国家自然科学基金(30670633)
- 作品数：7 被引量：38H指数：4
- 相关作者：袁亚维孙爱民刘英谢国柱孙权权更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院江西省萍乡市人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 悬浮培养乳腺癌干细胞放疗抵抗与G2期阻滞相关被引量：11
- 2011年
- 目的悬浮培养富集MCF-7细胞系中乳腺癌干细胞,探讨其细胞周期与放疗抵抗关系。方法无血清悬浮培养体系富集MCF-7细胞系中肿瘤干细胞,体内成瘤实验验证其干细胞特性,克隆形成检测其辐射敏感性;进一步流式细胞仪分析放疗前后其细胞周期变化,蛋白印记法测定放疗前后pCDC25C(ser216)蛋白含量。结果无血清悬浮培养富集的乳腺癌干细胞体内成瘤能力明显强于贴壁培养细胞;乳腺癌干细胞和贴壁培养细胞SF2Gy分别为0.856±0.061和0.783±0.097(P<0.05);乳腺癌干细胞放疗前后G2期细胞含量分别为22.03%±2.12%和45.83%±2.25%(P<0.01),G2期相关蛋白pCDC25C(ser216)放疗后表达明显增高,而贴壁培养放疗前后细胞周期及周期相关蛋白均无明显差异。结论 MCF-7细胞系中乳腺癌干细胞放疗后出现的G2期阻滞可能与其放疗抵抗特性相关。
- 田允鸿谢国柱任陈孙权权孙爱民刘英袁亚维
- 关键词：肿瘤干细胞细胞周期放疗
- 辐射与悬浮球培养联合纯化乳腺癌干细胞被引量：9
- 2010年
- 目的:利用悬浮球培养联合不同辐射模式,高度纯化人乳腺癌MCF-7细胞中辐射抵抗的CD44+/CD24-/low乳腺癌干细胞。方法:利用含细胞因子的无血清培养体系培养MCF-7细胞,将培养形成的球囊细胞连续传代,选择第2代球囊细胞分别行2Gy×4次及单次8Gy照射。利用滤网收集存活细胞生成的微球囊,流式细胞仪检测纯化后微球囊中CD44+/CD24-/low细胞的含量,克隆形成检测及单击多靶模型曲线拟合分析纯化后微球囊细胞的辐射敏感性。结果:单纯悬浮球培养与联合X线照射组之间CD44+/CD24-/low细胞的含量差异存在显著性(P﹤0.05),联合组高度纯化CD44+/CD24-/low细胞;多次分割及单次大剂量照射对CD44+/CD24-/low细胞的富集作用差异无显著性(P=0.303)。纯化细胞照射后存活分数显著高于贴壁MCF-7细胞。结论:辐射联合悬浮球培养进一步纯化辐射抵抗的CD44+/CD24-/low乳腺癌干细胞的方法是可行的。
- 谢国柱詹军芳孙爱民刘英孙权权袁亚维
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤干细胞
- 乳腺癌干细胞中活性氧簇水平的研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨乳腺癌MCF-7细胞中CD44+CD24-/low表型乳腺癌干细胞活性氧簇水平。方法用悬浮培养的方法富集乳腺癌干细胞。用流式细胞仪检测CD44+CD24-/low表型乳腺癌干细胞含量,体内成瘤实验验证其干细胞特性,克隆形成实验检测其辐射敏感性,2′-7′-二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)法检测其活性氧簇水平。结果贴壁培养和悬浮培养的细胞中CD44+CD24-/low表型乳腺癌干细胞含量分别为(8.10±1.69)%、(84.88±1.74)%,二者比较差异有统计学意义(P<0.01);悬浮培养细胞致瘤能力明显强于贴壁培养细胞;悬浮培养细胞2 Gy剂量点存活分数为(0.876±0.061)分,明显高于贴壁培养细胞的(0.783±0.097)分(P<0.01);贴壁培养和悬浮培养细胞活性氧簇水平分别为32.91±3.61和5.39±0.66,二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论悬浮培养能富集乳腺癌干细胞,乳腺癌干细胞活性氧簇水平明显低于分化乳腺癌细胞,这可能在维持其自我更新特性及放疗抵抗中起重要作用。
- 田允鸿陈卫国谢国柱刘英孙权权张肖孙爱民袁亚维
- 关键词：肿瘤干细胞活性氧乳腺肿瘤
- 乳腺癌干细胞含量及球囊形成与组织激素受体状态相关被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨临床组织中乳腺癌干细胞含量和球囊形成与临床特性的关系。方法:乳腺癌细胞原代贴壁培养成功后,消化制备单细胞悬液并计数,取恒定密度细胞进行流式检测CD44+/CD24-/low表型乳腺癌干细胞含量,另一部分固定密度细胞行无血清悬浮球囊培养;将肿瘤干细胞含量及成功形成球囊病例数与患者临床特性进行相关性分析。结果:87例乳腺癌病例中,肿瘤干细胞平均含量为0.292±0.158(0.012～0.658),CD44+/CD24-/low细胞含量在ER(-)、ER(+)、PR(-)和PR(+)病例中分别为0.365±0.152、0.242±0.142、0.334±0.163和0.242±0.142;成功形成球囊病例分别占60.0%、32.7%、56.1%和32.6%。经单因素分析显示,ER、PR与肿瘤干细胞含量及能否成功形成球囊明显相关,而HER2、年龄及T分期等与肿瘤干细胞含量及能否成功形成球囊无明显相关。结论:乳腺癌患者癌组织中肿瘤干细胞含量及形成球囊病例数与ER、PR明显相关。
- 田允鸿詹军芳谢国柱刘英孙爱民袁亚维
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤干细胞原代培养
- 放射性脑损伤大鼠海马神经元P35及P25的表达被引量：5
- 2008年
- 目的建立放射性脑损伤大鼠模型并观察P35、P25蛋白的表达情况。方法120只雄性SD大鼠随机分为单次全脑照射0、10、20、30 Gy 4个组。构建大鼠的放射性损伤模型,尼氏染色观察各组大鼠海马CAl区神经元的数目。组织匀浆法提取海马蛋白,Western blot法检测海马区P35、P25蛋白的表达。结果与0 Gy组比较,10 Gy组神经细胞死亡、P35及P25表达差异不明显(P>0.05);20、30 Gy组存活神经元减少,P35表达减少,P25表达增加(P<0.05)。结论放射性损伤可导致海马区神经元损伤,可能与P35和P25蛋白表达变化有关。
- 刘鹊凌孙爱民韩永清刘英陈龙华袁亚维
- 关键词：海马神经元放射性损伤P35
- 鼻咽癌单程与再程放射治疗后放射性脑损伤临床分析被引量：6
- 2009年
- 目的探讨鼻咽癌单程与再程放疗后放射性脑损伤(REP)的临床特点。方法回顾性分析2 103例鼻咽癌放疗患者的临床资料,总结单程放疗后REP和再程放疗后REP患者的临床特点。结果鼻咽癌再程放疗患者REP发生率(9.60%)明显高于单程放疗者(2.07%,P<0.05);再程放疗后REP组REP中位潜伏期(2 a)明显短于单程放疗后REP组(5 a,P<0.05);再程放疗后REP组REP患者死亡率(33.3%)明显高于单程放疗后REP组(7.32%,P<0.05)。结论鼻咽癌放疗后REP发生部位与放疗程数无明显相关性,但放疗后REP发病率、中位潜伏期、及患者死亡率与放疗程数有明显相关性。
- 韩永清孙爱民陈勇刘英陈龙华袁亚维
- 关键词：鼻咽癌放射性脑损伤
- X线照射原代培养大鼠海马神经元后p35、p25的表达及Cdk5激酶活性变化被引量：3
- 2009年
- 目的研究X线照射培养大鼠海马神经元后p35,p25的表达及Cdk5激酶活性变化,为放射性脑损伤的预防和治疗提供理论依据。方法30GyX射线单次照射培养至12d的海马神经元,用Western-blotting检测Cdk5的激活蛋白p35、p25的水平,用DAPI染核方法检测海马神经元凋亡情况。结果p35蛋白水平在照射后3.5和4h分别比对照组升高(1.51±0.13)、(1.45±0.14)倍,差异均有统计学意义(P<0.01);p25蛋白水平在照射后6h比对照组升高(1.62±0.28)倍,差异有统计学意义(P<0.05)。30Gy组在照射后24h核固缩百分数为(24.8±3.97)%,与对照组(1.82%±1.08%)有显著性差异(P<0.01);30Gy+roscovitine组在照射后24h核固缩百分数为(7.74±2.27)%,与对照组有显著性差异(P<0.01)。结论X线照射培养海马神经元后p35、p25蛋白表达增加,激活cdk5;应用Cdk5抑制剂roscovitine抑制Cdk5活性可以显著减少神经元的凋亡。
- 韩永清孙爱民刘鹊凌陈龙华袁亚维
- 关键词：P35CDK5海马神经元
