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广东省自然科学基金(7300931)

作品数:6 被引量:11H指数:3
相关作者:桂耀庭蔡志明郭新秦洁唐爱发更多>>
相关机构:北京大学深圳医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生

主题

  • 5篇细胞
  • 5篇基因
  • 4篇胚胎
  • 4篇胚胎干细胞
  • 4篇干细胞
  • 3篇生殖
  • 3篇生殖细胞
  • 2篇原始生殖细胞
  • 2篇人胚
  • 2篇人胚胎
  • 2篇人胚胎干细胞
  • 2篇拟胚体
  • 2篇小鼠
  • 2篇基因表达
  • 2篇分化
  • 1篇蛋白
  • 1篇新基因
  • 1篇性基因
  • 1篇荧光
  • 1篇鼠胚

机构

  • 5篇北京大学深圳...

作者

  • 5篇桂耀庭
  • 4篇秦洁
  • 4篇郭新
  • 4篇蔡志明
  • 3篇唐爱发
  • 2篇余振东
  • 2篇张键荣
  • 1篇漆正宇
  • 1篇石敏
  • 1篇张晓燕
  • 1篇刁美玲
  • 1篇余州
  • 1篇崔光辉
  • 1篇王勇

传媒

  • 2篇解剖学报
  • 1篇中华男科学杂...
  • 1篇解剖学杂志
  • 1篇中国男科学杂...
  • 1篇Journa...

年份

  • 3篇2009
  • 3篇2008
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
不同基质蛋白对小鼠胚胎干细胞生殖细胞分化相关基因表达的影响被引量:3
2009年
目的:探讨不同基质蛋白对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)分化形成拟胚体(embry-oid bodies,EBs)后生殖细胞分化相关基因表达的影响及机制。方法:mESCs分化形成EBs 3 d后接种于不同基质蛋白包被的培养皿中,包括人工基底膜(matrigel,M组)、纤维连接蛋白(fibronectin,F组)、层粘蛋白(laminin,L组)、胶原(collagen,C组)和非生物活性底物琼脂糖(agarose,A组),同时设不加任何基质蛋白的空白对照组(B组)。RT-PCR检测EBs在不同基质蛋白上d1~d4期间生殖细胞分化相关基因的表达,以及mESCs内源性基质蛋白FN(fibronectin)、LN(laminin)以及整合素受体β1基因的表达。结果:L组和F组EBs易贴壁分化,RT-PCR结果也证实原始生殖细胞(PGCs)分化基因Blimp-1、Stella、Mvh和减数分裂启动基因Stra8在L组和F组表达总体趋势为逐渐增强;M组和C组的表达趋势不明显;A组基因表达水平整体偏低;空白对照B组基因表达水平整体偏高但均呈下降趋势。L组和空白对照组细胞表达内源性基质蛋白FN、LN以及整合素受体β1。结论:层粘蛋白/β1信号途径可能对mESCs向PGCs分化具有指导作用,外源性层粘蛋白可能通过其受体β1亚单位传递诱导信号,调节mESCs来源的EBs向PGCs分化,FN可能通过其他整合素受体亚单位发挥作用。无任何外源性基质蛋白时,自身分泌的内源性基质蛋白也促进细胞分化。
郭新漆正宇秦洁崔光辉桂耀庭蔡志明
关键词:基质蛋白小鼠胚胎干细胞拟胚体原始生殖细胞
Expression Profile of a Novel Germ Cell-specific Gene,TSCPA,in Mice and Human
2009年
In order to identify novel genes involved in spermatogenesis,testis cDNA samples from Balb/C mice of different postnatal days were hybridized with the whole mouse genome Affymetrix chip to screen the testisspecific genes.The characteristics of the selected genes were analyzed by RT-PCR as well as other bioinformatic tools.A novel differentially expressed testis-specific gene(GenBank Acces-sion No:NM_029042) in the developmental stages of testes was identified,and named TSCPA.Cellular mapping prediction of TSCPA indicated that its protein was probably expressed in nuclei,and one putative domain(aa 332-377) was anchoring domain of cAMP-dependent type Ⅱ PK.The result of subcel-lular localization of GFP-TSCPA fusion protein in Cos-7 cells showed that TSCPA protein was expressed in nuclei.RT-PCR analysis revealed that TSCPA was expressed specifically in mouse and human testis.TSCPA gene was expressed weakly in 21-day-old mouse testis and the expression was increased gradually from 38th day to 6th month of mouse testes.No expression of hTSCPA was found in cryptorchidism and Sertoli-cellonly syndrome patients.It was concluded that the expression profile of TSCPA in human and mice indicated that TSCPA might play an important role in spermatogenesis.
余振东吴波唐爱发陈静郭新秦洁桂耀庭蔡志明
关键词:小鼠睾丸生殖细胞新基因表达谱精子发生过程特异性基因
人胚胎干细胞表达生殖细胞分化相关基因的研究被引量:2
2008年
目的探讨人胚胎干细胞(hES)系H1生殖细胞分化相关基因的表达。方法免疫荧光、碱性磷酸酶检测和核型分析等方法联合鉴定H1的基本生物学特性,RT-PCR方法检测未分化H1的生殖细胞分化相关基因的基本表达模式,分别以人正常睾丸组织和人胚胎成纤维细胞株HFF-1作为阳性和阴性对照组织。结果H1保持正常核型并维持未分化状态。未分化H1表达减数分裂前生殖细胞标志基因STELLAR、DAZL、FRAGILIS、PUM1、PUM2和GDF3;不表达原始生殖细胞(PGCs)标志基因BLIMP-1、减数分裂特异标志基因SCP1、减数分裂启动标志基因STRA8以及生殖细胞分化后期标志基因VASA。结论未分化H1细胞表达生殖细胞减数分裂前标志基因,但不表达分化后期基因,BLIMP-1可能成为区分未分化hES细胞与PGCs的特异性标志基因。
郭新秦洁唐爱发余振东桂耀庭蔡志明
关键词:胚胎干细胞原始生殖细胞分化基因免疫荧光
体外分化过程中小鼠拟胚体的细胞学特征及基因表达模式被引量:3
2008年
目的探讨小鼠胚胎干细胞来源的拟胚体(EBs)形成以及分化发育90d过程中的形态学特征及基因表达模式。方法将小鼠胚胎干细胞通过悬浮培养获得EBs,EBs在不添加其他诱导因子的体系中连续悬浮培养,采用形态学观察、免疫组织化学染色和RT-PCR检测EBs培养过程中的细胞发育分化特征和基因表达模式。结果将胚胎干细胞转移到去除白血病抑制因子(LIF)的悬浮培养液中培养24h左右即可形成EBs;培养3d左右,部分EBs出现简单胚体结构;在EBs分化7d左右,逐步向空腔化胚体发育;培养9d左右,EBs可发育为原始的囊性胚体结构;培养11d左右,EBs形成典型的、结构完整的三胚层结构。HE染色结果显示,发育早期的EBs包含大量尚未完全分化的ES细胞,随着培养时间的延长,EBs向空腔化、囊性胚体发育,逐渐形成类似于早期组织的形态。悬浮培养7周左右,EBs的发育分化基本停止。免疫组织化学染色结果表明,中胚层心肌细胞特异性标志蛋白cTnT,外胚层特异性标志蛋白Nestin在15d的EBs中表达呈阳性。RT-PCR检测也显示形成的EBs表达外胚层特征性基因Vimentin、Nestin,中胚层特征性基因Flk-1、Gata-1和内胚层特征性基因Transthyretin、-αfetoprotein。结论小鼠胚胎干细胞来源的EBs具有分化为3个胚层的能力,EBs形成的三维结构能够有效的启动细胞的分化;EBs来源的三胚层细胞的发育分化时序和特征,将为鉴定胚胎干细胞来源的分化细胞提供重要参照。
秦洁郭新张键荣桂耀庭蔡志明
关键词:胚胎干细胞拟胚体分化小鼠
CatSper基因家族在人和小鼠组织中的表达特征被引量:3
2009年
目的研究CatSper基因家族在人和小鼠组织中的分布特点。方法将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA与Affymetrix全基因组芯片探针进行杂交,筛选出差异表达基因CatSper基因家族。RT-PCR验证差异表达基因在不同发育阶段的小鼠睾丸组织的表达特征,及其在人和小鼠不同组织中的分布。结果基因芯片分析发现CatSper1、CatSper2和CatSper3在小鼠睾丸的表达呈阶段特异性。RT-PCR结果表明该基因家族在睾丸的表达丰度明显高于其它组织;CatSper1和CatSper4在人体睾丸组织中特异性表达。结论CatSper基因家族在人和小鼠中呈现睾丸特异性表达或高表达,可能在精子发生中发挥重要功能。
余州张晓燕刁美玲王勇唐爱发桂耀庭
关键词:基因芯片小鼠
人胚胎干细胞H1培养条件的优化被引量:1
2008年
目的:采用不同培养基和饲养层培养人胚胎干细胞H1,建立适合H1细胞增殖的最佳条件并分析其基本生物学特性。方法:鼠源性饲养层采用ICR品系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),人源性饲养层采用人胚胎成纤维细胞系(HFF-1)。H1基本培养基配制分别采用传统DMEM/F12和改良培养基Knock-outTM DMEM。实验共分为MEF+DMEM/F12、MEF+K-DMEM、HFF+DMEM/F12、HFF+K-DMEM组。H1基本生物学特性检测采用免疫荧光、RT-PCR、碱性磷酸酶和核型分析。结果:MEF+DMEM/F12组中H1克隆形态规则,不发生分化,增殖速度快;而MEF+K-DMEM组细胞克隆传代后第4日发生分化;HFF+DMEM/F12组和HFF+K-DMEM组细胞传代后第3日就显示出分化趋势,克隆变扁。MEF+DMEM/F12组中H1细胞保持正常核型和基本生物学特性。结论:不同的人胚胎干细胞系最佳培养条件是不同的,建立的MEF+DMEM/F12组培养条件最适合H1细胞增殖。
郭新秦洁张键荣唐爱发余振东石敏桂耀庭蔡志明
关键词:人胚胎干细胞细胞培养
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