国家自然科学基金(81270808)
- 作品数：25 被引量：209H指数：9
- 相关作者：范秋灵王力宁徐莉汪旭汪旭更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院辽宁省人民医院中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金沈阳市科技计划项目辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IgA肾病牛津分型与临床指标的相关性及危险因素分析被引量：23
- 2017年
- 目的研究Ig A肾病牛津分型的4种主要病变:系膜细胞增生(M0/1)、内皮细胞增生(E0/1)、节段性硬化或粘连(S0/1)、肾小管萎缩或肾间质纤维化(T0/1/2)与临床指标之间的相关性及危险因素。方法收集2006年2月17日至2011年10月11日在中国医科大学附属第一医院肾内科经肾活检确诊的514例18岁以上Ig A肾病患者的临床及病理资料。除外过敏性紫癜、强直性脊柱炎、银屑病等继发性Ig A肾病。采用χ~2检验、Spearman秩相关、二分类及多因素logistic回归分析进行统计学分析。结果514例Ig A肾病患者中,男女比例1.06∶1,平均年龄(35.70±11.99)岁,平均病程(18.31±30.42)个月。单纯血尿组牛津分型以M0E0S0T0为主。慢性肾脏病肾功能分期、24 h尿蛋白定量、尿微量白蛋白、尿转铁蛋白、尿Ig G与M病变呈正相关;血清白蛋白、C3、血小板与M病变呈负相关。24 h尿蛋白定量和血小板升高是影响系膜细胞增生程度的独立危险因素。尿蛋白≥3.5 g的患者M1的比例(67.5%)显著高于非肾病范围蛋白尿的患者。年龄、收缩压、尿红细胞计数、24 h尿蛋白定量、尿微量白蛋白、尿转铁蛋白、尿Ig G与E病变呈正相关;病程、血清白蛋白与E病变呈负相关。年龄、病程长是E病变加重的独立危险因素。60岁以上患者E1的比例(73.3%)显著高于60岁以下患者。CKD分期、收缩压、24 h尿蛋白定量与S病变呈正相关。年龄、CKD肾功能分期、收缩压、舒张压、C4、甘油三酯、低密度脂蛋白、C反应蛋白、血清纤维蛋白原、血尿酸、血胱抑素C、24 h尿蛋白定量、尿β2微球蛋白、尿微量白蛋白、尿转铁蛋白、尿Ig G与T病变程度呈正相关,血红蛋白、血清白蛋白、血Ig G与T病变呈负相关。前驱感染史、舒张压≥90 mm Hg、低白蛋白血症、高低密度脂蛋白血症、贫血、高C反应蛋白血症是T病变加重的影响因素。结论24 h尿蛋白定量和血小板升�
- 李卅立范秋灵赵洁刘楠王曦姜奕王力宁
- 关键词：IGA肾病
- 血清可溶性KLOTHO蛋白与腹膜透析患者矿物质骨代谢及腹主动脉钙化相关性的研究被引量：5
- 2015年
- 目的探讨血清可溶性Klotho蛋白(s KL)与持续性非卧床腹膜透析(CAPD)患者矿物质骨代谢指标及腹主动脉钙化的关系。方法 58例接受腹膜透析治疗>3个月以上且临床病情稳定的患者被纳入研究范围,收集患者的临床资料和血钙、磷、甲状旁腺激素(i PTH)、25-羟维生素D等生化指标。用ELISA法测定血清中可溶性Klotho蛋白(s KL)、人成纤维生长因子23(FGF23)、人骨特异性碱性磷酸酶(BAP)浓度。应用腹部侧位片评价患者腹主动脉钙化程度,计算腹主动脉钙化积分(AAC)。采用Pearson相关性分析的方法分析s KL与AAC及临床指标的关系,用logistic回归的方法分析CAPD患者发生腹主动脉钙化的危险因素,受试者工作特征曲线(ROC)评价s KL诊断腹主动脉钙化的准确性与特异性。结果58例腹膜透析患者中50发生腹主动脉钙化,钙化发生率为86.2%,血清s KL的浓度157.87±33.49 pg/m L。s KL浓度与AAC积分、血磷、FGF23呈负相关(r分别为-0.73、-0.26、-0.33,三者均P<0.05),与25-羟维生素D呈正相关(r=0.48,P<0.05),与BAP、PTH、血矫正钙无相关性(r分别为-0.17、-0.23、-0.04,P分别为0.21、0.09、0.75)。多因素Logistic回归分析结果显示:血清s KL降低(β=0.038,OR=0.96,P<0.05)和FGF23(β=0.08,OR=1.09,P<0.05)是CAPD患者腹主动脉钙化的独立危险因素。ROC曲线下面积(AUC)示s KL诊断腹主动脉钙化的AUC=0.81(截点为153.78 pg/m L,准确性为87.5%,特异性58.0%)。结论血清可溶性Klotho蛋白与腹膜透析患者的矿物质骨代谢异常相关,随着血清可溶性Klotho蛋白浓度的下降,腹主动脉钙化的风险升高,血清可溶性Klotho蛋白可以作为血管钙化的生物标志物。
- 仲思范秋灵卢新星苏彦张东成王力宁
- 关键词：血管钙化
- 熊果酸通过调节Wnt／β-catenin通路抑制高糖诱导的足细胞上皮间充质转分化被引量：4
- 2016年
- 目的观察高糖诱导足细胞Wnt／β-catenin通路活化及足细胞形态改变，探讨熊果酸保护足细胞损伤的可能机制。方法体外培养足细胞并分为4组：正常糖组（葡萄糖5．5mmol／L）、甘露醇组（葡萄糖5．5mmol／L＋甘露醇19．5mmol／L）、高糖组（葡萄糖25mmol／L）和熊果酸组（葡萄糖25mmol／L＋熊果酸5μmol／L）。倒置相差显微镜检测足细胞形态转化；免疫荧光检测足细胞紧密连结蛋白1（ZO-1）、a平滑肌肌动蛋白（a-SMA）的表达；Western印迹法检测足细胞B连环蛋白（B-catenin）、糖原合成酶激酶3p（GSK3β）的表达；实时定量PCR法检测足细胞Wntl、Wnt3a、Wnt5a、Wnt5b和B-cateninmRNA的表达。结果正常糖组足细胞呈不规则的树枝状，高糖培养下足细胞向鹅卵石、细长状态的间充质细胞形态转化。高糖诱导足细胞后ZO．1蛋白表达下调，a-SMA表达增加，Wnt5a mRNA表达下调，B-cateninmRNA及蛋白表达上调，GSK313蛋白表达下调（均P〈0．05）。相对于高糖组，熊果酸组足细胞发生上皮细胞间充质转化的比例减少，ZO-1蛋白表达增加，a-SMA蛋白表达下降，Wnt5amRNA表达上调，B-cateninmRNA及蛋白表达下调，GSK3β蛋白表达上调（均P〈0．05）。结论熊果酸通过调节Wnt／β-catenin信号通路抑制高糖诱导的足细胞上皮间充质转分化，减轻足细胞损伤。
- 李琳徐莉范秋灵汪旭张艳宁王力宁
- 关键词：足细胞熊果酸细胞转分化
- 乌索酸对高糖诱导人肾小球系膜细胞增殖肥大及细胞外基质分泌的影响
- 2017年
- 目的探讨乌索酸(UA)对高糖(HG)所致人系膜细胞(RMC)损伤的保护作用,保护机制是否通过抑制系膜细胞增殖、肥大及细胞外基质分泌而完成。方法取对数生长期细胞,分为空白对照组、模型组、对照组、实验A、B、C组。空白对照组予以5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖培养;模型组予以30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖培养;对照组予以5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+24.5 mmol·L^(-1)甘露醇培养;实验A、B、C组分别予以30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.5,1.0,2.0μmol·L^(-1)乌索酸培养。6组均给药48 h。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,用PI单染流式细胞仪检测细胞周期及细胞肥大,用逆转录聚合酶链式反应法及免疫印迹法检测转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、纤维连接蛋白(FN)mRNA及蛋白表达。结果给药48 h后,空白对照组、模型组、对照组、实验A、B、C组的细胞增殖分别为(3.66±0.32),(4.33±0.23),(3.50±0.22),(3.93±0.11),(3.59±0.06)和(0.67±0.16)。模型组和空白对照组的细胞增殖率比较,差异有统计学意义(P<0.05);实验B组、实验C组与模型组的细胞增殖率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验A组与空白对照组及对照组的细胞增殖率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);实验C组大部分系膜细胞已经死亡,设定实验B组为后续实验最终实验组。空白对照组、模型组、对照组、实验组的TGF-β_1mRNA分别(24.80±0.90),(29.89±1.06),(23.72±0.87)和(25.06±0.11),FN mRNA分别为(42.03±0.57),(54.55±1.20),(42.72±0.40)和(45.32±0.51),TGF-β_1蛋白分别为(54.92±3.28),(125.93±3.58),(25.11±0.51)和(101.23±7.55),FN蛋白分别为(46.44±7.90),(66.13±13.10),(34.98±5.52)和(28.70±5.70);模型组的上述指标与空白对照组及实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论乌索酸通过抑制系膜细胞增殖、肥大及细胞外基质分泌,从而减轻高糖诱导的系膜细胞损伤。
- 岳媛岳媛范秋灵都姝妍远方徐莉李琳刘楠姜奕
- 关键词：人系膜细胞乌索酸肥大增殖细胞外基质
- LncRNA-ARAP1-AS2/ARAP1在高糖诱导的人肾小管上皮细胞细胞骨架重排和上皮间充质转化中的作用
- 目的:糖尿病肾病(dibetic nepropathy,DN)是糖尿病严重的并发症之一,影响近50%的糖尿病患者,然而导致DN的潜在分子机制仍未完全阐明。长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncR...
- 李露露
- 关键词：CDC42HK-2
- 文献传递
- STAT1siRNA转染对高糖培养人肾小球系膜细胞STAT3及转化生长因子β1表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察信号转导与转录激活子1（STAT1）siRNA转染后高糖培养人肾小球系膜细胞（HMC）的增殖情况及细胞内STAT1、磷酸化（p）STAT1、STAT3、p-STAT3蛋白及下游TGF-β1的表达变化，探讨高糖状态下STAT1和STAT3活性变化及STAT亚型变化对TGF-β1的影响。方法设计并合成针对STAT1基因的3个特异性siRNA序列（STAT1-siRNA），应用Lipofeetamine2000转染试剂将STAT1-siRNA转染入HMC。激光共聚焦显微镜鉴定转染效率，应用Western印迹、实时定量PCR法筛选最有效抑制STATl表达的干扰序列用于后续实验。转染有效干扰序列24h后，用25mmol／L葡萄糖刺激24、48、72h，M1vr法检测各组系膜细胞的增殖情况；Western印迹法检测各组细胞STAT1、p-STATl、STAT3、p-STAT3蛋白的表达；ELISA法检测TGF-β1的表达。结果与对照组相比，高糖可刺激HMC增殖，HMC的P-STAT1、P-STAT3及TGF-β1表达上调（P〈0．05）。转染STAT1-siRNA后高糖刺激HMC，p-STAT3及TGF-β1的表达进一步增高（P〈0．05）。结论高糖可以通过磷酸化方式激活HMC的JAK-STAT信号转导通路。转染STATI-siRNA后，系膜细胞增殖增多，STAT3活性增强。高糖促进HMC分泌TGF--β1，转染STAT1-siRNA后，TGF-β1分泌进一步增加，与肾脏纤维化有关。
- 郑晓玉焦素敏王力宁陈莹杨雪张瑾杨爽高鑫然范秋灵
- 关键词：转化生长因子Β1转染小分子干扰肾小球系膜细胞高糖
- 2型糖尿病和糖尿病肾病患者血清微小RNA-148b-3p的水平变化及意义被引量：20
- 2018年
- 目的分析2型糖尿病和糖尿病肾病患者血清微小RNA-148b-3p（miR-148b-3p）的水平变化及其与临床和病理指标的相关性。方法入组人群分为3组，（1）糖尿病肾病组：。肾活检病理诊断明确为糖尿病肾病的患者（n=25，男14例，女11例）；（2）2型糖尿病组：尿微量白蛋F1／尿肌酐正常的2型糖尿病患者（n=10，男4例，女6例）；（3）正常对照组：健康体检者（n=9，男3例，女6例）。临床指标包括性别、年龄、24h尿蛋白量、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、血肌酐（Scr）、尿素氮（Urea）、胱抑素C（Cys—C）、血白蛋白（ALB）、尿微量白蛋白（UMA）、三酰甘油（TG）、胆同醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、血尿酸（UA）、空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、尿微量白蛋白／尿肌酐（UACR）和利用CKD—EPI公式计算的估算肾小球滤过率（eGFR）。实时定量PCR法测定入组人群的血清miR-148b-3p水平，分析血清miR-148b-3p水平与人组人群临床参数的关系。结果糖尿病肾病组、2型糖尿病组血清miR-148b-3p水平分别是正常对照组的1．82倍和1．73倍（均P〈0．05）。血清miR-148b-3p水平与HDL—C（r=-0．374，P=0．013）、UMA（r=0．426，P=O．004）、FBG（r=0．330，P=0．046）及TG（r=0．423，P=0．005）有明显相关性。多元线性回归分析显示UMA与血清miR-148b-3p独立相关（β=0．338，P=0．044）。血清miR-148b-3p在诊断2型糖尿病及糖尿病肾病的受试者丁作特征曲线（ROC）下面积分别为0．835和0．665。结论2型糖尿病和糖尿病肾病患者血清中miR．148b-3p水平显著升高。UMA与血清miR-148b-3p水平独立相关。血清miR-148b-3p有望作为糖尿病肾病诊断的潜在生物标志物。
- 李鑫范秋灵汪旭常圆圆马天魁陈桐杨莹李露露徐莉王海龙
- 关键词：糖尿病肾病糖尿病微小RNA生物标志物
- miRNA、内质网应激在糖尿病肾病中的作用被引量：4
- 2016年
- 据国际糖尿病联盟最新的统计数据报告,2014年全世界有3.87亿糖尿病患者,并预计在2035年将有53%的增长,其中中国占很大一部分。研究发现,有52.0%的糖尿病患者至少患有一种慢性并发症,21.4%的患者患有两种以上并发症。而糖尿病肾病（DN）则是糖尿病最常见的微血管并发症,其中有近40%的糖尿病患者均伴有DN。
- 赵雪范秋灵徐莉曹旭刘佳
- 关键词：微小RNA糖尿病肾病内质网应激
- 短暂高糖通过组蛋白甲基化修饰诱导肾小球系膜细胞持续炎性反应
- 2017年
- 目的探讨短暂高糖培养后再恢复正常糖环境的大鼠肾小球系膜细胞是否持续释放炎性因子，及该过程是否与组蛋白甲基化修饰有关。方法大鼠肾小球系膜细胞株（HBZY-1）分为高糖组（25．0mmol／L葡萄糖）、高渗对照组（19．5mmol／L甘露醇＋5．5mmol／L葡萄糖）和正常对照组（5．5mmol／L葡萄糖）进行24h培养；随后各组更换正常糖培养基（5．5mmol／L葡萄糖）培养0、24、48、72h。分别提取各组细胞的蛋白、上清液以及总RNA。采用Western印迹检测组蛋白H3四号位赖氨酸单甲基化（H3K4mel）表达水平，实时荧光定量PCR检测核因子κB（NF—κB）的p65亚基、组蛋白甲基化转移酶set7／9的mRNA表达，ELISA检测上清中单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、血管细胞黏附分子1（VCAM-1）的表达。结果（1）与正常对照组比较，高糖处理大鼠系膜细胞24h后set7／9mRNA表达和H3K4mel蛋白表达均上调（均P〉0．05）；恢复正常糖培养24、48、72h高糖组set7／9mRNA表达和H3K4mel蛋白表达逐渐降低（与0h高糖组比较，均P〈0．05）；恢复正常糖培养72h高糖组set7／9和H3K4mel的表达与正常对照组差异均无统计学意义（均P〉0．05）。（2）未恢复正常糖培养（0h）时高糖组大鼠系膜细胞NF-κBp65mRNA、MCP-1、VCAM-1的表达均高于正常对照组（均P〉0．05）；恢复正常糖培养24、48h和72h高糖组NF—κBp65mRNA、MCP-1、VCAM-1的表达均保持高表达，与0h高糖组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。以上各指标高渗组与正常对照组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论短暂高糖培养可诱导。肾小球系膜细胞组蛋白甲基化转移酶set7／9和组蛋白H3K4单甲基化的表达上调，并且在恢复正常糖环境后仍持续48h。同时短暂高糖培养促进肾小球系膜细胞NF—κBp65，炎性因子MCP-1、VCAM-1的表达持续高表达。提示高糖代谢记忆可能�
- 邓云蕾范秋灵汪旭曹旭徐莉刘佳赵雪王力宁
- 关键词：血管细胞黏附分子1趋化因子CCL2代谢记忆
- 乌索酸增强自噬改善高糖诱导的足细胞损伤被引量：4
- 2015年
- 目的探讨乌索酸是否通过改善高糖状态下的足细胞白噬抑制，发挥其肾脏保护作用。方法体外高糖培养小鼠条件永恒足细胞株，加入P13K抑制剂LY294002及乌索酸进行干预。RT．qPCR法检测细胞内微小RNA一21（miR．21）和磷酸酶基因（PTEN）的mRNA表达。Western印迹法检测磷脂酰肌醇-3激酶（P13K）／蛋白激酶B（Akt）／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关蛋白，白噬相关蛋白及足细胞标志蛋白的表达变化。采用荧光显微镜观察足细胞标志蛋白、内源性微管相关蛋白LC3的表达变化。透射电镜下观察足细胞内白噬体的形成。结果与对照组相比，高糖组足细胞自噬相关蛋白LC3II、Beclinl的表达降低，泛素结合蛋白p62（p62／SQSTMl）表达增高；足细胞标志蛋白synaptopodin、podocin及nephrin表达降低；同时伴miR-21表达上调，PTEN的mRNA和蛋白表达均下调，p85-P13K、磷酸化（P）-Akt、p-mTOR表达增加（均P〈0．01）。加入LY294002及乌索酸干预后，p85-P13K、磷酸化（P）-Akt、p-mTOR表达减少；足细胞自噬相关蛋白LC3II、Beclin1的表达增加，p62／SQSTM1表达降低；足细胞标志蛋白synaptopodin、podocin及nephrin表达降低（均P〈0．01），但LY294002对足细胞内miR-21和PTEN的表达无影响。乌索酸可抑制细胞内miR-21的过表达，上调PTEN表达（均P〈0．05）。结论高糖可抑制足细胞自噬，促进足细胞损伤。乌索酸干预可减轻高糖刺激下的足细胞自噬抑制，缓解足细胞损伤，其保护机制可能是通过抑制足细胞内miR-21过表达，上调PTEN表达，抑制P13K／Akt—mTOR信号通路的异常活化实现的。
- 徐莉范秋灵汪旭李琳卢新星岳媛曹旭刘佳赵雪王力宁
- 关键词：高血糖症足细胞自噬乌索酸MIR-21磷酸酶基因
