国家质检公益性行业科研专项(201110008)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：王军熊金平冯流星张丹更多>>
- 相关机构：北京化工大学中国计量科学研究院更多>>
- 发文基金：国家质检公益性行业科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：理学医药卫生更多>>
- 凝胶电泳-激光烧蚀进样电感耦合等离子体质谱与非特异性同位素稀释法联用技术定量分析人血清中蛋白被引量：7
- 2014年
- 建立了聚丙烯酰胺凝胶电泳（ PAGE）-激光烧蚀进样电感耦合等离子体质谱（ LA-ICP-MS）与非特异性同位素稀释法联用技术，通过测定蛋白条带上硫元素的含量，实现了人血清中蛋白的定量分析.血清电泳分离条件为：分离胶浓度（质量分数）为7.5%，浓缩胶浓度为4%，电泳电压100 V.为优化激光烧蚀实验条件，以LA-ICP-MS测得不同浓度硫富集凝胶中32 S的信号强度，在1~400μg/g范围内呈现良好的线性关系， R2=0.993.采用外标法对血清中的转铁蛋白和白蛋白进行了相对定量分析.此外，重点采用“电泳后同位素稀释”方法实现了蛋白条带上34 S稀释剂的加入，对血清中转铁蛋白和白蛋白进行了绝对定量分析；采用人血清蛋白标准物质ERM-DA470/IFCC对建立的方法体系进行了验证，结果表明2种蛋白的定量结果与标准值吻合，方法的准确性好，且测量精度优于外标法.
- 张丹冯流星王军申黛瑞熊金平
- 关键词：激光烧蚀
- 高效液相色谱-柱后同位素稀释质谱法定量分析人血清中转铁蛋白及白蛋白被引量：3
- 2014年
- 建立了高效液相色谱(HPLC)与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)联用,同时结合柱后同位素稀释法,通过直接测定硫及铁元素,实现蛋白质绝对定量的分析方法。选取分子量不同的4种标准蛋白:转铁蛋白、β乳球蛋白、肌红蛋白和溶菌酶作为混合蛋白,34S或54Fe同位素稀释剂与液相色谱洗脱液经三通混合后,在线进入ICP-MS检测。根据同位素稀释法公式及蛋白中硫、铁的含量计算混合蛋白中每种蛋白的浓度,与天平称量结果一致,对方法进行了验证。将方法应用到人血清转铁蛋白、白蛋白的定量分析,针对两种蛋白含量差别大导致的信号差异,通过改变同位素稀释剂的流速,成功测定了人血清中转铁蛋白、白蛋白的含量。采用34S及54Fe同位素稀释剂分别定量的血清中转铁蛋白浓度为(2.35±0.01)g/L和(2.22±0.13)g/L,结果基本吻合。方法精密度RSD均小于10%,可用于基体样品中含硫蛋白及金属蛋白的定量分析。
- 张丹冯流星王军熊金平
- 关键词：同位素稀释电感耦合等离子体质谱转铁蛋白白蛋白
