国家自然科学基金(30100061)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 相关作者：苑晓玲从玉文赵振虎善亚君陈家佩更多>>
- 相关机构：军事医学科学院山西大学四川农业大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 应用酵母双杂交研究G-CSF受体胞内区结合蛋白被引量：1
- 2002年
- 目的 :探寻与G_CSF受体胞内区相互作用的下游蛋白因子 ,揭示G_CSF受体信号转导通路的可能机制。方法 :采用敏感性较高的酵母双杂交体系 ,筛选小鼠胎肝文库 ,并通过体内双杂交实验进行验证。结果 :获得了 11种阳性基因片段 ,对其中铁蛋白重链片段在体内验证了相互作用。结论 :提示在小鼠胎肝中G_CSF受体作为胞内信号转导的起始点 ,与众多胞浆内蛋白因子相结合 ,对于揭示G_CSF受体信号转导可能存在的各种通路起到重要的提示作用。
- 苑晓玲从玉文郝静李冬严善亚君王金惠赵振虎陈家佩
- 关键词：粒细胞集落刺激因子受体酵母双杂交系统信号传递
- G-CSF受体和EPO受体胞内区蛋白在酵母细胞中的转录激活功能的比较研究
- 2004年
- 目的 探索应用酵母双杂交系统筛选造血因子受体胞内区结合蛋白的可行性。方法 利用RT PCR从小鼠NFS 6 0和BET 2细胞中扩增G CSF受体和EPO受体胞内区全长序列 ,并连接至酵母表达载体pGBKT7,转化酵母菌株AH10 9,提取蛋白进行West ernblotting分析 ,进一步用β 半乳糖苷酶方法检测蛋白转录激活活性。结果 Westernblotting结果显示 ,G CSF受体和EPO受体在酵母细胞中均可以正常表达。β 半乳糖苷酶检测结果发现 ,G CSF受体在酵母细胞中不呈现转录激活功能 ,然而EPO受体则出现转录激活功能。结论 应用酵母双杂交系统筛选造血因子受体胞内区结合蛋白可适用G CSF受体研究 ,但不适用EPO受体 ,该筛选蛋白的方法并非适用于所有的造血因子受体。
- 陈波苑晓玲姚振宇善亚君赵振虎陈家佩荣廷昭从玉文
- 关键词：酵母双杂交EPO受体
- G-CSF受体胞内区结合蛋白COXⅡ的分子克隆及相互作用验证被引量：4
- 2004年
- 为寻找与G-CSF受体胞内区相互作用的蛋白,探讨其可能的信号传导机制,应用酵母双杂交技术从小鼠胎肝文库中筛选到与G-CSF受体胞内区相互作用的蛋白—细胞色素C氧化酶Ⅱ亚基(COXⅡ);采用PCR技术从小鼠肌肉cDNA中克隆到全长COXⅡ,并应用哺乳动物细胞双杂交实验验证了COXⅡ与G-CSF受体胞内区相互作用;构建了一系列G-CSF受体胞内区短截体,应用细胞双杂交技术确定COXⅡ主要结合于G-CSF受体的Box3区;随后构建了COX Ⅱ-GFP融合表达载体,观察到COXⅡ在COS_7细胞中为全细胞分布。这些结果为揭示COXⅡ的新功能及发现G-CSFR新的信号传递通路提供了线索。
- 冯彦斌苑晓玲善亚君赵振虎刘晓辉从玉文
- 关键词：信号传导机制酵母双杂交技术分子克隆
- G-CSF受体胞内区与AK017149的相互作用
- 2003年
- 为研究G CSF受体胞内区与AK017149基因之间的相互作用,进而揭示G CSF受体信号转导通路的可能机制,采用高敏感性的酵母双杂交体系,筛选小鼠胎肝文库,在筛选过程中获得了1个功能未知的基因片段 AK017149,并在酵母和哺乳动物细胞体内验证了该基因片段的表达蛋白与G CSF受体间的相互作用.实验研究提示,G CSF受体作为胞内信号转导的起始点,可以与众多蛋白因子相结合,对其中未知蛋白的研究,可以为揭示G CSF受体信号转导通路起重要的提示作用.
- 苑晓玲从玉文冯彦斌善亚君王金惠赵振虎陈家佩
- 关键词：胞内区信号转导通路粒细胞集落刺激因子
