四川省自然科学基金(2009FZ0097)
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
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- 相关机构:四川大学华西医院华西医科大学西南大学更多>>
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- 内脂素对大鼠肝星状细胞表达碱性成纤维细胞生长因子的影响
- 2010年
- 目的观察内脂素对大鼠肝星状细胞(HSCs)表达碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)的影响,探讨内脂素在肝纤维化中的作用。方法对培养激活的大鼠HSCs分别给予不同浓度(0、50、100和200 ng/mL)的内脂素进行刺激,在不同时限(6 h、12 h、24 h及36 h)收集细胞总RNA。用实时荧光定量(SYBR GreenⅠ)RT-PCR检测FGF-2 mRNA的表达。结果 50 ng/mL内脂素孵育HSCs 24 h可上调FGF-2 mRNA的表达(1.71±0.34 vs.1,P<0.05),随着刺激浓度的增加FGF-2 mRNA的表达进一步上调(P<0.05)。100 ng/mL内脂素孵育HSCs 12h可促进FGF-2 mRNA的表达(1.68±0.31 vs.1,P<0.05),随着刺激时间的延长,FGF-2 mRNA的表达逐渐增加(P<0.05)。结论内脂素能诱导大鼠HSCs表达FGF-2,提示内脂素可能通过诱导FGF-2的表达参与肝纤维化的发病过程。
- 袁聪梁宁林刘小菁杨丽
- 关键词:肝星状细胞碱性成纤维细胞生长因子
- 巨噬细胞游走抑制因子参与肝星状细胞活化的实验研究被引量:2
- 2013年
- 目的探讨大鼠肝星状细胞(HSC)活化过程中表达巨噬细胞游走抑制因子(MIF)的变化,以及MIF特异的反义寡核苷酸(MIF-ASONs)对活化的原代HSC表达MIF和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响。方法检测分离培养不同时间(1、3、5、7和10 d)的HSC,以及转染MIF-ASONs后的HSC中MIF和α-SMA的表达。基因表达用RT-PCR,蛋白表达用酶联免疫吸附(ELISA)、免疫荧光(IF)或免疫细胞化学(ICC)检测。结果随着培养时间延长,原代HSC形态逐渐改变,脂滴减少消失,自行激活;MIF基因和蛋白表达逐渐增加(P<0.05),且MIF与α-SMA mRNA表达正相关(r=0.944,P<0.01);活化的原代HSC转染MIF-ASONs后MIF与α-SMA基因表达和MIF蛋白表达均比对照组低(P<0.05)。结论 HSC活化过程中,MIF表达逐渐增加并与α-SMA正相关;MIF-ASONs可抑制HSC活化,提示MIF是HSC活化过程中一种重要的细胞因子,可能参与肝纤维化的发生。
- 朱永军胡晓琳门若庭杨丽
- 关键词:肝纤维化肝星状细胞巨噬细胞游走抑制因子
- 奥美拉唑对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响被引量:1
- 2012年
- 目的探讨质子泵抑制剂奥美拉唑(omeprazole,OME)对肝癌HepG2细胞增殖和细胞凋亡的影响。方法不同浓度(0、10、20、40、80、160mg/L)的OME作用于HepG2细胞后,分别于不同时间(24h、48h),采用甲基四唑蓝(MTT)法测定OME对HepG2细胞增殖的影响;5-乙炔基-2’-脱氧尿嘧啶核苷(Edu)荧光检测法测定DNA合成期(S期)细胞所占比例;Hoechst33342染色法检测细胞凋亡。结果 MTT结果示,10、20mg/L OME对HepG2细胞增殖无明显抑制,而40、80、160mg/L OME可产生明显抑制作用,其中80mg/L OME作用最强;且相同浓度OME作用下,48h较24h对HepG2的抑制率增加。Edu荧光检测法表明,不同浓度OME处理细胞24h,Edu孵育2h后处于DNA合成期(S期)HepG2细胞比例与对照组比较,在20、40、80、160mg/L组减少(P<0.05)。Hoechst33342染色法表明,与对照组相比,40、80、160mg/L OME处理HepG2细胞24h后,细胞凋亡增加(P<0.05)。结论 OME能抑制肝癌HepG2细胞的增殖,并可促进细胞凋亡。
- 魏艳梁宁林朱永军吴文超刘小菁杨丽
- 关键词:奥美拉唑肝癌增殖凋亡
- 维拉帕米对肝癌细胞株HepG2细胞增殖及迁移的影响被引量:1
- 2011年
- 目的探讨钙离子通道阻滞剂维拉帕米(VR)对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖、DNA合成及细胞迁移的影响。方法在HepG2细胞培养液中加入不同浓度的VR(0、1、5、10、15、20μg/mL),采用甲基四唑蓝(MTT)法测定VR对HepG2细胞增殖的影响;5-乙炔基-2’-脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,Edu)荧光检测法测定细胞DNA合成期(S期)细胞所占比例;划痕试验测定细胞的迁移距离。结果 MTT结果显示经VR处理24 h、48 h后除1、5μg/mL VR在24 h对细胞无抑制作用外(P>0.05),其余浓度及时间段对HepG2的增殖均有抑制作用(P<0.05),并且相同浓度VR刺激48 h较24 h对HepG2的抑制率增加(P<0.05)。Edu结果显示HepG2经VR作用24 h后,0、1、5、10、15、20μg/mL处理组HepG2的S期细胞所占比例分别为51.5%±3.78%、52.4%±3.26%、53.1%±1.94%、39.6%±4.25%、40.2%±2.67%、42.6%±3.13%。10、15、20μg/mL处理组S期细胞所占比例较1、5μg/mL组及对照组下降(P<0.05),与MTT结果一致。划痕试验结果显示经10、15、20μg/mL VR处理24 h后,与对照组相比,细胞迁移距离缩短(P<0.05)。结论 VR对肝癌细胞株HepG2的增殖及迁移均有抑制作用,VR可能成为肝癌治疗的新靶标。
- 梁宁林魏艳吴文超刘小菁杨丽
- 关键词:维拉帕米肝癌迁移增殖