转基因生物新品种培育专项(2009ZX08009-034B)
- 作品数:3 被引量:19H指数:2
- 相关作者:陈国华弭宝彬李莹王殿东王烨更多>>
- 相关机构:中国农业科学院蔬菜花卉研究所北华大学中南大学更多>>
- 发文基金:转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 转MAPK双链RNA干扰表达载体黄瓜对根际土壤真菌群落多样性的影响被引量:5
- 2013年
- 为了明确MAPK双链RNA干扰表达载体转基因黄瓜植株对根际土壤真菌区系的影响,本研究采用18S rRNA基因克隆文库方法对转和非转基因黄瓜根际土壤真菌群落多样性进行分析,结果表明2种土壤的真菌类群包括子囊菌亚门真菌、担子菌亚门真菌、壶菌门真菌、未定地位真菌和未分类真菌,子囊菌亚门真菌为优势菌群。非转基因黄瓜土壤真菌多样性略高于转基因黄瓜土壤,但优势真菌梭孢壳菌Thielaviaaustraliensis的比例(34.7%)明显低于转基因黄瓜土壤(65.1%),而非转基因黄瓜土壤中比例较高的尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum(12.9%)未在转基因黄瓜土壤中发现。这表明MAPK双链RNA干扰表达载体的转基因黄瓜植株对土壤真菌具有一定的影响,对土壤中某些类群真菌具有一定的抑制作用。
- 弭宝彬田雪亮王殿东李莹王烨陈国华
- 关键词:土壤真菌RRNA克隆文库转基因
- 转Bt cry6A基因的灰葡萄孢菌对松材线虫致死效应分析被引量:2
- 2013年
- 松材线虫是重要的外来入侵物种,给我国松林造成了巨大的破坏,目前尚没有十分有效的防治方法。苏云金芽胞杆菌(Bt)晶体蛋白对秀丽杆线虫及根结线虫具有一定的致死作用。为验证Bt晶体蛋白是否对松材线虫具有致死作用,本研究构建农杆菌介导的丝状真菌转化载体pHD-OH,将苏云金芽胞杆菌晶体蛋白(Bt)cry6A基因和绿色荧光蛋白sGFP基因转化至灰葡萄孢菌中,用灰葡萄孢菌转化子喂饲松材线虫,分析Bt晶体蛋白对松材线虫种群增长的影响。结果表明,sGFP基因和cry6A基因均转入灰葡萄孢菌中,且能够稳定表达,3个cry6A基因转化子为单拷贝。cry6A基因转化子喂饲松材线虫后,对松材线虫产生致死效应,抑制线虫的种群增长,而sGFP转化子和野生型灰葡萄孢菌对松材线虫的种群增长量和死亡率没有显著影响。这表明cry6A基因对松材线虫具有生防潜力。
- 王殿东周梦溪罗中钦谢丙炎杨宇红茆振川刘二明陈国华
- 关键词:苏云金芽胞杆菌灰葡萄孢菌松材线虫致死效应
- 转mapk双链RNA干扰表达载体黄瓜对根际土壤细菌多样性的影响被引量:13
- 2013年
- 随着RNA干扰技术的发展,通过植物表达病原物特异的dsRNA来防治植物病害的转基因作物越来越多。转根结线虫mapk双链RNA表达载体的黄瓜能够通过RNA干扰作用沉默线虫的mapk基因,对根结线虫具有良好的防治效果。为了评价该转基因黄瓜的安全性,明确mapk双链RNA干扰表达载体转基因黄瓜植株对根际土壤细菌多样性的影响,采用16S rRNA基因克隆文库方法对非转基因黄瓜和转基因黄瓜土壤细菌群落多样性进行分析。结果表明,非转基因黄瓜土壤细菌文库包含124个OTU(可操作分类单元),转基因黄瓜土壤细菌文库包含122个OTU。2个文库共同拥有的OTU为115个。2个文库都包含13个类群细菌,Acidobacteria、Actinobacteria、Armatimonadetes、Bacteroidetes、candidate division BRC1、Chloroflexi、Firmicutes、Gemmatimonadetes、Nitrospira、Planctomycetes、Proteobacteria、Verrucomicrobia、unclassified_Bacteria。其中Proteobacteria、Bacteroidetes、Chloroflexi和Acidobacteria是优势菌群。其他细菌类群数量相对较少。在纲分类水平上,两个文库包含的细菌类群一致,且各类群细菌比例差异不大。在Acidobacteria门中,Acidobacteria_Gp6为优势菌群。在Bacteroidetes门中,Sphingobacteria纲细菌数量最多。在Chloroflexi门中,unclassified Chloroflexi细菌最多。在Proteobacteria门中,其中Betaproteobacteria纲的细菌数量最多。从多样性指数角度分析,两种土壤细菌群落的Shannon、Simpson和Chao值差异不大。总体来看,两种土壤细菌类群差异不显著,转基因黄瓜未对根际土壤细菌群落产生明显影响。
- 陈国华弭宝彬李莹李春月
- 关键词:土壤细菌RRNA克隆文库