上海市科学技术委员会科研基金(054909002)
- 作品数：8 被引量：28H指数：3
- 相关作者：林矫矫刘金明石耀军陆珂孙焕更多>>
- 相关机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海师范大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会科研基金国家科技基础条件平台建设计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 日本血吸虫感染家畜的IgG筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库
- 为寻找有效的家畜日本血吸虫病诊断抗原,我们用从感染日本血吸虫的绵羊、黄牛、水牛血清中纯化的IgG,以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫(44 d)噬菌体展示cDNA文库。每种动物IgG进行二轮筛选,经六轮筛选后,随机挑取11...
- 冯金涛刘金明韩愉袁炜李浩陆珂金亚美林矫矫程国锋
- 关键词：日本血吸虫绵羊血清MRP1
- 东方田鼠抗日本血吸虫抗性相关靶基因筛选被引量：14
- 2008年
- 目的寻找东方田鼠抗日本血吸虫抗性相关靶基因。方法利用东方田鼠血清以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库,将所得阳性克隆进行测序及生物信息学分析,确定目的基因。结果经3轮筛选,特异性噬菌体得到有效富集(857倍),随机挑取58个克隆进行序列测定,获得了10条表达序列标签(EST)序列,其中7条与GenBank中登陆的日本血吸虫基因序列具有99%～100%同源性,1条与类人猿锌指蛋白基因有82%同源性。功能预测结果表明,大部分EST编码蛋白或多肽的功能主要是参与血吸虫基因表达调控。结论发现了多个可能与东方田鼠抗血吸虫抗性相关的靶基因,为进一步阐述东方田鼠抗血吸虫病的分子机理奠定了基础。
- 孙毅孙焕贾人初刘金明苑纯秀石耀军陆珂李浩金亚美林矫矫
- 关键词：日本血吸虫东方田鼠靶基因
- 东方田鼠肺脏裂解物筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库被引量：2
- 2008年
- 目的寻找与东方田鼠抗性相关的血吸虫靶基因。方法以东方田鼠肺脏裂解物为探针,亲和淘洗筛选日本血吸虫成虫(44 d)噬菌体展示cDNA文库。三轮筛选后,随机挑取76个阳性噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析。结果共获得了13个有效EST序列,其中8条EST序列与已知基因或表达序列标签同源,5个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,为新的表达序列标签。功能预测结果显示,这13个有效EST编码蛋白主要与血吸虫基因表达调控及蛋白质加工修饰相关。结论东方田鼠直接或间接地影响血吸虫基因表达,进而影响血吸虫的发育,可能是东方田鼠具有抗血吸虫特性的一个重要分子机理。
- 孙焕刘金明孙帅宋震宇石耀军陆珂李浩金亚美林矫矫
- 关键词：日本血吸虫东方田鼠
- 日本血吸虫童虫裂解物对东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库的筛选及阳性克隆分析
- 东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为筛选和分析东方田鼠抗血吸虫抗性相关基因,以日本血吸虫童虫可溶性裂解物为探针,筛选东方田鼠肝脏噬菌体展示cDNA文库。经三轮筛选,特异性噬菌体得到有效富集(375倍)。随机挑取92个克隆进行...
- 贾人初孙毅刘金明傅志强苑纯秀石耀军陆珂孙焕李浩金亚美林矫矫
- 关键词：日本血吸虫
- 文献传递
- 正常发育与发育阻遏雌虫差异表达miRNA分析
- 血吸虫正常发育雌虫(混合感染雌虫)和发育阻遏雌虫(单性感染雌虫)存在显著的差异；miRNA是对生命活动具有调控作用的一类重要的功能分析.为进一步探索miRNA与雌虫发育阻遏的关系,通过HiSeq高通量测序技术,对感染后2...
- 韩愉乔洪宾冯金涛刘金明李浩陆珂金亚美
- 东方田鼠IgG和IgG_3对日本血吸虫抗原反应特性的研究被引量：1
- 2012年
- 本文对东方田鼠(Microtus fortis)总IgG和IgG3对日本血吸虫抗原的反应特性进行了研究。纯化东方田鼠IgG,用间接ELISA法检测不同浓度东方田鼠总IgG和IgG3对日本血吸虫童虫可溶性抗原(soluble schistosomula antigen,SSA)、成虫可溶性抗原(soluble adult worm antigen,SWA)、虫卵可溶性抗原(soluble egg antigen,SEA)、童虫不可溶性抗原(insoluble schistosomula antigen,ISSA)、雄虫不可溶性抗原(insoluble male worm antigen,ISMA)、雌虫不可溶性抗原(insoluble female worm antigen,ISFA),以及基因工程抗原rSj14、rSj23-HLD、rSJ28GST、rSjPP的反应情况。结果显示,HRP标记免抗东方田鼠IgG抗体和羊抗小鼠IgG3抗体作为二抗,A值变化规律一致。该结果显示东方田鼠总IgG和IgG3与日本血吸虫抗原可能存在非特异性反应。
- 李浩刘金明傅志强石耀军金亚美陆珂姚利晓杨健美林矫矫苑纯秀朱传刚洪炀
- 关键词：东方田鼠日本血吸虫IGGELISA
- 家畜日本血吸虫病PCR诊断方法建立
- 血吸虫病是一种不可忽视的人兽共患病,其危害性仅次于疟疾,在76个国家和地区流行,估计有近2.1亿人感染。患病家畜是我国血吸虫病的重要传染源。现今对家畜血吸虫病诊断主要采用病原学诊断方法(粪便毛蚴孵化法)和免疫学诊断技术(...
- 张欣刘金明冯金涛金亚美李浩陆珂刘军涛何川川朱传刚林矫矫程国锋
- 关键词：日本血吸虫病PCR
- 文献传递
- 日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库的构建被引量：11
- 2007年
- 目的构建日本血吸虫成虫T7噬菌体展示cDNA文库。方法用Trizol试剂提取日本血吸虫成虫总RNA,分离纯化mRNA,经随机引物反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,再用EcoRⅠ和HindⅢ消化,使其成为两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端的双链cDNA。收集300bp以上的双链cDNA片段,与T7Select 10-3b载体连接,经体外包装后,以大肠埃希菌BLT5403为宿主菌构建T7噬菌体展示cDNA文库。通过滴度测定及PCR技术鉴定文库质量,用7种特异性引物以PCR法从文库中钓取目的基因以检测文库的代表性。结果原始文库的库容量为4.98×106pfu,扩增后文库滴度为3.85×1011pfu/ml。对随机挑取的96个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为93.8%,其中95.6%的插入片段大于300bp。7种特异性引物均能从文库中钓取到日本血吸虫成虫相关基因。结论构建了日本血吸虫成虫T7噬菌体展示cDNA文库。
- 孙毅贾人初刘金明苑纯秀石耀军陆珂傅志强孙焕蔡幼民林矫矫
- 关键词：日本血吸虫成虫
- 东方田鼠肝脏裂解物筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库
- 东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为寻找东方田鼠抗血吸虫抗性相关靶基因,探索其分子机理,我们将日本血吸虫童虫与东方田鼠不同组织,器官裂解物共培养,比较它们对血吸虫童虫的杀伤效果,之后,以杀伤效果较好的肝脏裂解物为探针,以亲和...
- 孙焕刘金明孙帅宋震宇石耀军陆珂李浩金亚美林矫矫
- 关键词：日本血吸虫东方田鼠
- 文献传递
- 日本血吸虫童虫裂解物对东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库的筛选及阳性克隆分析被引量：2
- 2008年
- 东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为筛选和分析东方田鼠抗血吸虫抗性相关基因,以日本血吸虫童虫可溶性裂解物为探针,筛选东方田鼠肝脏噬菌体展示cDNA文库。经三轮筛选,特异性噬菌体得到有效富集(375倍)。随机挑取92个克隆进行序列测定,获得了19条有效EST序列。其中13个条EST序列与已知基因或表达序列标签同源,6个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,为新的表达序列标签。将19个EST序列的阳性噬菌体克隆和血吸虫童虫共培养,其中4号(GenBank Accession No.:EW968294)、13号(GenBank Accession No.:EW968303)、14号(GenBank Accession No.:EW968304)、15号(GenBank Accession No.:EW968305)、18号(GenBank Accession No.:EW968308)克隆均诱导了显著的杀虫效果。综合生物信息学分析结果及体外杀伤试验结果,编码CASP8和FADD类似性细胞程序性死亡调节蛋白、α-2-HS-糖蛋白、M4蛋白、具有R3H结构域的一种mRNA结合蛋白以及三种未知蛋白的编码基因(14、15、18号克隆)可能是东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因。为进一步研究东方田鼠抗血吸虫机理奠定了基础。
- 贾人初孙毅刘金明傅志强苑纯秀石耀军陆珂孙焕李浩金亚美林矫矫
- 关键词：日本血吸虫东方田鼠肝脏抗性基因
