博士科研启动基金(30307-3200818)
- 作品数：5 被引量：26H指数：4
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- 相关机构：广州市妇女儿童医疗中心广州市儿童医院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 2010年广州某医疗中心儿童夏季细菌性腹泻的病原学调查被引量：7
- 2011年
- 目的研究广州地区小儿夏季细菌性腹泻的病原菌分布。方法采集2010年5～7月广州市妇女儿童医疗中心珠江新城院区腹泻患儿的大便标本进行常规病原菌的分离培养,通过生化反应和血清凝集试验进行鉴定和分型,并使用金标法对空肠弯曲菌抗原进行检测。结果从110份标本中检出44株病原菌,检出率为40.0%。其中致病性大肠埃希菌17株,2岁以下患儿检出15株;空肠弯曲菌12株,2岁以下患儿检出10株;沙门菌6株;念珠菌纯生长6株;产气荚膜杆菌3株。结论广州地区夏季儿童细菌性腹泻的主要病原菌是致病性大肠埃希菌及空肠弯曲菌,两者的易感人群以2岁以下婴幼儿为主。
- 黄玉开付捷关锐梨曹慧玲邓秋连谢永强黄勇周珍文
- 关键词：儿童夏季细菌腹泻
- 超敏C-反应蛋白检测对小儿浆膜腔积液性质鉴别的应用被引量：8
- 2010年
- 目的探讨超敏C-反应蛋白(hs-CRP)对小儿浆膜腔积液性质鉴别的价值。方法收集2008-2009年本院43例浆膜腔积液标本,使用日立7600全自动生化分析仪检测积液和血清的LDH及蛋白含量,采用免疫荧光双抗体夹心法检测积液中的hs-CRP含量。结果hs-CRP检测对于浆膜腔积液性质鉴别的灵敏度为92%,特异度为93%。结论与常规方法相比,hs-CRP在小儿浆膜腔积液的鉴别诊断方面也具有较好的灵敏度、特异性,可作为临床小儿浆膜腔积液性质鉴别的指标。
- 李文利李娟林淑仪周珍文
- 关键词：超敏C-反应蛋白渗出液漏出液
- 幽门螺杆菌临床分离株尿素酶基因B的原核表达、纯化及免疫活性被引量：5
- 2010年
- 目的:在大肠杆菌中表达幽门螺杆菌临床分离株尿素酶B(UreB),纯化重组蛋白并分析其免疫活性。方法:将pGEX-4T-1-UreB重组菌BL21复舒,挑单菌落接种于含氨苄的LB培养基中,0.5mmoL异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组融合蛋白的表达,使用纯化的重组蛋白免疫小鼠,ELISA检测血清抗体效价,并使用感染患者血清进行Western-blotting鉴定重组蛋白反应原性。结果:SDS-PAGE示在约87kD相应分子量可见融合蛋白表达,产物主要在表达上清以可溶形式存在,纯化蛋白免疫小鼠能诱导产生特异性体液免疫应答,ELISA检测特异性IgG效价为1:51200,Westernblotting示重组蛋白能被幽门螺杆菌感染患者血清识别。结论:UreB在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物具有较好的免疫原性及反应原性。
- 周珍文关锐梨夏慧敏邓秋连谢永强黄勇廖灿龚四堂
- 关键词：尿素酶B免疫活性
- 幽门螺杆菌儿童分离株中性粒细胞激活蛋白克隆及表达序列被引量：1
- 2011年
- 目的:从幽门螺杆菌临床儿童分离株GZCH1基因组扩增中性粒细胞激活蛋白(NAP)基因,克隆入T载体,并亚克隆入表达载体pGEX-4T-1,进行测序及基因比对分析,为幽门螺杆菌疫苗研制奠定基础。方法:根据GenBank中幽门螺杆菌NAP序列,设计一对特异性引物扩增幽门螺杆菌临床儿童分离株NAP全长基因,与T载体连接,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒进行酶切、测序鉴定,经EcoRⅠ、NotⅠ双酶切后与做相应酶切的pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定,IPTG诱导重组蛋白表达,并对基因进行测序及比对分析。结果:以幽门螺杆菌儿童分离株GZCH1为模板,成功扩增了NAP基因,基因大小为435 bp,重组pGEX-4T-1-NAP双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示NAP在正确读框中,序列比对分析显示其与幽门螺杆菌J99株氨基酸一致性达99.2%,IPTG诱导后,pGEX-4T-1-NAP/BL21在相应分子量(42.8 kD)可见融合蛋白的表达。幽门螺杆菌儿童分离株GZCHl NAP序列已登录GenBank(登录号:GU301881)。结论:从幽门螺杆菌临床儿童分离株GZCH1中成功克隆了NAP基因,并获得重组蛋白的表达,为NAP幽门螺杆菌疫苗研制奠定了良好的基础。
- 周珍文关锐梨夏慧敏付捷邓秋连谢永强黄勇廖灿龚四堂
- 关键词：幽门螺杆菌儿童中性粒细胞激活蛋白克隆
- 幽门螺杆菌儿童分离株尿素酶基因B的克隆及序列分析被引量：5
- 2009年
- 目的克隆幽门螺杆菌(Hp)临床儿童分离株尿素酶B(UreB)基因入pGEX-4T-1表达载体,并进行测序及基因比对分析,为以UreB作为Hp疫苗分子的口服疫苗研制奠定基础。方法根据GenBank中HpUreB序列,设计一对特异性引物PCR扩增Hp临床儿童分离株UreB全长基因,EcoRI及NotI酶切后与做相应酶切的pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定及基因测序,并对测序结果进行比对分析。结果以Hp儿童分离株GZCH1为模板,成功扩增了UreB基因,基因大小为1710bp,重组pGEX-4T-1-Ure双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示UreB在正确阅读框中,序列比对分析显示其与相关报道序列核苷酸和氨基酸一致性达98%。Hp儿童分离株GZCH1UreB序列已登录GenBank(登录号:FJ455126)。结论从Hp儿童分离株GZCH1中成功克隆了UreB基因,为UreBHp口服疫苗研制奠定了基础。
- 周珍文邓秋连夏慧敏耿岚岚梁伟河谢永强黄勇龚四堂
- 关键词：幽门螺杆菌克隆儿童
