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通过转重复结构的ACC氧化酶基因延长香石竹的瓶插期被引量：10: 2004年; 以香石竹叶片为外植体,用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法,在选择分化培养基中培养后,将香石竹重复结构的ACC氧化酶(ACO)基因核DNA导入香石竹‘Mabel’品种,经Southern杂交检测,证明外源基因已整合到香石竹基因组,共获得3株转化植株。转基因植株在隔离条件下栽培时正常开花,转基因T257株系切花衰老过程中乙烯释放量较对照低95％,没有乙烯跃变峰出现,在25℃条件下比较瓶插期,有2个转化株系瓶插期显著延长,最长比对照长了5 d以上。; 余义勋包满珠; 关键词：香石竹瓶插期乙烯基因沉默

不同结构的外源ACO基因导入香石竹对瓶插寿命的影响被引量：23: 2004年; 以香石竹叶片为外植体 ,利用根癌农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)介导法 ,将香石竹ACC氧化酶 (ACO)基因核DNA的正义 (sense)、反义 (antisense)、正义重复 (sensedirectrepeat)和反义重复 (antisensedirectrepeat)等 4种T DNA结构导入香石竹‘Master’品种。经Southern杂交检测证明目的基因已整合到香石竹基因组 ,共获得 14个转化株系。在 2 5℃条件下比较瓶插寿命 ,对照植株花朵瓶插寿命为 5 8d ,多数转化株系花朵瓶插寿命达 11d ,最长者可达 12 8d。大多数转基因株系切花衰老过程中乙烯释放量显著减少 ,部分转基因株系切花衰老过程中几乎检测不到乙烯 ,而对照有明显的峰值。通过对本研究转化ACO基因核DNA与前人转化ACO基因cDNA延长瓶插寿命比较以及对不同T DNA结构的转化抑制内源基因表达的程度进行比较后 ,初步判断用核DNA转化后对内源基因的抑制效果与cDNA相当甚至更明显 ,反义基因可以比正义基因更有效地抑制内源的同源基因的表达。; 余义勋包满珠; 关键词：香石竹 ACC氧化酶基因基因沉默瓶插寿命

香石竹植株再生及基因工程研究进展被引量：13: 2006年; 本文对香石竹的再生体系、遗传转化体系及其分子育种现状作了较为系统的总结。香石竹的再生体系多以器官直接再生不定芽为主,而通过愈伤组织和体细胞胚途径再生报道较少。用农杆菌介导法和基因枪法均可建立香石竹遗传转化体系,但近年来的研究显示农杆菌介导法应用普遍且比较稳定。近年来以延长香石竹瓶插寿命为目标的分子育种研究已取得较大进展,对其色、香和形等其他重要性状的分子育种也已经起步,而有关香石竹抗性的分子育种有待进一步开拓。; 余义勋刘娟旭包满珠; 关键词：香石竹植株再生

香石竹ACC氧化酶重复基因植物表达载体的构建及转基因植株的获得被引量：10: 2004年; 香石竹ACC氧化酶基因从核NDA中克隆之后,将其首先构建成正义及反义的单拷贝植物表达载体,在此基础上又同向插入一个ACO基因片段,从而获得ACO的正义重复基因和反义重复基因植物表达载体,所得载体已通过酶切分析和PCR鉴定。将该表达载体导入根癌农杆菌LBA4404菌株,并转化香石竹品种Master、爱卡迪幼叶,经PCR检测和Southern杂交鉴定,获得了8株转化植珠。; 余义勋包满珠孙振元; 关键词：香石竹 ACC氧化酶植物表达载体转基因植株重复基因

提高根癌农杆菌介导的香石竹遗传转化效率的研究被引量：19: 2003年; 以无菌苗叶片为外植体,在根癌农杆菌介导下建立并优化了香石竹5个品种的遗传转化体系。预培养2d可明显提高转化率;香石竹品种间在转化上存在差异;培养基中添加20μmol的AgNO3抑制不定芽的分化。转化植株在含25mg·L-1卡那霉素的生根培养基上培养,生根率为72 1%,GUS检测结果55%的转化植株呈蓝色,PCR扩增表明阳性率为32 2%,Southern杂交证实外源基因已整合到植物基因组中。; 林荣呈陈龙清包满珠孙振元; 关键词：香石竹根癌农杆菌 GUS

香石竹ACC氧化酶基因的克隆与植物表达载体构建被引量：24: 2002年; 根据已发表的ACO核苷酸序列 ,设计一对引物 ,以香石竹品种‘American’基因组DNA为模板 ,扩增出香石竹ACC氧化酶基因 ,将其连接到pMD18加T质粒载体上 ,通过中间载体pBluescriptSK ,构建了ACO基因正向和反向插入的植物表达载体 ,并将其导入了农杆菌。酶切检测表明该片段已插入表达载体 ,序列测定结果显示所克隆基因片段含 3个外显子 ,2个内含子 ,其中; 余义勋张俊卫孙振元包满珠; 关键词：植物表达载体香石竹 ACC氧化酶基因克隆

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国家自然科学基金(39970532)