Ctla4lg表达质粒基因序是否正确以及能否在小鼠体内进行蛋白表达。结果:对含有pcDNA3-CTLA4质粒的LB菌液进行鉴定测序,目的基因片断大小为288bp,与Genebank上公布的CTLA4序列完全一致,质粒构建正确。利用阳性脂质体载体包被pcDNA3-CTLA4lg转染小鼠,有3只在第7天血清检测CTLA4Ig阳性,显示pcDNA3-CTLA4lg能够在鼠肌细胞内表达。结论:利用基因合成和重组技术成功构建了真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig,利用脂质体法成功的将pcDNA3-CTLA4lg转染到鼠肌细胞内并进行表达。; 赵国华许国岩; 关键词：真核表达共刺激信号

胃癌组织中T细胞及其亚群ICOS分子的表达及其意义: 2010年; 目的探讨胃癌组织中T细胞共刺激分子ICOS及其亚群的表达及意义。方法应用流式细胞术检测38例胃癌和21例健康人(对照组)外周血T细胞亚群及其共刺激分子ICOS的表达。结果胃癌组与对照组比较:CD3+T细胞表达(53.61±13.84)/(72.07±7.83)%,P<0.01;CD3+CD4+T细胞表达(29.84±9.71)/(38.79±5.08)%,P<0.01;CD3+ICOS+T细胞表达(25.80±10.56)/(0.82±0.98)%,P<0.01;CD3+CD8+ICOS+T细胞表达(1.57±1.99)/(0.02±0.04)%,P<0.01;CD3+CD8+ICOS-T细胞表达(16.06±6.94)/(20.56±6.54)%,P<0.05。胃癌组患者手术前和手术后1周外周血T细胞亚群的差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌患者T细胞数量明显减少,T细胞共刺激分子ICOS表达增高,CD4+T细胞显著减少。; 李天威许国岩赵国华; 关键词：胃癌 T细胞亚群

全胃切除术后三种消化道重建术式对患者生活质量的影响被引量：23: 2009年; 目的:探讨全胃切除术后三种消化道重建术式对患者术后生活质量的影响。方法:对2003年1月～2007年6月我院施行全胃切除术的218例患者的临床资料进行回顾性分析。全胃切除后消化道重建分别为常规端侧食管空肠Roux-en-Y吻合术78例(A组)、P型空肠袢食管空肠Roux-en-Y吻合术96例(B组)和改良空肠间置代胃吻合术(FJI法)44例(C组)。记录患者一般情况及术后12个月的营养状况和胃肠道症状(GSRS)评分等。结果:术后12个月,B组与A组比较,进食量明显增加(P<0.05),而GSRS评分明显降低(P<0.05);C组与A组比较,进食量亦明显增加(P<0.05),GSRS评分则明显降低(P<0.05)。术后12个月,B组与C组体重恢复较A组更佳(P<0.05),且C组患者的进食量又优于B组,B、C两组体重恢复比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:P型空肠袢和改良空肠间置代胃吻合术均有利于维持患者术后生活质量。在每天进食量及体重恢复方面,改良空肠间置代胃吻合术更优于P型空肠袢食管空肠Roux-en-Y吻合术。; 赵国华许国岩赵宜良; 关键词：胃癌全胃切除术消化道重建生活质量

全胃切除术后两种消化道重建术式的比较被引量：1: 2009年; 目的探讨全胃切除术后两种消化道重建术式手术操作时间、病人术后生活质量的影响。方法对2003年1月-2007年6月我院施行全胃切除术的218例病人的临床资料进行回顾性分析。全胃切除后消化道重建分别采用P型空肠袢食管空肠Roux—en—Y吻合术（PR法）（A组，96例）和改良空肠间置代胃吻合术（FJI法）（B组，44例）。记录术中消化道重建时间、术后12个月营养状况和胃肠道症状（GSRS）评分等。结果消化道重建术所需时间两组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。术后12个月B组与A组比较，进食量明显增加（P〈0．05），而GSRS评分降低（P〈0．05）。术后12个月B组体重恢复较A组更佳，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论改良空肠间置代胃吻合术有利于维持病人术后生活质量，在每天进食量及体重恢复方面改良空肠间置代胃吻合术优于P型空肠袢食管空肠Rottx—en—Y吻合术。; 赵国华王晶赵宜良; 关键词：全胃切除术消化道重建手术操作时间

胃癌组织中T细胞亚群及其ICOS分子的表达及意义: 2009年; 目的探讨胃癌组织中T细胞共刺激分子ICOS及其亚群的表达及意义。方法应用流式细胞术检测38例胃癌和21例健康人（对照组）外周血T细胞亚群及其共刺激分子ICOS的表达。结果胃癌组与对照组比较：CD3^＋T细胞表达（53．61±13．84）％和（72.07±7．83）％，P〈0．01；CD3^＋CD4^＋T细胞表达（29．84±9．71）％和（38．79±5．08）％，P〈0．01；CD3^＋ICOS^＋T细胞表达（25．80±10．56）％和（O．82±0．98）％，P〈0．01；CD3^＋CD8^＋ICOS^＋T细胞表达（1.57±1．99）％和（0．02±0．04）％，P〈0．01；CD3^＋CD8^＋ICOS^-T细胞表达（16．06±6．94）％和（20．56±6．54）％，P〈0．05。胃癌组患者手术前和手术后1周外周血T细胞亚群的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论胃癌患者T细胞数量明显减少，T细胞共刺激分子ICOS表达增高，CIM’T细胞显著减少。; 刘阳武彦赵国华; 关键词：胃癌 ICOS T细胞亚群

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辽宁省科技厅博士启动基金(20071028)