国家自然科学基金(81102106)
- 作品数：7 被引量：5H指数：1
- 相关作者：王欣杨雪莹张明刘静王延让更多>>
- 相关机构：天津市疾病预防控制中心天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰β-catenin基因对二氧化硅诱导的MH-S细胞中基质金属蛋白酶表达的影响被引量：1
- 2017年
- 目的观察β-catenin短发夹RNA干扰(shRNA)重组慢病毒对二氧化硅诱导的小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S细胞中基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinases,MMP)9表达的影响。方法将MH-S细胞分为4组:空白细胞对照组(MH-S)、SiO_2诱导组(silica)、病毒干扰组(silica+LV-shβ-catenin)、病毒对照组(silica+LV-shβ-catenin-NC),除空白细胞对照组外,各组细胞均用终浓度为200μg/ml的SiO_2刺激,培养18 h后,western blot检测各组细胞β-catenin和MMP9蛋白表达水平,realtime-PCR检测各组细胞MMP9 mRNA水平。结果 SiO_2诱导后,与silica组和silica+LV-shβ-cateninNC组比较,silica+LV-shβ-catenin组β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05);realtime-PCR和western blot检测结果显示,silica+LV-shβ-catenin组细胞中MMP9的mRNA和蛋白表达较silica组和silica+LV-shβ-catenin-NC组均显著降低(P<0.05)。结论重组慢病毒LV-shβ-catenin能够有效抑制经SiO_2诱导的MH-S细胞株β-catenin蛋白表达,并对MMP9的表达有明显抑制作用。
- 王欣曾强刘静杨雪莹
- 关键词：RNA干扰MMP9
- RNA干扰CD36对大鼠肺泡巨噬细胞TGF-β_1活化影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察RNA干扰CD36基因表达对博莱霉素(BLM)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞潜在转化生长因子-β1(L-TGF-β1)活化影响。方法实验设BLM组、Lv-shCD36(CD36 shRNA重组慢病毒)组、Lv-shCD36对照组,各组细胞均用BLM刺激,采用realtime-PCR和western blot检测细胞中CD36干扰效率;采用貂肺上皮细胞(CCL-64)增殖抑制实验检测培养上清中TGF-β1活性。结果 Lv-shCD36组细胞CD36 mRNA表达均低于BLM组和Lv-shCD36对照组,与Lv-shCD36对照组比较,干扰效率可达83%;与BLM组、Lv-shCD36对照组比较,Lv-shCD36组细胞CD36蛋白表达均降低;Lv-shCD36组培养上清中活化转化生长因子-β1(TGF-β1)含量(91.82±36.79)pg/10μL和TGF-β1活化率(19.80±7.98)%均低于BLM组和Lv-shCD36对照组(P<0.05)。结论通过RNA干扰CD36基因表达能够抑制BLM诱导的大鼠肺泡巨噬细胞分泌的L-TGF-β1的活化。
- 王欣柏建芸
- 关键词：RNA干扰CD36肺泡巨噬细胞
- RNA干扰CD36表达对潜在转化生长因子-β1活化和矽肺纤维化的抑制被引量：1
- 2013年
- 目的观察大鼠矽肺模型中RNA干扰CD36基因表达对潜在转化生长因子-β1（L—TGF—B．）的活化及矽肺纤维化的抑制作用。方法将Wistar大鼠分为生理盐水组、SiO2模型组（10mgSiO2）、CD36shRNA表达的重组慢病毒（Si02＋IJv—shCD36）组和对照慢病毒（SiO2＋Lv—shCD36一NC）组，每组24只。染尘后7、21、28d处死动物，貂肺上皮细胞增殖抑制实验检测肺泡灌洗液（BALF）中转化生长因子一B，（TGF—p。）的活性；HE和VG染色观察肺组织病理变化；碱裂解法测定肺羟脯氨酸含量。结果染尘7d时，SiO，＋Lv—shCD36组大鼠肺泡巨噬细胞CD36mRNA的表达明显低于生理盐水组、SiO2模型组和SiO2＋lJv—shCD36一NC组，差异有统计学意义（p〈O．05）。SiO2＋Lv．shCD36组大鼠BALF中TGF．13．活化量和活化率均明显低于模型组和SiO2＋lJv—shCD36一NC组，差异有统计学意义（P〈0．05）。染尘28d时，SiO2＋Lv—shCD36组大鼠肺组织可见细胞性矽结节，而模型组和SiO2＋Lv—shCD36-NC组大鼠肺组织可见纤维细胞性矽结节。染尘21d和28d时，SiO2＋Lv—shCD36组大鼠肺羟脯氨酸含量明显低于SiO2模型组和SiO，＋Lv—shCD36-NC组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论大鼠矽肺模型中通过RNA干扰CD36基因表达能够对L—TGF—B，的活化和矽肺纤维化具有一定的抑制作用。
- 王欣王延让杨德一张明
- 关键词：矽肺CD36转化生长因子Β1纤维化
- 干扰MH-S细胞株β-catenin表达的shRNA慢病毒载体构建及功能鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的针对β-catenin基因构建短发夹RNA(short harpin RNA,shRNA)慢病毒表达载体,鉴定β-catenin基因干扰效率,并检测其对小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S功能的影响。方法设计并构建5个针对β-catenin基因的shRNA干扰载体。实验分为空白细胞对照组(MH-S)、二氧化硅诱导组(silica)、病毒干扰组(silica+LV-shβ-catenin)、病毒对照组(silica+LV-shβ-catenin-NC)4组,realtime-PCR检测各组细胞β-catenin基因mRNA的表达水平,ELISA检测各组细胞培养上清中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的分泌情况。结果二氧化硅诱导后,与silica组和silica+LV-shβ-catenin组比较,silica+LV-shβ-catenin-NC组β-catenin mRNA的表达率降低(均有P<0.05),silica+LVshβ-catenin-NC组TGF-β1、IL-6和TNF-α的分泌减少(均有P<0.05)。结论构建的shRNA慢病毒载体能够有效抑制经二氧化硅诱导的MH-S细胞株β-catenin基因表达,并抑制TGF-β1、IL-6和TNF-α的分泌,为体内矽肺纤维化的分子机制研究奠定基础。
- 王欣王延让杨德一杨雪莹刘静张明
- 关键词：慢病毒属细胞因子类
- RNA干扰CD36表达对大鼠矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白表达的影响
- 2012年
- 为观察RNA干扰CD36基因表达对大鼠实验性矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白表达是否有抑制作用,选取健康Wistar大鼠96只,随机分为4组,即生理盐水组、SiO2模型组(10 mg SiO2/大鼠)、SiO2+Lv-shCD36(CD36 shRNA表达的重组慢病毒)组和SiO2+Lv-shCD36-NC(对照慢病毒)组。染尘后7、21、28 d处死动物,应用免疫组织化学方法测定大鼠肺组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达,并采用图像分析系统进行定量分析。SiO2+Lv-shCD36组大鼠肺组织中Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白阳性着色弱于SiO2模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,SiO2+Lv-shCD36组大鼠Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白的平均积分光密度值低于SiO2模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,且差异有统计学意义(P<0.05)。提示RNA干扰CD36基因表达对大鼠实验性矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达具有明显抑制作用。
- 王欣柏建芸
- 关键词：RNA干扰矽肺
- 微小RNA在肺部疾病中的作用
- 2016年
- 微小RNA（miRNA）作为关键的调控因子在多种疾病发生发展过程中发挥重要作用，成为生物医药领域的研究焦点。它是一类长约22～25个核苷酸的内源性非编码RNA，成熟的miRNA可以与靶基因mRNA的3’端非编码区互补结合，从而抑制靶基因翻译或促进靶基因mRNA降解。
- 王欣王延让杨德一
- 关键词：肺部疾病微小RNA非编码RNA基因MRNARNA降解医药领域
